張芾男，張卓男，滕 利，盧建建，胡國棟，靳小雷，歸 來

(1河北省人民醫(yī)院，石家莊050051;2河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院;3中國醫(yī)學科學院整形外科醫(yī)院)

乳房肥大癥又稱巨乳癥，多在青春期和妊娠期女性中發(fā)病，其病因及發(fā)生機制尚不完全清楚，有關其病因學的研究很少。雌激素在乳腺的生長發(fā)育過程中起著重要作用。芳香化酶是催化雄激素轉化為雌激素的限速酶，能促進雌激素的合成，從而使局部組織中雌激素的濃度升高。為明確芳香化酶在乳房肥大癥發(fā)生過程中的作用，2004年9月～2010年12月，我們采用免疫組化法檢測青春期乳房肥大癥和小乳癥患者乳腺組織中的芳香化酶。現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 18例青春期乳房肥大癥患者(患者在青春期時發(fā)病，出現(xiàn)乳房過度發(fā)育，異常增大)，為乳房肥大癥組。患者均為女性，年齡18～25歲，平均21.94歲。病程3～9年。所有病例手術日期均為月經(jīng)期后的第2～3周。每側切除乳腺重量368～836 g，平均516 g。排除以下患者:①有乳腺纖維腺瘤病史;②月經(jīng)周期不規(guī)律;③2個月內(nèi)有服用雌激素類藥物史;④有妊娠史;⑤有乳腺癌家族史或病史;⑥乳頭溢液;⑦穿刺針吸或切除組織標本中有囊腫、積液或積乳;⑧組織病理學檢查有非典型增生。手術日期均為月經(jīng)期后的第2～3周。另取12例原發(fā)性小乳癥患者為小乳癥組?；颊呔鶠榕?，年齡21～26歲，平均23.4歲。排除標準與乳房肥大癥組相同，手術日期同樣均為月經(jīng)期后的第2～3周。

1.2 芳香化酶的檢測及結果判定方法 將兩組患者手術切取的乳腺組織標本用10%中性甲醛固定，石蠟包埋，4 μm連續(xù)切片，采用免疫組化法SP法檢測芳香化酶。操作按試劑盒說明書進行。用已知陽性的組織做陽性對照，用PBS緩沖液代替一抗做空白對照。由兩位病理科醫(yī)生在不知患者分組結果的情況下用光學顯微鏡分別觀察每張切片，有爭議的切片再請其他病理科醫(yī)生重新判定。芳香化酶的陽性反應為細胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒。每例標本選取5個高倍鏡視野進行細胞計數(shù)，計算染色陽性的細胞占所計數(shù)細胞的百分比，取平均值。按陽性染色細胞的比例半定量分級:陽性細胞比例＜5%為陰性，～25%為弱陽性，＞26%為強陽性。

2 結果

小乳癥組患者乳腺組織中芳香化酶表達均為陰性，乳房肥大癥組患者乳腺小葉內(nèi)導管上皮細胞中中均有芳香化酶的表達，其中8例強陽性。

3 討論

乳腺作為性激素的靶器官，其生長發(fā)育和功能均依賴于性激素的支持，其中雌激素尤為重要，乳腺的發(fā)育與其密切相關，如雌激素可以促進青春期乳腺導管的生長和妊娠期小葉腺泡的生長，刺激促甲狀腺素、泌乳素等其他激素間接作用于乳腺。芳香化酶又稱雌激素合成酶，是催化雄激素轉化為雌激素的限速酶，在許多雌激素敏感組織中表達，如芳香化酶的表達對于青春期乳房的發(fā)育是必需的［1］。雌激素在女性絕經(jīng)前主要由卵巢顆粒細胞合成，絕經(jīng)后隨著卵巢合成雌激素功能的的下降，性腺外組織合成的雌激素成為血循環(huán)中雌激素的主要來源［2，3］。絕經(jīng)后的女性，芳香化酶可在乳房、骨、脈管系統(tǒng)、腦組織局部產(chǎn)生高水平的雌激素，而不影響血循環(huán)中的雌激素水平。研究證實在雌激素依賴性腫瘤，如乳腺癌、子宮內(nèi)膜癌中都有芳香化酶的過度表達。乳腺癌組織局部表達的芳香化酶能促進雌激素的合成，使乳腺癌組織局部雌激素的濃度升高［4，5］。

芳香化酶屬于細胞色素P450家族，在人體見于卵巢、胎盤、睪丸、腦、乳腺、脂肪組織、骨與皮膚及某些病理組織如乳腺癌組織、子宮內(nèi)膜腫瘤組織、異位的子宮內(nèi)膜組織、子宮平滑肌瘤組織，正常無病的成年肝、腎上腺和子宮組織沒有芳香化酶的表達［6］。芳香化酶在這些組織中分別以不同的作用機制發(fā)揮其生理或病理功能，并受其他多種因素的影響。芳香化酶的數(shù)量和活性直接決定正?；虍惓＝M織中雌激素的水平，從而維持正常組織中與雌激素相關的生理功能，以及影響雌激素依賴性疾病的發(fā)生、發(fā)展和預后。

目前在乳腺疾病的研究中，由于健康人正常的乳腺組織難以獲取，故不得不選取良性或惡性乳腺腫瘤病灶周圍的乳腺組織作為對照，但嚴格地講這并不是絕對正常的組織，因為經(jīng)證實這種組織中甾體激素受體的含量常常增加。因此本研究沒有采用這種對照方法，而是選擇與乳房肥大癥相對應的小乳癥患者作為對照。本研究結果顯示，青春期乳房肥大癥乳腺組織中芳香化酶的陽性表達明顯高于原發(fā)性小乳癥，由此提示青春期乳房肥大癥的發(fā)生可能與乳腺組織中芳香化酶的表達情況有一定關系。筆者推測乳腺組織中芳香化酶的表達增加促進了性腺外雌激素的生物合成，使乳腺組織局部雌激素的濃度升高，從而導致了乳腺的過度發(fā)育。有學者通過檢測青春期乳房肥大癥乳腺組織中芳香化酶mRNA的表達情況，發(fā)現(xiàn)乳房肥大癥患者患者乳腺組織中香化酶mRNA的表達明顯高于正常乳腺組，這從基因水平支持了我們的設想。

由于本研究以小乳癥作為對照，因此本研究結果僅能證明青春期乳房肥大癥患者乳腺組織中芳香化酶的陽性表達明顯高于原發(fā)性小乳癥患者乳腺組織中芳香化酶的陽性表達，尚不能得出青春期乳房肥大癥患者乳腺組織中芳香化酶表達高于正常水平的結論。我們在以后的研究中仍需設法選取正常乳腺組織作為對照，以進一步證實青春期乳房肥大癥乳腺組織中是否存在芳香化酶的高水平表達。

［1］Simpson ER，Clyne C，Rubin G，et al.Aromatase-a brief overview［J］.Annu Rev Physiol，2002，64(4):93-127.

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［3］Pauley RJ，Santner SJ，Tait LR，et al.Regulated CYP19 aromatase transcription in breast stromal fibroblasts［J］.J Clin Endocrinol Metab，2000，85(2):837-846.

［4］Yue W，Wang JP，Hamilton CJ，et al.In situ aromatization enhances breast tumor estradiol levels and cellular proliferation［J］.Cancer Res，1998，58(5):927-932.

［5］Lu Q，Nakmura J，Savinov A，et al.Expression of aromatase protein and messenger ribonucleic acid in tumor epithelial cells and evidence of functional significance of locally produced estrogen in human breast cancers［J］.Endocrinology，1996，137(7):3061-3068.

［6］Hinshelwood MM，Mendelson CR.Tissue-specific expression of the human CYP19(aromatase)gene in ovary and adipose tissue of transgenic mice［J］.J Steroid Biochem Mol Biol，2001，79(1-5):193-201.