雷霞，遲瑛嬌，趙冬梅，周敏

(1.黑龍江中醫(yī)藥大學佳木斯學院，黑龍江 佳木斯 154007;2.佳木斯大學附屬第一醫(yī)院，黑龍江 佳木斯 154007;3.黑龍江中醫(yī)藥大學，黑龍江 哈爾濱 150040)

中藥復方降心丹出于宋·《太平惠民和濟局方》，自古以來就被廣泛應用。以往的實驗研究表明，其具有明顯的益智、延衰作用［1－2］。從中醫(yī)理論上講，該方即能養(yǎng)心，又能補腎;從單味藥來看，其中的多數(shù)藥物均見于其它行之有效的益智方中，且大多為現(xiàn)代藥理學所證實。筆者在本實驗中建立小鼠亞急性衰老模型，并以其超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量作為指標［3］，研究降心丹對衰老模型小鼠的抗氧化作用，從而為闡明降心丹的抗衰老機制提供依據(jù)。

1 實驗材料

1.1 實驗動物

KM普通級小白鼠50只，雌雄各半，體質量(20±2)g，購于佳木斯大學實驗動物中心提供，動物合格證號:SLXK(黑)20020001。分籠飼養(yǎng)，每籠10只，室溫(26±2)℃，均食用普通飼料。

1.2 儀器與試劑

UV757CRT紫外－可見分光光度計(上海精密儀器有限公司);TDL－5000低溫冷凍離心機(北京醫(yī)用離心機廠);HH－S26S恒溫水浴鍋(山東鄄城華魯電熱儀器有限公司);ALC－110.4電子分析天平(梅特勒－托利多儀器上海有限公司);0.9%的生理鹽水(哈藥集團三精制藥廠);SOD、MDA檢測試劑盒(南京建成生物工程研究所，批號20080519);D－半乳糖(生工生物工程上海有限公司，批號F2008041)。

1.3 藥物制備

熟地黃25g，當歸25g，天門冬 25g，麥門冬 25g，人參 15g，山藥15g，茯苓15g，遠志15g，肉桂5g，朱砂5g。以上中藥通過煎煮，過濾，濃縮，用蒸餾水稀釋濃度分別為相當于生藥0.6g/ml(低劑量組)，生藥1.2g/ml(中劑量組)，生藥2.4g/ml(高劑量組)。

2 實驗方法

2.1 分組和給藥

KM普通級小白鼠50只，雌雄各半，體質量(20±2)g，普通飼料常規(guī)喂養(yǎng)。鼠籠墊料與飲水壺定時換洗，保持清潔，室溫控制在25℃。隨機選取10只，作為正常對照組，將其余的40只小鼠進行衰老造模。將40只小鼠隨機均分成4組:降心丹低、中、高劑量組;D－gal組(模型對照組)。降心丹低、中、高劑量組(分別按2.4g/kg/d，4.8g/kg/d，9.6g/kg/d給予中藥降心丹)。正常對照組及模型對照組均灌服等容量生理鹽水。

2.2 造模方法

D－gal用生理鹽水配成2.5mg/ml備用。除正常對照組外，其余各組按50mg/kg/d，給予5%D－gal腹腔注射，連續(xù)7周。

2.3 檢測方法

8周后取小鼠血液及腦組織，按試劑盒說明，黃嘌呤氧化酶法測定SOD活力，MDA的含量。

2.4 統(tǒng)計學處理

3 結果

3.1 降心丹對亞急性衰老模型小鼠血清及腦組織SOD活性的影響

模型組SOD活性明顯低于空白對照組，差異極顯著(P＜0.01)。降心丹高、中、低劑量組的SOD活性顯著高于模型組(P＜0.05)。說明降心丹具有增強血清及腦組織中SOD活性的作用。結果見表1。

3.2 降心丹對亞急性衰老小鼠血清及腦組織MDA含量的影響

模型組MDA含量明顯高于空白對照組，差異極顯著(P＜0.01)。與模型組比較，降心丹高、中劑量組的MDA含量顯著降低(P＜0.05)，說明降心丹能降低血清及腦組織中MDA含量。結果見表1。

表1 降心丹對衰老模型小鼠血清、腦組織SOD活力及MDA含量的影響(±s，n=10)

表1 降心丹對衰老模型小鼠血清、腦組織SOD活力及MDA含量的影響(±s，n=10)

注:正常對照組相比，△△P＜0.01;與D－gal組相比，*P＜0.05。

血清(U/ml) 腦組織(U/mg) 血清(U/ml) 腦組織(U/mg)正常對照組40.95 ±1.71 39.32 ±3.26 2.41 ±0.32 9.18 ±0.36 D－gal組 23.78 ±2.12△△ 24.14 ±1.76△△ 3.54 ±0.46△△ 14.05 ±0.54△△降心丹低劑量組 31.41 ±2.00* 30.30 ±2.85* 2.13 ±0.43* 12.61 ±0.45*降心丹中劑量組 37.12 ±3.75* 33.15 ±3.17* 1.73 ±0.19* 12.64 ±0.59*降心丹高劑量組 36.53 ±2.47* 34.47 ±2.21* 1.17 ±0.25* 10.23 ±0.39*

4 討論

機體對自由基損傷的防御機能隨年齡增長而下降，超氧化物岐化酶(SOD)對機體的氧化與抗氧化平衡起著至關重要的作用，它能清除超氧陰離子自由基，保護機體細胞免受損傷。因此，SOD活力可間接反應機體清除自由基的能力，從而反應機體的衰老情況。另一方面，隨著增齡，體內自由基增多而引起脂質過氧化作用，脂質過氧化物代謝產物MDA增多［4］。本實驗從自由基角度，觀察降心丹對自由基代謝物的作用，發(fā)現(xiàn)其具有一定的抗氧自由基代謝的作用，主要表現(xiàn)在降心丹能明顯提高衰老小鼠血清及腦組織中超氧化物歧化酶的活性，降低血清及腦組織中丙二醛的含量，從而保護細胞結構的完整性。這提示降心丹能提高衰老機體的抗氧化能力，清除機體過多的自由基，抑制或減輕了氧自由基對機體的氧化損傷，這些可能是其抗衰老作用的途徑。

［1］姜宇宙，魯麗敏，周艷麗.降心丹對小鼠記憶及腦內AchE，SOD的影響［J］.中醫(yī)藥學報，2005，33(4):30－31.

［2］張丹丹，王亞賢，姜宇宙.降心丹對D－gal小鼠免疫功能的影響［J］.職業(yè)技術，2007(8):150.

［3］徐叔云，卞如濂，陳修.藥理實驗方法學［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，1991:508－509.

［4］王萍，王小燕.本草養(yǎng)顏膏對老齡大鼠皮膚SOD和Hyp的影響［J］.中醫(yī)藥學報，2009，37(1):18－20.