丁 振 鐸

(黑龍江生態(tài)工程職業(yè)學(xué)院 生物技術(shù)系，哈爾濱 150025)

隨著社會(huì)的發(fā)展，人類生活節(jié)奏加快，生活壓力變大，環(huán)境污染加劇，導(dǎo)致多數(shù)人免疫系統(tǒng)的抵抗能力下降，很多疾病的發(fā)病率都呈上升趨勢(shì)。在20世紀(jì)50年代就有把真菌多糖作為藥物進(jìn)行研究的報(bào)道，經(jīng)過10余年的發(fā)展，真菌多糖作為免疫促進(jìn)劑引起世界各國的研究興趣，如今已經(jīng)成為國際上公認(rèn)的具有較好療效的生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑。目前多糖是國內(nèi)外研究的熱點(diǎn)問題之一，它與蛋白質(zhì)、核酸、脂類并稱為構(gòu)成生命的四大基本物質(zhì)[1]。真菌多糖作為真菌類藥物的一個(gè)活性成分，受到了學(xué)術(shù)界廣泛而持續(xù)的關(guān)注，不斷地對(duì)其進(jìn)行深入研究，并取得了相當(dāng)可喜的成績。許多關(guān)于真菌多糖的研究報(bào)道顯示多數(shù)食用真菌多糖都具有抗腫瘤、抗輻射、抗衰老及免疫調(diào)節(jié)等藥理作用，部分多糖已經(jīng)在臨床上普遍用于治療癌癥。

榛蘑，學(xué)名蜜環(huán)菌，隸屬于真菌門，擔(dān)子菌亞門，層菌綱，傘菌目，白蘑科，蜜環(huán)菌屬[2]。榛蘑是我國一種重要的藥食兩用真菌，由其制成的藥物即使大劑量服用，也不會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重的毒副作用，是藥品食品工業(yè)共同關(guān)注的焦點(diǎn)[3]。榛蘑的菌絲體和菌絲索在黑暗處能發(fā)光[4]，與蘭科植物天麻具有極為密切的營養(yǎng)關(guān)系。大量的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，榛蘑的菌絲體和發(fā)酵液都具有與天麻相似的藥理作用和臨床療效。因此，對(duì)榛蘑進(jìn)行深入研究，不僅能緩解天麻藥材資源緊張問題，而且可以減少藥物的毒副作用。許多學(xué)者對(duì)榛蘑的化學(xué)成分做了大量的研究工作，但對(duì)于每一種成分的具體功能還不是很清楚。其化學(xué)成分豐富，包括氨基酸、蛋白質(zhì)、脂類化合物、嘌呤衍生物、人體中所必需的微量元素和原伊魯烷型倍半萜類成分等。榛蘑多糖(AMP)是從其子實(shí)體、菌絲體和發(fā)酵液中分離出來的，可以控制細(xì)胞的分裂分化和調(diào)節(jié)細(xì)胞生長衰老的一類活性多糖[5]，有具有抗輻射、促進(jìn)造血、抑制腫瘤生長、調(diào)節(jié)免疫等藥理作用。有關(guān)榛蘑多糖的研究在國內(nèi)外已有很多報(bào)道，涉及到生化、藥理、臨床等各個(gè)方面，闡明了它的結(jié)構(gòu)、功能以及構(gòu)效關(guān)系，對(duì)中藥創(chuàng)新藥的研制具有十分重要的意義[5]。本文將對(duì)有關(guān)榛蘑多糖藥理作用近年來的研究現(xiàn)狀進(jìn)行綜述。

1 榛蘑多糖的免疫增強(qiáng)作用

大量文獻(xiàn)報(bào)道榛蘑多糖具有免疫增強(qiáng)作用，能增強(qiáng)鼠的免疫能力、促進(jìn)生長，但對(duì)其作用機(jī)理闡述得并不完全一致。李延平等[6]研究表明，榛蘑多糖通過刺激骨髓細(xì)胞使幼稚細(xì)胞增多，分化成成熟細(xì)胞，致使分葉核細(xì)胞增多，保護(hù)骨髓造血系統(tǒng)，拮抗環(huán)磷酰胺對(duì)骨髓細(xì)胞的損傷，其作用結(jié)果呈劑量依賴性關(guān)系。Li YP[7]等在使用昆明純種小鼠研究榛蘑多糖時(shí)發(fā)現(xiàn)，榛蘑多糖對(duì)環(huán)磷酰胺引起的小鼠骨髓細(xì)胞損傷具有保護(hù)作用。王惠國等[8]研究表明，給小鼠腹腔注射AMP具有增加小鼠吞噬細(xì)胞的吞噬功能；促進(jìn)脾臟T淋巴細(xì)胞的增殖能力；提高小鼠血清溶血素水平的作用。于敏等[9]研究結(jié)果表明，AMP能抵抗環(huán)磷酰胺作用前期白細(xì)胞數(shù)下降和環(huán)磷酰胺作用后期白細(xì)胞數(shù)過分升高，一定劑量的AMP能顯著降低肝臟重量，表明其對(duì)免疫器官有一定程度的影響。AMP能顯著增強(qiáng)T細(xì)胞介導(dǎo)遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)，說明可增強(qiáng)小鼠的體液免疫反應(yīng)及細(xì)胞免疫反應(yīng)能力[10]。另有報(bào)道AMP能在體外顯著增強(qiáng)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬中性紅的作用[11]，并可誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞產(chǎn)生NO且呈現(xiàn)一定的濃度相關(guān)性，在高濃度時(shí)，對(duì)巨噬細(xì)胞分泌IL-1有一定的促進(jìn)分泌作用。AMP能增強(qiáng)機(jī)體的特異性和非特異性免疫功能，可作為免疫增強(qiáng)劑。綜合上述，榛蘑多糖是通過調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞以及免疫分子等多方面發(fā)揮其正向免疫調(diào)節(jié)作用，具有較好的藥用價(jià)值，蜜環(huán)菌多糖是否可作為骨髓細(xì)胞的保護(hù)劑，抗放射，抗化學(xué)藥物對(duì)骨髓造細(xì)胞損傷，是值得深入研究的課題。

2 榛蘑多糖的抗腫瘤作用

經(jīng)實(shí)驗(yàn)研究可知，榛蘑多糖亦具有抗腫瘤的生理活性。實(shí)驗(yàn)中，將肝癌細(xì)胞SMMC-7721進(jìn)行體外培養(yǎng)，研究AMP的抗腫瘤作用。在倒置顯微鏡下觀察AMP以0.05mg/ml、0.10mg/ml及0.20mg/ml三個(gè)濃度給藥48h后，肝癌細(xì)胞SMMC-7721的形態(tài)學(xué)變化；采用MTT法檢測(cè)蜜環(huán)菌多糖對(duì)肝癌細(xì)胞SMMC-7221的增殖抑制作用；采用Brandford法測(cè)定AMP對(duì)肝癌細(xì)胞SMMC-7221重要蛋白合成的影響；采用免疫細(xì)胞化學(xué)法分析其對(duì)凋亡相關(guān)蛋白bcl-2表達(dá)的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，榛蘑多糖可使細(xì)胞間隙增大，懸浮細(xì)胞增多，能夠抑制腫瘤細(xì)胞的增殖；同時(shí)在給藥濃度為0.10mg/ml和0.20mg/ml時(shí)，能夠顯著抑制腫瘤細(xì)胞蛋白質(zhì)的合成；榛蘑多糖還能夠下調(diào)凋亡抑制蛋白bcl-2的表達(dá)水平，此實(shí)驗(yàn)指出，榛蘑多糖是通過抑制腫瘤細(xì)胞增殖以及促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡，從而達(dá)到抗腫瘤作用的。榛蘑多糖的抗腫瘤作用不僅在體外實(shí)驗(yàn)中得到驗(yàn)證，也體現(xiàn)在化學(xué)結(jié)構(gòu)鑒定和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，經(jīng)紅外光譜檢測(cè)，榛蘑多糖具有β-型糖苷鍵，這種構(gòu)效關(guān)系的多糖具有抗腫瘤的藥理活性，并且在對(duì)移植S180小鼠進(jìn)行在體抗腫瘤實(shí)驗(yàn)，也證實(shí)其抗腫瘤的作用。

3 榛蘑多糖的降糖作用

研究發(fā)現(xiàn)榛蘑多糖(AMP-1)能使正常小鼠的糖耐量增強(qiáng)。能使四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖顯著降低。同時(shí)發(fā)現(xiàn)AMP-1對(duì)胰島細(xì)胞的分泌也有一定的促進(jìn)作用[12]。操玉平等[13]通過培養(yǎng)大鼠胰島素瘤細(xì)胞(INS-1)，并以四氧嘧啶(AXN)損傷細(xì)胞，培養(yǎng)液中加入不同濃度的AMP-1，檢測(cè)其對(duì)INS-l細(xì)胞葡萄糖刺激的胰島素和C肽分泌量的影響，并檢測(cè)細(xì)胞存活率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在一定濃度范圍內(nèi)AMP-l對(duì)AXN損傷的INS-l細(xì)胞分泌胰島素和C肽均具有一定的促進(jìn)作用，尤其是在葡萄糖濃度為16.7mmol/L時(shí)，效果明顯；因此可以得出AMP-l可減少AXN對(duì)INS-l細(xì)胞的損傷，增加INS-l細(xì)胞的存活率。陸軍等[14]研究發(fā)現(xiàn)AMP-1能使INS-1細(xì)胞NOS活性降低，NO和MDA含量減少，同時(shí)使SOD的活性增強(qiáng)，增加了GSH的含量，因此在一定濃度范圍的AMP-1對(duì)葡萄糖刺激下INS-1細(xì)胞的胰島素分泌的促進(jìn)作用，可能與AMP-l能夠增加細(xì)胞清除自由基能力有關(guān)。AMP對(duì)血糖的作用機(jī)制尚不明確。而榛蘑多糖可在較短時(shí)間內(nèi)大量獲得，多糖含量高，便于對(duì)榛蘑多糖關(guān)于血糖影響的研究。

4 榛蘑多糖的抗氧化及抗衰老作用

榛蘑多糖的抗氧化抗衰老作用近些年來取得較大的研究進(jìn)展?，F(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)一部分糖類復(fù)合物可通過清除自由基、抑制脂質(zhì)過氧化、調(diào)節(jié)免疫功能、調(diào)節(jié)核酸和蛋白質(zhì)代謝等途徑起到抗氧化作用從而延緩機(jī)體衰老。榛蘑多糖作為蜜環(huán)菌的主要成分之一亦被發(fā)現(xiàn)有此項(xiàng)作用，在研究培養(yǎng)藥用型真菌蜜環(huán)菌抗氧化作用活性時(shí)，發(fā)現(xiàn)蜜環(huán)菌勻漿提取物榛蘑多糖具有強(qiáng)大的清除自由基和抗脂質(zhì)過氧化作用[15]。在研究蜜環(huán)菌誘導(dǎo)細(xì)胞間粘附因子ICAM-1的表達(dá)能力時(shí)，發(fā)現(xiàn)榛蘑多糖在誘導(dǎo)ICAM-1和THP-1細(xì)胞中的mRNA的表達(dá)存在劑量和時(shí)間依賴關(guān)系，在人體單核細(xì)胞中，榛蘑多糖誘導(dǎo)ICAM-1的表達(dá)是通過ROS/JNK信號(hào)通路去激活轉(zhuǎn)錄因子NF -κB、AP -1、SP - 1和STAT-1的[16]。沈明花[17]等研究結(jié)果顯示榛蘑多糖對(duì)羥基自由基和二苯基苦味酰基苯肼具有較顯著的清除能力，甚至可以提高肝組織中的SOD、CAT、GSH-Px活性并且抑制MDA生成，因而具有明顯的抗氧化作用。虞磊[18]等從自由基代謝的角度探討了蜜環(huán)菌菌索多糖的抗衰老機(jī)制，通過觀察D-半乳糖致衰小鼠模型的跳臺(tái)法和迷宮法學(xué)習(xí)記憶能力，測(cè)定衰老小鼠部分組織中的SOD、MDA、NO、GSH-Px，發(fā)現(xiàn)榛蘑菌索多糖可通過調(diào)節(jié)生物的機(jī)體免疫功能或者清除自由基來延緩機(jī)體組織衰老，觀察果蠅的壽命發(fā)現(xiàn)蜜環(huán)菌菌索多糖亦可顯著延長果蠅的平均壽命和提高果蠅的最長壽命。丁誠實(shí)[19]等通過觀察榛蘑殼聚糖對(duì)D-半乳糖致衰老小鼠的影響和對(duì)果蠅壽命的影響，測(cè)定受試小鼠血清中的SOD活性、MDA的含量以及分析小鼠記憶學(xué)習(xí)行為等可以得出榛蘑殼聚糖有顯著抗衰老作用。

5 榛蘑多糖的抗突變作用

張穎等人在研究榛蘑多糖對(duì)低能離子束誘變作用的恢復(fù)效應(yīng)時(shí)，發(fā)現(xiàn)從蜜環(huán)菌Am99-1菌株人工發(fā)酵菌體內(nèi)分離出來的榛蘑多糖Aml，誘變?cè)礊榈湍躈+離子束，受試動(dòng)物為黑腹果蠅，并檢測(cè)Aml對(duì)離子束誘變果蠅的恢復(fù)功能。此實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，1.0%和l.5%濃度的榛蘑多糖Aml可以使受試果蠅蛹的孵出率提高，當(dāng)代及F2代果蠅突變率降低，同時(shí)染色體水平上的檢測(cè)也證實(shí)了此結(jié)論。因此得出榛蘑多糖對(duì)于低能離子束誘變具有一定的防護(hù)作用[20]。

6 其他作用

榛蘑多糖具有鎮(zhèn)靜作用，能明顯減少小鼠自發(fā)活動(dòng)，并能使環(huán)己烯巴比妥鈉或戊巴比妥鈉引起的小鼠睡眠時(shí)間顯著延長。研究發(fā)現(xiàn)榛蘑多糖可以并通過抑制NO、INOS、COX-2和THP-1細(xì)胞中的活性因子的表達(dá)，而達(dá)到抗炎作用[21]。在臨床上榛蘑多糖還用于治療肢麻、佝僂病、頸椎病、風(fēng)濕病、腰腿酸痛，可以強(qiáng)壯筋骨。此外，榛蘑多糖對(duì)癲癇、耳鳴、眩暈癥也有一定療效[22]。

7 展望

近年來隨著國內(nèi)外對(duì)榛蘑研究的日益深入，其多糖的抗腫瘤、降糖及抗衰老等活性也引起了人們的重視，但是目前對(duì)榛蘑及其多糖的研究還停留在初級(jí)階段，鑒于此，近一步開展對(duì)榛蘑多糖的相關(guān)研究具有重要意義。本文對(duì)榛蘑多糖藥理作用進(jìn)行了綜述，旨在為進(jìn)一步研究榛蘑多糖的藥理作用及其在制藥和食品領(lǐng)域的應(yīng)用提供一定的理論依據(jù)。

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