張偉東 劉麗芳

(黑龍江八一農(nóng)墾大學軍事體育部，黑龍江 大慶 163319)

大量研究表明，杜仲葉提取液具有調(diào)節(jié)血壓、降低血糖、調(diào)節(jié)血脂、抗菌、抗病毒、抑制腫瘤細胞生長等藥理作用，以及延緩衰老、美白養(yǎng)顏、滋陰補腎、強壯筋骨等功效〔1～4〕。杜仲的主要功效成分有木脂素類、環(huán)烯醚萜類、苯丙素類、黃酮類、多糖類、杜仲抗真菌蛋白，此外杜仲還含有豐富的營養(yǎng)成分有氨基酸、脂肪酸、維生素、微量元素等〔5〕。本文觀察杜仲葉提取液對運動訓練后大鼠血脂和骨骼、肌肉以及心肺的影響，為杜仲提取液的臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗藥物 杜仲葉提取液(含量55%以上)。購自西安阿房宮藥業(yè)有限責任公司。

1.2 動物 雄性SD大鼠，體重180～220 g。購自陜西中醫(yī)研究所實驗動物中心，嚙齒類動物飼料喂養(yǎng)，自由飲食。實驗環(huán)境:室溫18℃ ～26℃，相對濕度45% ～65%，自然光照。

1.3 方法 將動物隨機分為安靜組、訓練組和藥物+訓練組，分籠飼養(yǎng)。訓練組和藥物+訓練組在60 cm×60 cm×65 cm的內(nèi)壁光滑的玻璃池中進行無負荷游泳訓練，水溫25℃ ±1℃，水深55 cm，每日游泳訓練20 min，每周6 d，星期日休息，共4 w。用雙蒸水配成1%杜仲葉提取液水溶液，自由飲食。安靜組喂以同體積的雙蒸水，至訓練之日起每日給藥。在最后一次訓練至力竭。

1.3.1 血脂測定 所有大鼠摘眼球取血。總膽固醇(TC)含量、甘油三酯(TG)含量測定采用酶比色法測定，高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)和極低密度脂蛋白(VDL)含量測定采用清除測定。

1.3.2 羥脯氨酸含量測定 收集處死大鼠血液、左腿部肌肉、左腿股骨、頸部皮膚、心、肺等組織器官各3～5 g。除血液外其他樣品均置生理鹽水中洗凈血液，并用濾紙吸干、稱重，再分別(包括血液)以pH7.2檸檬酸緩沖液低溫勻漿，每份樣品按10 mg加6 mol/L HCl 2 ml，125℃加熱2 h消化，取消化液2 ml加10 mol/L NaOH 1 ml，再用蒸餾水加至5 ml，過濾，取過濾液0.2 ml加檸檬酸緩沖液、氯氨T各1 ml，置室溫10 min，過氯酸2 ml，反應(yīng)5 min，再加100 ml/L對二甲基氨基苯甲醛1 ml，置60℃水浴中20 min，冷卻后用724分光光度計在562 nm處比色測定。對尿液的測定，以處死小白鼠前1 d收集的全部尿液，先加酸分解，然后在過量的丙氨酸條件下用氯氨T氧化羥脯氨酸，硫代硫酸鈉中止氧化，再用對二甲基氨基苯甲醛試劑顯色測定羥脯氨酸含量。

1.4 統(tǒng)計學處理 計量資料以x±s表示，兩組間數(shù)據(jù)比較行t檢驗。

2 結(jié)果

2.1 杜仲葉提取液對大鼠血液TC含量的影響 訓練后大鼠血清TC的含量無明顯變化，但給藥組血清TC含量顯著降低，說明杜仲葉提取液能明顯的降低運動訓練大鼠血清TC含量。見表1。

表1 杜仲葉提取液對運動訓練大鼠血清TC、TG含量的影響(x ± s，n=6)

2.2 杜仲葉提取液對大鼠HDL、LDL和VLDL含量的影響與安靜組比較，訓練組HDL含量無明顯變化，但LDL、VLDL的含量顯著升高;但給藥+訓練組與訓練組、安靜組比較血清HDL的含量顯著升高，LDL、VLDL的含量明顯降低。見表2。

表2 杜仲葉提取液對大鼠血清HDL、LDL和VLDL含量的影響(x ± s，n=6)

2.3 羥脯氨酸含量測定 給藥+訓練組大鼠肌肉、骨骼、皮膚、心、肺中羥脯氨酸合成均顯著增加，而單純運動也在一定程度上對羥脯氨酸合成有促進作用;血液和尿液中羥脯氨酸含量，運動與安靜組變化均不太明顯，給藥+訓練組組變化明顯。見表3。

表3 杜仲對不同組別大鼠組織中羥脯氨酸含量的影響(x ± s，n=6，mg/g)

3 討論

運動系統(tǒng)主要由骨骼、肌肉和關(guān)節(jié)構(gòu)成，并與機體的心肺功能關(guān)系密切。膠原蛋白(Collagen)又稱膠原，是由三條肽鏈擰成的螺旋形纖維狀蛋白質(zhì)。膠原蛋白是動物結(jié)締組織重要的蛋白質(zhì)，結(jié)締組織除了含60% ～70%的水分外，膠原蛋白占了約20% ～30%。人體成分中有16%左右是蛋白質(zhì)，膠原蛋白占體內(nèi)蛋白質(zhì)總量的30% ～40%，故成年人體內(nèi)約有3 kg左右膠原蛋白，主要存在于皮膚肌肉、骨骼、牙齒、內(nèi)臟(如胃、腸、心肺、血管與食道)與眼睛等處。杜仲可通過改變肌肉、骨骼、皮膚、心、肺中膠原蛋白合成的能力進而影響運動系統(tǒng)的功能。膠原蛋白由纖維細胞合成，膠原纖維由許多膠原微纖維組成，膠原微纖維則由原膠原組成。原膠原肽鏈中含有羥脯氨酸及羥賴氨酸殘基，它們常在原膠原α肽鏈Y位置上出現(xiàn)，而不帶羥基的脯氨酸則常在X位置上出現(xiàn)。羥脯氨酸及脯氨酸總數(shù)在原膠原分子中約占22%左右，也是維持原膠原分子三聯(lián)螺旋構(gòu)型的重要組成部分。因此測定體內(nèi)組織中羥脯氨酸(γ羥基β吡咯烷α羧酸)含量則可充分表現(xiàn)組織膠原蛋白合成的能力，而膠原蛋白分解又可釋放出游離的羥脯氨酸或含羥脯氨酸的寡肽，通常5%～10%隨尿排出。膠原蛋白合成過程中，先形成原膠原再經(jīng)過聚合及共價交聯(lián)，才產(chǎn)生膠原微纖維，未經(jīng)共價交聯(lián)的原膠原分子較膠原纖維更易分解，當膠原蛋白合成增強時可溶性原膠原分子增多，分解隨尿排出的羥脯氨酸也會增多。因此，尿中羥脯氨酸排出量不僅是膠原分解強度的指標也與體內(nèi)膠原合成密切相關(guān)。本研究說明運動本身有一定促進膠原蛋白合成的能力，但均沒有給藥組明顯?？傊?，杜仲對機體組織膠原蛋白合成有明顯的促進作用，將有利于機體加速體內(nèi)膠原蛋白的新陳代謝，有防止機體衰老、保持組織器官結(jié)構(gòu)的完整性和增強其功能的作用。杜仲葉提取液能消除機體內(nèi)的自由基，從而提高肌肉運動能力和抗疲勞的能力〔6〕，對運動訓練大鼠補充杜仲可以提高大鼠的運動能力。

1 盛軍利，孫桂菊.杜仲的功效學研究現(xiàn)狀及其應(yīng)用前景〔J〕.醫(yī)學綜述，2006;12(16):1022-4.

2 董大鵬，張學俊，王慶輝，等.杜仲葉中抗氧化活性成分的提取〔J〕.貴州工業(yè)大學學報(自然科學版)，2006;35(4):1-3.

3 張瑛朝，張延敏，郭代立，等.復(fù)方杜仲葉合劑對人體降壓作用的實驗研究〔J〕.中成藥，2001;23(6):418-21.

4 羅麗芳，吳衛(wèi)華，歐陽冬生，等.杜仲的降壓成分及降壓機制〔J〕.中草藥，2006;37(1):150-2.

5 程光麗.杜仲有效成分分析及藥理學研究進展〔J〕.中成藥，2006;28(5):723-5.

6 趙 暉，李宗友.杜仲葉藥理作用研究(Ⅱ)-抗疲勞及愈傷作用〔J〕.國外醫(yī)學·中醫(yī)中藥分冊，2000;22(4):211-5.