徐 清，龍啟才，邱建波

1.廣東省食品藥品職業(yè)技術(shù)學(xué)校，廣東廣州 510663；2.中山大學(xué)藥學(xué)院臨床藥理研究所，廣東廣州 510089

桑寄生、雷公藤是治療風(fēng)濕的常用中藥，分別屬于袪風(fēng)濕強(qiáng)筋骨藥和祛風(fēng)濕散寒藥。桑寄生具有補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨、祛風(fēng)濕、安胎的功效，臨床上可用于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和骨關(guān)節(jié)炎的治療[1]。雷公藤具有祛風(fēng)除濕、消腫止痛、通經(jīng)活絡(luò)、清熱解毒的功效，其單用或入復(fù)方可治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，療效確切[2]。前列腺素是參與炎癥的主要介質(zhì)，故作為前列腺素合成和起始步驟關(guān)鍵酶的環(huán)氧化酶（COX）對(duì)于關(guān)節(jié)炎的發(fā)病和發(fā)展具有重要的作用和影響[3]。本實(shí)驗(yàn)通過桑寄生、雷公藤在大鼠體內(nèi)對(duì)胃黏膜環(huán)氧化酶活性的影響來探討其祛風(fēng)濕可能的作用機(jī)制，給臨床組方選藥提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

藥材：桑寄生和雷公藤購于廣州市藥材公司。經(jīng)鑒定分別為桑寄生科植物桑寄生（Taxillus chinensis DC.Danser）的干燥帶葉莖枝，衛(wèi)矛科植物雷公藤（Tripterygium wilfordii.Hook.f.）的根。經(jīng)粉碎后，用索氏提取器提取1 h（提取前用95%乙醇室溫密閉浸泡12 h），所得提取液減壓蒸干，用0.5%羧甲基纖維素鈉分散減壓蒸干物，終濃度為每毫升含1 g生藥，使用前搖勻。

試劑和儀器：吲哚美辛標(biāo)準(zhǔn)品（中國藥品與生物制品檢定所）；純度為99.6%的塞來昔布（Celecoxib）（輝瑞制藥有限公司）；6-酮-前列腺素 F1α（6-keto-PGF1α）放免試劑盒（解放軍總醫(yī)院東亞放免研究所）；其他試劑為國產(chǎn)分析純。放免γ計(jì)數(shù)器（中國科學(xué)院上海核研究所日環(huán)儀器廠）。

動(dòng)物：SD大鼠，體重180～220 g，雄性，購自中山大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。

1.2 方法

參照文獻(xiàn)[4]方法，將30只雄性SD大鼠隨機(jī)分為10組，每組各3只。其中5組直接給藥，另外5組則先用乙醇灌胃造成胃黏膜損傷后再給予藥物，直接給藥的5組及造模型后再給藥的5組包括對(duì)照組、吲哚美辛組、塞來昔布組、桑寄生組、雷公藤組，所給的對(duì)照或藥物依次為0.5%羧甲基纖維素鈉、0.2%吲哚美辛、0.6%塞來昔布、桑寄生（1 g/ml）和雷公藤（1 g/ml）。直接給藥的5組，禁食20 h、禁水1 h后開始給藥，給藥劑量為5 ml/kg。先用乙醇灌胃的5組，則禁食20 h、禁水1 h后，用無水乙醇1 ml灌胃，1 h后再分別給予相同劑量的對(duì)照或藥物。給藥4 h后，將大鼠用乙醚麻醉，打開腹腔，取出胃并切開，翻開大鼠胃黏膜表面，用冰生理鹽水漂洗后，肉眼觀察大鼠胃黏膜表面的損傷程度，并按文獻(xiàn)[5]方法計(jì)算潰瘍指數(shù)，即：條索狀損傷長寬均小于1 mm者計(jì)0.5分；若長度大于1 mm，則測(cè)量其長度，每毫米計(jì)1分；如果寬度也大于1 mm，則按長和寬的乘積計(jì)分。將計(jì)分相加即可得到該大鼠的潰瘍指數(shù)。同時(shí)立即于大鼠胃體后壁相同部位取組織1塊（重量約為60 mg），迅速用4℃生理鹽水制成組織勻漿（濃度20 mg/ml），-20℃凍存?zhèn)溆谩y(cè)定時(shí)，將凍存的組織勻漿4℃解凍，在3 500 r/min的轉(zhuǎn)速下離心15 min，取上清液測(cè)6-Keto-PGF1α的放射活性（按試劑盒說明書操作）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 11.5 for Windows統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用 t檢驗(yàn)，以 P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

結(jié)果顯示，未給乙醇時(shí)，桑寄生組和雷公藤組灌胃后不損傷正常大鼠胃黏膜，也不抑制6-Keto-PGF1α的生成，這與塞來昔布組的作用相似，但吲哚美辛組的大鼠胃黏膜表面可見點(diǎn)狀和條索狀糜爛，潰瘍指數(shù)明顯增加（P＜0.05），對(duì)6-Keto-PGF1α的生成也有明顯的抑制（P＜0.01）。給1 ml乙醇灌胃后，對(duì)照組大鼠胃黏膜表面可見明顯損傷：水腫、糜爛、潰瘍等，部分大鼠的胃腔內(nèi)還可見少許凝血塊，但未見穿孔，病變的部位主要在胃體和胃底，與未給乙醇對(duì)照組比較，潰瘍指數(shù)及6-Keto-PGF1α明顯升高 （P＜0.05）。給桑寄生和雷公藤后，胃潰瘍損傷程度明顯增加（P＜0.05），對(duì) 6-Keto-PGF1α 生成的抑制作用與給乙醇對(duì)照組比較，差異也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），這與塞來昔布組和吲哚美辛組的作用相似。結(jié)果見表1。

3 討論

前列腺素（PGs）是一種與炎癥緊密相關(guān)的重要介質(zhì)，其合成的限速酶是環(huán)氧化酶（COX）?，F(xiàn)在普遍認(rèn)為COX有兩種：COX-1和COX-2，COX-1屬于結(jié)構(gòu)性酶，在正常人體內(nèi)即存在，主要作用為維持身體的正常功能；而COX-2則是一種誘導(dǎo)酶，參與炎癥反應(yīng)、腫瘤形成等，被抑制后可以發(fā)揮抗炎作用[6]。正常大鼠口服吲哚美辛（非選擇性環(huán)氧化酶抑制劑）后，強(qiáng)烈抑制血小板血栓素 B2（TXB2）的釋放及6-Keto-PGF1α的生成，并且損傷胃黏膜，但口服羅非昔布（選擇性環(huán)氧化酶-2抑制劑）不會(huì)引起胃黏膜損傷[7]。然而更多的證據(jù)證明，COX不僅在疼痛和炎癥等病理?xiàng)l件中起作用，同時(shí)也有維持正常胃黏膜生理功能的作用，當(dāng)胃黏膜受損傷時(shí)，可以觀察到COX-2表達(dá)上調(diào)，通過合成前列腺素參與病變的修復(fù)過程[8]。選擇性COX-2抑制劑能抑制COX-2的活性，從而削弱胃黏膜的抵抗力，加速胃黏膜的損傷[9]。在本實(shí)驗(yàn)中，正常大鼠給予吲哚美辛灌胃后能引起胃黏膜損傷，6-Keto-PGF1α的生成也明顯抑制，而塞來昔布與對(duì)照組比較，差異則無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；但如果先用無水乙醇灌胃造成大鼠胃黏膜后，再給予相應(yīng)藥物，則塞來昔布和吲哚美辛都能加重胃黏膜損傷，也能抑制6-Keto-PGF1α的生成。

表1 桑寄生、雷公藤對(duì)大鼠胃黏膜環(huán)氧化酶的影響（x±s，n=3）

桑寄生、雷公藤作為常用復(fù)方中的一味，用于風(fēng)濕性或類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的治療。本實(shí)驗(yàn)表明，正常大鼠灌胃桑寄生和雷公藤的乙醇提物后，不抑制大鼠胃黏膜6-Keto-PGF1α的生成，也不損傷胃黏膜，但如果先用乙醇灌胃，造成大鼠的胃黏膜損傷后，會(huì)明顯抑制6-Keto-PGF1α的生成，且會(huì)加重已有的胃損傷。提示桑寄生、雷公藤醇提物能抑制乙醇誘導(dǎo)大鼠胃黏膜中環(huán)氧化酶的活性，但對(duì)正常大鼠胃黏膜的環(huán)氧化酶無影響。因此可以推測(cè)，在臨床組方選藥時(shí)，因其不影響正常的胃黏膜，所以正常人可以廣泛使用，但會(huì)加重已有的胃損傷，所以對(duì)患有胃潰瘍的患者，選藥時(shí)則應(yīng)慎重。

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