崔 虎張鐵濤張志強(qiáng)耿業(yè)業(yè)高秀華*楊福合邢秀梅

(1.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，北京 100081;2.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所，吉林 132109;3.吉林省特種經(jīng)濟(jì)動物分子生物學(xué)省部共建實(shí)驗(yàn)室，吉林 132109)

藍(lán)狐又名北極狐，是一種珍貴的毛皮動物，其皮毛細(xì)絨厚、色澤明亮，是制作高級輕裘皮的上等原料。藍(lán)狐育成期分為育成前期和冬毛期，而冬毛期飼糧營養(yǎng)水平直接影響其皮毛質(zhì)量。目前，人工養(yǎng)殖藍(lán)狐作為一種致富手段正在我國的東北、山東和河南等地區(qū)蓬勃發(fā)展［1］。長期以來，藍(lán)狐的飼養(yǎng)模式都是以鮮料為主，且對其適宜蛋白質(zhì)水平和理想氨基酸模式的建立沒有系統(tǒng)深入的研究。由于國內(nèi)外的環(huán)境、飼養(yǎng)條件等都不相同，在這種情況下得出的NRC(1982)［2］營養(yǎng)需求標(biāo)準(zhǔn)以及國外的一些研究成果［3-8］都不一定適合我國的養(yǎng)殖模式。國內(nèi)目前的研究主要側(cè)重在蛋白質(zhì)水平對藍(lán)狐生長性能的影響方面，并沒有對氮代謝及氮污染做進(jìn)一步的研究，且報(bào)道的結(jié)果［9-12］并不一致。本研究以16周齡健康雄性藍(lán)狐為研究對象，以干粉料配制的混合飼糧為試驗(yàn)飼糧，研究飼糧蛋白質(zhì)水平對冬毛期藍(lán)狐生長性能、營養(yǎng)物質(zhì)消化代謝和血清生化指標(biāo)的影響，以期確定既能保證不降低藍(lán)狐生長性能又能降低氮排出量的適宜飼糧蛋白質(zhì)水平，并為藍(lán)狐干粉料的合理配制提供科學(xué)的依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)采用單因子隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)，試驗(yàn)動物選用16周齡、平均體重為(5.71±0.60)kg的健康雄性藍(lán)狐90只，隨機(jī)分為6組，每組15個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1只。藍(lán)狐單籠飼養(yǎng)，各組間初始體重差異不顯著(P＞0.05)。各組藍(lán)狐分別飼喂蛋白質(zhì)水平為 24%(Ⅰ組)、26%(Ⅱ組)、28%(Ⅲ組)、30%(Ⅳ組)、32%(Ⅴ組)、34%(Ⅵ組)的試驗(yàn)飼糧。預(yù)試期7 d，正試期80 d。整個(gè)試驗(yàn)期內(nèi)，由固定人員進(jìn)行專門飼養(yǎng)并對試驗(yàn)動物進(jìn)行常規(guī)免疫接種。每天07:30和15:00各飼喂1次，每天大約飼喂400 g干粉料，自由飲水。

1.2 試驗(yàn)飼糧

以膨化玉米、魚粉、豆粕等為主要原料，參照國內(nèi)外的文獻(xiàn)報(bào)道［2，12］，設(shè)計(jì)不同蛋白質(zhì)水平的6種試驗(yàn)飼糧，其組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 試驗(yàn)飼糧組成及營養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets(air-dry basis) %

1.3 消化代謝試驗(yàn)

在正試期開始30 d后，每組挑選8只體重相近的健康藍(lán)狐進(jìn)行消化代謝試驗(yàn)。消化代謝試驗(yàn)時(shí)間為2010-11-01—2010-11-03，共計(jì)4 d。采用全收糞法，消化代謝試驗(yàn)期間飼養(yǎng)管理與日常飼養(yǎng)管理一致。每天收集的糞便稱重后按鮮重的5%加入10%硫酸溶液，并加少量甲苯用于防腐，保存于-20℃?zhèn)溆?。每天收集的尿液?00 mL中加入2 mL的10%硫酸溶液，并加4滴甲苯用于防腐，保存于-20℃?zhèn)溆谩?/p>

1.4 測定指標(biāo)及方法

1.4.1 生長性能

分別在試驗(yàn)正式開始和結(jié)束時(shí)空腹稱量每只藍(lán)狐的體重，計(jì)算凈增重和平均日增重;記錄每只藍(lán)狐每天的給料量和剩料量，計(jì)算采食量，并根據(jù)采食量和凈增重計(jì)算飼料轉(zhuǎn)化率。

1.4.2 營養(yǎng)物質(zhì)消化代謝

飼糧和糞便中的干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪以及尿液中的粗蛋白質(zhì)含量測定參照張麗英［13］的方法。營養(yǎng)物質(zhì)消化代謝指標(biāo)計(jì)算公式如下:

1.4.3 血清生化指標(biāo)

在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)每組選出10只健康藍(lán)狐，心臟采血10 mL，放置于經(jīng)抗凝處理的采血管中，4℃3 000 r/min離心7 min后提取上清液，-80℃冷凍保存?zhèn)溆谩４鍢悠肥覝亟鈨龊?，采用奧普森AMS-18全自動生化分析儀測定血清生化指標(biāo)。血清尿素氮(UN)含量采用酶兩點(diǎn)動力法測定，總蛋白(TP)含量采用雙縮脲法測定，白蛋白(ALB)含量采用溴甲酚綠法測定，谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(GPT)活性均采用連續(xù)監(jiān)測法測定。上述指標(biāo)測定所用試劑盒均購自中生北控生物科技股份有限公司。

1.5 數(shù)據(jù)處理

用統(tǒng)計(jì)軟件SAS 9.1對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，表中數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用單因素方差分析(One-way ANOVA)進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)，其中P＜0.05為差異顯著，P＜0.01為差異極顯著，P＞0.05為差異不顯著。

2 結(jié)果

2.1 飼糧蛋白質(zhì)水平對冬毛期藍(lán)狐生長性能的影響

由表2可以看出，各組藍(lán)狐的初重基本一致，隨著藍(lán)狐日齡的增長，Ⅲ組的末重極顯著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ和Ⅵ組(P＜0.01)，而Ⅱ、Ⅳ和Ⅴ組的末重極顯著高于Ⅰ和Ⅵ組(P＜0.01)。Ⅲ組的平均日增重極顯著高于Ⅰ、Ⅴ和Ⅵ組(P＜0.01)，但與Ⅱ和Ⅳ組差異不顯著(P＞0.05)。此外，Ⅲ組的飼料轉(zhuǎn)化率顯著高于Ⅰ、Ⅴ和Ⅵ組(P＜0.05)，但與Ⅱ和Ⅳ組差異不顯著(P＞0.05)

表2 飼糧蛋白質(zhì)水平對藍(lán)狐生長性能的影響Table 2 Effects of dietary protein level on growth performance of blue foxes

2.2 飼糧蛋白質(zhì)水平對冬毛期藍(lán)狐營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響

由表3可以看出，Ⅰ和Ⅱ組的干物質(zhì)采食量和排出量均極顯著高于其他各組(P＜0.01)，Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ組間這2項(xiàng)指標(biāo)無顯著差異(P＞0.05)。Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ組的干物質(zhì)消化率極顯著高于Ⅰ、Ⅴ和Ⅵ組(P＜0.01)。各組間蛋白質(zhì)消化率差異不顯著(P＞0.05)，但隨著飼糧中的蛋白質(zhì)水平的升高呈先升高后降低的趨勢。此外，脂肪消化率以Ⅲ組最高，且顯著高于其他各組(P＜0.05)。

表3 飼糧蛋白質(zhì)水平對藍(lán)狐營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響Table 3 Effects of dietary protein level on nutrient digestibility of blue foxes

2.3 飼糧蛋白質(zhì)水平對冬毛期藍(lán)狐氮代謝的影響

由表4可以看出，食入氮隨飼糧蛋白質(zhì)水平的升高呈先升高后降低的趨勢，在Ⅴ組取得最大值，但Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ組間差異不顯著(P＞0.05)。糞氮排出量在各組間差異不顯著(P＞0.05)，Ⅴ和Ⅵ組的尿氮排出量差異也不顯著(P＞0.05)，但均極顯著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ組(P＜0.01)。Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ組的總氮排出量顯著高于Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ組(P＜0.05)，其他各組間差異不顯著(P＞0.05)。Ⅲ和Ⅳ組的氮沉積極顯著高于其他各組(P＜0.01)。此外，Ⅰ和Ⅱ組的凈蛋白質(zhì)利用率差異不顯著(P＞0.05)，但均極顯著高于其他各組(P＜0.01)。Ⅲ組的蛋白質(zhì)生物學(xué)價(jià)值極顯著高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ和Ⅵ組(P＜0.01)，Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ組間差異不顯著(P ＞0.05)。

2.4 飼糧蛋白質(zhì)水平對冬毛期藍(lán)狐血清生化指標(biāo)的影響

由表5可以看出，冬毛期藍(lán)狐血清中總蛋白和白蛋白含量均以Ⅲ組最高，其中總蛋白含量顯著高于除Ⅱ組外的其他各組(P＜0.05)，而白蛋白含量僅與Ⅵ組差異顯著(P＜0.05)。血清尿素氮含量隨著飼糧蛋白質(zhì)水平的升高呈升高的趨勢，但Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ組間差異不顯著(P＞0.05)。各組間血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性沒有顯著差異(P＞0.05)，而血清谷草轉(zhuǎn)氨酶活性Ⅰ組顯著低于其他各組(P ＜0.05)。

3 討論

3.1 飼糧蛋白質(zhì)水平對冬毛期藍(lán)狐生長性能的影響

關(guān)于飼糧中蛋白質(zhì)水平對冬毛期藍(lán)狐生長性能的影響前人已有過報(bào)道，國外的 Skrede［14］、Rimesl?tten 等［15］和 Dahlman 等［16］認(rèn)為提高飼糧中蛋白質(zhì)水平可以提高體重的增長，國內(nèi)的靳世厚等［10］、尹清強(qiáng)等［11］和楊嘉實(shí)等［12］也得出相似的結(jié)論，但對達(dá)到最佳生長性能的蛋白質(zhì)水平上述研究卻并不一致。本研究中，飼糧蛋白質(zhì)水平在28%時(shí)藍(lán)狐的末重和平均日增重最好，且末重和平均日增重隨飼糧蛋白質(zhì)水平的升高呈先升高后降低趨勢，這可能是由于低蛋白質(zhì)水平飼糧的蛋白質(zhì)不能滿足藍(lán)狐的正常需要，而藍(lán)狐又難以有效利用高蛋白質(zhì)水平飼糧中的過量蛋白質(zhì)所致［17-18］。

表4 飼糧蛋白質(zhì)水平對藍(lán)狐氮代謝的影響Table 4 Effects of dietary protein level on nitrogen metabolism of blue foxes

表5 飼糧蛋白質(zhì)水平對藍(lán)狐血清生化指標(biāo)的影響Table 5 Effects of dietary protein level on serum biochemical indices of blue foxes

3.2 飼糧蛋白質(zhì)水平對冬毛期藍(lán)狐營養(yǎng)物質(zhì)消化率的影響

本試驗(yàn)結(jié)果表明，蛋白質(zhì)消化率隨著飼糧蛋白質(zhì)水平的升高先升高后降低，其可能主要是因?yàn)橄缹Φ鞍踪|(zhì)的消化吸收能力有限，超過某一限度后蛋白質(zhì)將不被吸收［19-20］。Skrede等［21］指出冬毛期藍(lán)狐為防寒在體內(nèi)積聚脂肪使得脂肪的消化率偏高，同時(shí)Dahlman等［22-23］也指出冬毛期藍(lán)狐體重的增加主要是因?yàn)槠は轮镜亩逊e。本試驗(yàn)中，飼糧蛋白質(zhì)水平為28%時(shí)藍(lán)狐的脂肪消化率較高也可能是為御寒而在皮下積聚脂肪，而高蛋白質(zhì)飼糧組的脂肪消化率稍有下降可能是由于過高的蛋白質(zhì)水平使得代謝機(jī)能紊亂，從而影響脂肪的消化吸收［24］。營養(yǎng)物質(zhì)的消化利用率是評定飼糧中營養(yǎng)物質(zhì)是否均衡的一個(gè)指標(biāo)，本研究中飼糧蛋白質(zhì)水平在28%～30%時(shí)較適宜各種營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收。

3.3 飼糧蛋白質(zhì)水平對冬毛期藍(lán)狐氮代謝的影響

氮是畜禽糞便對環(huán)境造成污染的重要因素，動物即使在最佳的消化狀態(tài)下，也不能實(shí)現(xiàn)對氮的完全吸收［25］。Newell［26］在對水貂的研究中發(fā)現(xiàn)食入氮的80%通過尿氮形式排出體外。Rorz［27］指出適宜的飼糧蛋白質(zhì)水平和合理的飼糧組成可以有效地降低氮的排放量。此外，Kerr等［28］也報(bào)道在組成合理的飼糧中蛋白質(zhì)水平降低1%可以減少糞氮中8%的氮排放量。本研究結(jié)果表明，降低飼糧蛋白質(zhì)水平可以明顯減少氮的排出量，其中飼糧蛋白質(zhì)水平在24%時(shí)總氮排出量最低，但其氮沉積比較低，不能滿足藍(lán)狐自身生長的需求。由本研究結(jié)果可知，尿氮排出量隨著飼糧蛋白質(zhì)水平的升高而增加，這與Pfeiffer等［29］報(bào)道的攝入的蛋白質(zhì)和尿氮排出量呈正相關(guān)的結(jié)果一致;而飼糧蛋白質(zhì)水平對糞氮排出量沒有顯著影響，這與Mustonen等［30］得出的結(jié)論相似。在本研究中，飼糧蛋白質(zhì)水平在28%時(shí)凈蛋白質(zhì)利用率和蛋白質(zhì)生物學(xué)價(jià)值均較高，這符合營養(yǎng)物質(zhì)的消化代謝規(guī)律，即蛋白質(zhì)水平過高或過低均會影響消化系統(tǒng)的正常運(yùn)行［18］。

3.4 飼糧蛋白質(zhì)水平對冬毛期藍(lán)狐血清生化指標(biāo)的影響

血清總蛋白和白蛋白含量可以反映動物對蛋白質(zhì)的消化吸收程度，血清白蛋白的主要生理功能是結(jié)合和運(yùn)輸內(nèi)源性與外源性物質(zhì)，維持血液膠體滲透壓，具有運(yùn)輸、免疫、修補(bǔ)和緩沖等作用。有研究表明，從血清白蛋白含量可以看出動物攝入蛋白質(zhì)的情況，蛋白質(zhì)攝入量不足可引起白蛋白含量下降［31］。本研究中，飼糧蛋白質(zhì)水平在26%和28%時(shí)血清白蛋白和總蛋白含量較理想，低蛋白質(zhì)飼糧組藍(lán)狐可能由于長期蛋白質(zhì)攝入量不足，使得肝臟合成白蛋白量減少，而過高的蛋白質(zhì)水平可能會造成肝臟的損傷。血清尿素氮含量與動物體氮的代謝有關(guān)，李輝等［32］在試驗(yàn)中得出血清尿素氮含量隨著飼糧蛋白質(zhì)水平的升高而增加，F(xiàn)igueroa等［7］也得出相似的結(jié)論。血清尿素氮含量隨著飼糧蛋白質(zhì)水平的升高呈增加的趨勢，這可能是因?yàn)楦叩鞍踪|(zhì)水平飼糧使肝、腎超負(fù)荷而導(dǎo)致血清尿素氮含量升高。谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶是動物體內(nèi)與蛋白質(zhì)代謝相關(guān)的重要指標(biāo)，在氨合成菌體蛋白的過程中谷丙轉(zhuǎn)氨酶催化氨基與碳架結(jié)合生成氨基酸，α-谷草轉(zhuǎn)氨酶是體內(nèi)聯(lián)合脫氨基作用的關(guān)鍵酶，使天門冬氨酸及酮戊二酸轉(zhuǎn)換氨基生成谷氨酸和草酰乙酸［31］。由本研究結(jié)果可知，飼糧蛋白質(zhì)水平對谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性沒有太大的影響，但高蛋白質(zhì)飼糧組血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性要比其他組高，可能是高水平蛋白質(zhì)使肝臟受損，肝細(xì)胞通透性增加，使得谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶從肝細(xì)胞中釋放到血液中。

4 結(jié)論

①冬毛期藍(lán)狐飼糧蛋白質(zhì)水平為28%時(shí)能夠獲得較好的生長性能，結(jié)合試驗(yàn)期內(nèi)藍(lán)狐的采食量與飼糧中蛋白質(zhì)水平2項(xiàng)指標(biāo)，得出冬毛期藍(lán)狐的蛋白質(zhì)需要量是120 g/d。

②當(dāng)飼糧中蛋白質(zhì)水平達(dá)到28%時(shí)，冬毛期藍(lán)狐對蛋白質(zhì)的利用率較高，糞氮、尿氮的排出量較低，可以有效減少氮排放，保護(hù)環(huán)境。

③冬毛期藍(lán)狐血清中尿素氮含量隨飼糧蛋白質(zhì)水平的升高呈升高趨勢，但飼糧中過高的蛋白質(zhì)水平會傷害肝組織，使谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性升高。

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