張勤文,莫重輝*,沈明華,河生德,尼 瑪,竇全林,倪小敏
(1.青海大學(xué)農(nóng)牧學(xué)院動(dòng)物醫(yī)學(xué)系,青海西寧 810016;2.青海省海晏縣獸醫(yī)站,青海海晏 812200)
近幾年來(lái),青海省海北州的海晏縣、祁連縣部分地區(qū)多次發(fā)生放牧家畜口腔黏膜潰爛病,發(fā)病時(shí)間為每年1月~4月份,4月份最為嚴(yán)重,5月份牧草返青,家畜吃上青草后發(fā)病逐漸減少。主要為馬、牛、羊等家畜發(fā)病,不分年齡、性別,但在馬和牛上發(fā)病較為嚴(yán)重。病畜臨床表現(xiàn)為齒齦、面頰黏膜、舌面和舌背出現(xiàn)大小不一、邊緣不整齊的紅褐色潰瘍斑,舌體、齒齦等潰瘍處相繼發(fā)生大面積壞死,影響其正常采食,最后病畜因極度消瘦而死亡。該病死亡率高,發(fā)病原因不明,給當(dāng)?shù)啬撩窈托竽翗I(yè)生產(chǎn)帶來(lái)嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失,已引起當(dāng)?shù)赜嘘P(guān)部門(mén)的高度重視。2004年青海省祁連縣發(fā)生放牧家畜口腔黏膜潰爛病,中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所從所采集的羊病料中未分離出致病性微生物,排除了放牧家畜口腔黏膜潰爛病由病原微生物引起。邱昌慶[1]認(rèn)為,該病的發(fā)生可能與草原毛蟲(chóng)大量繁殖有關(guān),劉文清[2]調(diào)查后表明,草場(chǎng)上年未進(jìn)行草原毛蟲(chóng)滅除,則次年3月~4月間家畜大量發(fā)生口膜炎,造成家畜大量死亡。因此,查明該病的發(fā)病原因與機(jī)理,可為該病的防治提供理論依據(jù)。
試驗(yàn)用青海半細(xì)毛羊6只,購(gòu)于青海省湟中縣多巴鎮(zhèn),購(gòu)回后用阿維菌素按0.3mg/kg驅(qū)除體內(nèi)外寄生蟲(chóng),觀察1周,確認(rèn)臨床健康后,開(kāi)始試驗(yàn)。自然發(fā)病羊3只,購(gòu)于海北州海晏縣甘子河鄉(xiāng)。草原毛蟲(chóng)采集于海北州海晏縣甘子河鄉(xiāng)發(fā)病羊放牧草場(chǎng),采回實(shí)驗(yàn)室后陰干備用。
試驗(yàn)羊隨機(jī)分為試驗(yàn)組和對(duì)照組。試驗(yàn)組每只試驗(yàn)羊飼喂毛蟲(chóng)50個(gè)~60個(gè)/d,然后自由采食草料,對(duì)照組除給予充足草料外,不做任何處理。兩組試驗(yàn)羊均給予充足飲水。每天觀察試驗(yàn)羊口腔黏膜、舌面變化、采食情況和全身癥狀。待出現(xiàn)明顯的口腔黏膜潰爛時(shí)進(jìn)行剖檢,觀察剖檢變化。
自然發(fā)病羊于購(gòu)置地現(xiàn)場(chǎng)屠宰,觀察剖檢變化,試驗(yàn)羊與自然發(fā)病羊均在剖檢時(shí)選取舌肌、心、肝、脾、肺、腎、腸管等組織,40mL/L多聚甲醛固定,石蠟包埋,切片,HE染色鏡檢,進(jìn)行病理組織學(xué)觀察。
自然發(fā)病羊:精神較差,觸診口溫不高,體溫、脈搏和呼吸正常。齒齦、口腔黏膜、舌面均有大小不等的潰瘍面,嚴(yán)重的舌面有大面積壞死,舌體斷裂。
試驗(yàn)羊:1周后開(kāi)始出現(xiàn)臨床癥狀,至10d左右癥狀明顯,主要表現(xiàn)為口唇部腫脹,流涎(圖1),食欲不振,采食小心,咀嚼困難;口腔檢查發(fā)現(xiàn),齒齦和舌面有大小不等的潰瘍,潰瘍四周稍隆起,中心部黑色,嚴(yán)重病例舌面有裂隙(圖2)。對(duì)照組試驗(yàn)羊無(wú)明顯臨床癥狀。
圖1 試驗(yàn)羊口唇部的泡沫及流涎Fig.1 Foam and salivation in lips of experimental sheep
圖2 舌面上形成的大小不等的潰瘍Fig.2 The cluster of unequal size of ulcer in tongue surface
2.2.1剖檢變化
(1)自然發(fā)病羊 極度消瘦,剖檢時(shí)無(wú)皮下脂肪,腹腔、心冠狀溝、腎臟周?chē)鞠?,呈膠凍樣浸潤(rùn);胃壁、腸壁菲薄,心臟萎縮,肝臟無(wú)明顯可見(jiàn)病變;脾臟萎縮;肺輕度氣腫;舌面、齒齦等部位黏膜有不同程度的潰爛,潰瘍面有一層黑色覆蓋物,刀刮后內(nèi)有細(xì)絲狀異物刺入舌深層組織。
(2)試驗(yàn)羊 消瘦,皮下、腸系膜、心冠狀溝及腎臟周?chē)窘M織少,腸壁半透明狀,腸內(nèi)容物較少;心臟體積變化不明顯;肝臟稍腫大,邊緣稍鈍圓,顏色變淡;脾臟萎縮,肺臟有充血現(xiàn)象;剖檢羊唇部、齒齦部有潰瘍,舌面有大小不等,質(zhì)地較硬,邊緣稍隆起,中心部黑色的潰瘍。
2.2.2 組織學(xué)變化
(1)自然發(fā)病羊 舌表面黏膜不完整,損傷部位黏膜內(nèi)及深層舌肌內(nèi)有均質(zhì)染色的異物,咖啡色,異物較長(zhǎng),邊緣不整齊,有倒刺,異物橫切面呈環(huán)狀,中空,異物周?chē)写罅苛馨图?xì)胞、上皮樣細(xì)胞和少量多核巨細(xì)胞浸潤(rùn)(圖3和圖4)。心肌纖維橫紋不明顯,胞核深染;肝臟:肝細(xì)胞變性,個(gè)別肝細(xì)胞內(nèi)有脂褐素沉積。脾臟:被膜增厚,脾小梁增寬,脾臟紅髓多血,有含鐵血黃素沉積。肺臟:肺泡壁毛細(xì)血管擴(kuò)張,充血,間質(zhì)增寬。腎臟:腎小球充血腫脹,腎小管上皮細(xì)胞變性,病變嚴(yán)重部位腎小管上皮細(xì)胞崩解,腎小管上皮細(xì)胞核由基底膜脫落。
圖3 刺入牛舌肌內(nèi)的異物(HE,400×)Fig.3 The foreign materials in the tongue muscle of cattle
圖4 刺入舌肌異物橫切及異物周?chē)纳掀蛹?xì)胞、多核巨細(xì)胞(HE,400×)Fig.4 Transaction of the foreign materials in the tongue muscle of cattle,and epithelioid cells and MGC around it
圖5 試驗(yàn)羊舌黏膜損傷及刺入黏膜下和肌層中的異物(HE,100×)Fig.5 The foreign materials in the mucous membrane and muscle of tongue of experimental sheep
圖6 試驗(yàn)羊舌肌中刺入異物及周?chē)罅拷?rùn)的淋巴細(xì)胞、上皮樣細(xì)胞及異物巨細(xì)胞(HE,400×)Fig.6 The foreign materials in the muscle of tongue of experimental sheep,and infiltration of lymphocytes,epithelioid cells and giant cells
圖7 刺入舌肌中異物具有倒刺(HE,400×)Fig.7 The agnail of the foreign materials in the muscle of tongue
圖8 草原毛蟲(chóng)表面蟲(chóng)毛(HE,400×)Fig.8 The villi of in the surface Gynaephora ruoergensis
(2)試驗(yàn)羊 舌表面黏膜損傷處刺入大量咖啡色異物,并深達(dá)肌層,與自然發(fā)病羊舌肌內(nèi)刺入異物形狀、大小和顏色相同,異物周?chē)写罅苛馨图?xì)胞、上皮樣細(xì)胞和多核巨細(xì)胞(圖5~圖7)。其他臟器病變與自然發(fā)病羊病理變化相同。對(duì)照羊組織學(xué)未見(jiàn)明顯病理變化。
邱昌慶等[1-2]曾報(bào)道,青海省海北州部分地區(qū)暴發(fā)原因不明的放牧家畜口腔黏膜潰爛病,臨床上主要表現(xiàn)為口腔粘膜腫脹、潰瘍,嚴(yán)重時(shí)舌體斷裂,病畜因消瘦、營(yíng)養(yǎng)不良死亡,因條件有限,未做病理學(xué)檢查,但排除了病原微生物致病的可能。同時(shí)這些學(xué)者經(jīng)過(guò)調(diào)查認(rèn)為,放牧家畜口腔黏膜潰爛病的發(fā)生與上一年草原毛蟲(chóng)大量繁殖有關(guān)。本試驗(yàn)中試驗(yàn)羊飼喂毛蟲(chóng)后,舌表面出現(xiàn)黑斑,黑斑處嚴(yán)重潰爛出血,試驗(yàn)后期試驗(yàn)羊明顯消瘦,與自然發(fā)病羊和上述學(xué)者報(bào)道的癥狀相同,病理剖檢均表現(xiàn)為齒齦、舌肌的潰瘍性損傷,嚴(yán)重時(shí)舌體斷裂,鏡檢時(shí),舌表面黏膜損傷嚴(yán)重,損傷部位黏膜內(nèi)及深層舌肌有異物,異物有倒刺,異物周?chē)写罅苛馨图?xì)胞、上皮樣細(xì)胞和多核巨細(xì)胞的病理變化。為確定刺入舌肌異物為何種物質(zhì),取毛蟲(chóng)表皮黑毛放在顯微鏡下觀察,發(fā)現(xiàn)與刺入舌肌異物一致(圖8),因此可確定引起牛、羊口腔黏膜潰爛的致病原因是牛、羊食入了草原毛蟲(chóng)的蟲(chóng)體或蛻皮所致。
草原毛蟲(chóng)以一齡期幼蟲(chóng)越冬,第2年3月~4月開(kāi)始活動(dòng),主要采食青草幼芽,經(jīng)7期幼蟲(chóng),至7月中下旬結(jié)繭化蛹。草原毛蟲(chóng)幼蟲(chóng)只在中午天熱時(shí)爬至草尖部開(kāi)始吃草,采食后或天氣不好時(shí),其蜷伏在草根部,在每年5月牧草返青逐漸長(zhǎng)高后,放牧家畜能夠得到充足的飼草飼料,食入草原毛蟲(chóng)及蛻皮的機(jī)會(huì)較少,但到冬季及次年初春,由于牧草逐漸減少,牛、羊不得不開(kāi)始吃草根部的牧草,而將夏天幼蟲(chóng)的蛻皮、死亡風(fēng)干蟲(chóng)體食入,毛蟲(chóng)蟲(chóng)毛刺入口唇部、齒齦及舌,引起口腔黏膜發(fā)炎,造成患畜嘴唇腫脹,口腔流涎,嚴(yán)重時(shí)造成黏膜損傷、潰瘍,舌體斷裂,病畜因采食、咀嚼困難,體質(zhì)下降,逐漸消瘦,最后死亡。而草原毛蟲(chóng)及刺入蟲(chóng)毛是否會(huì)釋放毒素,尚需進(jìn)一步做毒理學(xué)研究。
通過(guò)試驗(yàn)羊與自然發(fā)病羊臨床癥狀、剖檢變化及組織學(xué)觀察比較,均表現(xiàn)為流涎、口腔黏膜潰瘍性變化及舌肌內(nèi)刺入與蟲(chóng)體表面蟲(chóng)毛形態(tài)結(jié)構(gòu)相同異物,因此可以確診,青海省海北州放牧家畜口腔黏膜潰爛病的病因是由于放牧家畜食入草原毛蟲(chóng)的蟲(chóng)體及蛻皮所致。
[1]邱昌慶,孫應(yīng)祥,李連森,等.青海省祁連縣家畜口腔黏膜潰爛病的調(diào)查[J].中國(guó)獸醫(yī)科技,2004,34,(10):36-38.
[2]劉文清,河生德,尼瑪.不同條件下草原毛蟲(chóng)引起放牧家畜口膜炎的危害性調(diào)查[J].中國(guó)草食動(dòng)物,2011,31,(1):51-52.