劉敬偉 李永強(qiáng)
1.中國中醫(yī)藥出版社《中國民間療法》編輯部,北京 100013 2.新時(shí)代健康產(chǎn)業(yè)(集團(tuán))有限公司
慢性盆腔炎是婦科常見疾病,本病遷延難愈,而由毛冬青、莪術(shù)、黃芪、大黃制成的復(fù)方毛冬青制劑是臨床的一個(gè)經(jīng)驗(yàn)處方,常用于治療婦科炎癥,特別是盆腔炎的治療,但其療效常常因?yàn)樵纤幍呐浔炔煌熜в兴煌1疚牟捎枚[脹法和足趾腫脹法驗(yàn)證動(dòng)物模型,證實(shí)了由毛冬青、莪術(shù)、黃芪、大黃按照不同配比制成的顆粒劑在抗炎方面作用不同。
1.動(dòng)物:Wistar大鼠,體質(zhì)量 150~180 g,雌雄兼用,由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供;昆明種小鼠,體重18~22 g,雌雄兼用,由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。
2.試劑:角叉菜膠,由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)藥理教研室提供;二甲苯,上海試劑二廠生產(chǎn)。
3.藥材:毛冬青、莪術(shù)、黃芪、大黃4味藥均購自黑龍江省藥材公司,并經(jīng)黑龍江中藥鑒定教研室鑒定。
4.藥品:①復(fù)方毛冬青顆粒1的原料藥物用量為:毛冬青30 g,莪術(shù)6 g,黃芪15 g,大黃10 g。②復(fù)方毛冬青顆粒2的原料藥物用量為:毛冬青60 g,莪術(shù)10 g,黃芪6 g,大黃15 g。③復(fù)方毛冬青顆粒3的原料藥物用量為:毛冬青25 g,莪術(shù)20 g,黃芪 12 g,大黃30 g。④復(fù)方毛冬青顆粒4的原料藥物用量為:毛冬青40 g,莪術(shù)12 g,黃芪15 g,大黃20 g。⑤復(fù)方毛冬青顆粒5的原料藥物用量為:毛冬青10 g,莪術(shù)30 g,黃芪20 g,大黃18 g。將上述不同配比的毛冬青、莪術(shù)、黃芪、大黃采用以下相同的制備方法制成復(fù)方毛冬青顆粒制劑。
取上述不同配比的毛冬青、莪術(shù)、黃芪、大黃備用。
以上4味取莪術(shù),加水8倍量,浸泡6 h,水蒸氣法提取揮發(fā)油;藥渣用8倍水,微沸1 h再煮提一次后,煮提液留用,揮發(fā)油用8倍量倍他環(huán)糊精飽和水溶液法包結(jié),攪拌1 h,冷藏 24 h,濾取包結(jié)物低溫干燥,粉碎成細(xì)粉,備用;毛冬青、黃芪、酒大黃,60%乙醇提取 3次,每次加醇8倍量,煎煮1 h,提取液濾過,濾液減壓回收乙醇后,加入莪術(shù)煮提液并共同濃縮至相對密度為1.25~1.30(50℃)的稠膏,減壓干燥粉碎成細(xì)粉,加上述揮發(fā)油包結(jié)物細(xì)粉及糊精適量,混勻,以恰當(dāng)濃度乙醇制粒,干燥,分裝制成復(fù)方毛冬青顆粒1、復(fù)方毛冬青顆粒2、復(fù)方毛冬青顆粒3、復(fù)方毛冬青顆粒4、復(fù)方毛冬青顆粒5。
1.小鼠二甲苯耳腫脹實(shí)驗(yàn):取小鼠60只,隨機(jī)分成生理鹽水對照組,復(fù)方毛冬青顆粒1組、復(fù)方毛冬青顆粒2組、復(fù)方毛冬青顆粒3組、復(fù)方毛冬青顆粒4組、復(fù)方毛冬青顆粒5組。
將上述復(fù)方毛冬青顆粒用生理鹽水配置成溶液,灌胃給藥,每只小鼠每天灌胃給藥1次,每次按3.26 g/kg給藥,連續(xù)3天,第3天給藥后1h右耳兩面滴二甲苯0.05 ml/只,致炎 30 min后頸椎脫臼致死,用直徑6 mm打孔器取左右兩耳同一部位圓耳片,用分析天平稱重,以兩耳片重量之差為腫脹度進(jìn)行t檢驗(yàn)。
結(jié)果:復(fù)方毛冬青顆粒1的抗炎作用優(yōu)于復(fù)方毛冬青顆粒2、復(fù)方毛冬青顆粒3、復(fù)方毛冬青顆粒4、復(fù)方毛冬青顆粒5的抗炎作用。試驗(yàn)結(jié)果見表1。
表1 不同配比原料藥制成的復(fù)方毛冬青顆粒對小鼠耳腫脹度的影響(±s)
表1 不同配比原料藥制成的復(fù)方毛冬青顆粒對小鼠耳腫脹度的影響(±s)
與生理鹽水對比:**P<0.01,*P<0.05
組 別 劑量(g/kg)耳腫脹度(mg)生理鹽水組 等容積 8.88±2.21復(fù)方毛冬青顆粒1 3.26g/kg 4.43±1.85**復(fù)方毛冬青顆粒 2 3.26g/kg 5.28±2.23*復(fù)方毛冬青顆粒 3 3.26g/kg 6.19±2.56*復(fù)方毛冬青顆粒 4 3.26g/kg 6.77±3.05*復(fù)方毛冬青顆粒5 3.26g/kg 7.05±2.47
2.鼠足趾腫脹實(shí)驗(yàn):取 Wistar大鼠 60只,雌雄兼用,隨機(jī)分蒸餾水對照組、復(fù)方毛冬青顆粒1組、復(fù)方毛冬青顆粒2組、復(fù)方毛冬青顆粒3組、復(fù)方毛冬青顆粒4組、復(fù)方毛冬青顆粒5組,將上述復(fù)方毛冬青顆粒用生理鹽水配置成溶液,灌胃給藥,每只大鼠每天灌胃給藥1次,每次按3.26 g/kg給藥,連續(xù)7天。第七天給藥后30 min,在大鼠的左足皮下注射1%的角叉菜膠0.1 m1/只,分別于注射后 0.5、1、2、4、6 h 測定其足趾腫脹容積,以右足為對照,計(jì)算腫脹率,并與蒸餾水對照組比較,結(jié)果見表2。
從表1、表2可以看出,不同劑量配比的毛冬青、莪術(shù)、黃芪、大黃按照相同制備方法制成的復(fù)方毛冬青顆粒雖然都有抗炎作用,但抗炎作用不完全相同。以毛冬青30 g,莪術(shù)6 g,黃芪15 g,大黃10 g制成的復(fù)方毛冬青顆粒的抗炎作用最強(qiáng),明顯優(yōu)于毛冬青、莪術(shù)、黃芪、大黃其他劑量制成的復(fù)方毛冬青顆粒劑。
表2 不同配比原料藥制成的復(fù)方毛冬青顆粒對大鼠角叉菜膠性足趾腫脹的抑制性作用(n=10,±s)
表2 不同配比原料藥制成的復(fù)方毛冬青顆粒對大鼠角叉菜膠性足趾腫脹的抑制性作用(n=10,±s)
與蒸餾水組對比:**P<0.01,*P<0.05
組別 劑量(g/kg)足腫脹率(%)0.5h 1h 2h 4h 6h蒸餾水組 等容積 0.51±0.21 0.80±0.25 0.88±0.30 0.82±0.32 0.61±0.31復(fù)方毛冬青顆粒13.26g/kg0.26±0.18*0.30±0.14**0.32±0.19**0.35±0.13**0.28±0.15*復(fù)方毛冬青顆粒23.26g/kg0.31±0.17*0.35±0.15**0.37±0.22**0.59±0.20* 0.42±0.19復(fù)方毛冬青顆粒33.26g/kg0.31±0.19*0.46±0.20* 0.44±0.21*0.55±0.23* 0.46±0.22復(fù)方毛冬青顆粒43.26g/kg0.30±0.16*0.43±0.11* 0.42±0.22*0.59±0.27* 0.49±0.24復(fù)方毛冬青顆粒53.26g/kg0.31±0.18*0.47±0.21* 0.59±0.24*0.65±0.31* 0.57±0.20