劉 玫, 張 玥

(天津市中心婦產(chǎn)科醫(yī)院，天津 300100)

甲硝唑氯己定洗劑為復(fù)方制劑，主要用于治療細(xì)菌、滴蟲、霉菌引起的各種陰道炎。甲硝唑?qū)Υ蠖鄶?shù)厭氧菌具有強(qiáng)大的抗菌作用，其硝基還原成一種細(xì)胞毒，從而作用于細(xì)菌的DNA代謝過程，促使細(xì)菌死亡。甲硝唑除對胃腸道的刺激外，還對心、肝、腎、血液系統(tǒng)有一定的損害[1]。近年來甲硝唑的外用制劑如洗劑等在婦科用藥廣泛。高濃度的藥物直接作用于患處，有較高的針對性，從而收到良好效果。本研究建立了紫外分光光度法測定甲硝唑氯己定洗劑中甲硝唑的含量，方法簡便，測定準(zhǔn)確，重現(xiàn)性良好。

1 儀器與試藥

SartoriusCP225D電子分析天平(梅特勒)，TU-1901雙光束紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司)，甲硝唑?qū)φ掌?中國藥品生物制品檢定所，批號100191-200305，純度99.89%)，甲硝唑氯己定洗劑(杭州易舒特藥業(yè)有限公司提供，規(guī)格含甲硝唑70 mg/350 ml，批號20090612，20091004，20101112)，水為純化水。其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1溶液制備

2.1.1對照品溶液 取對照品20 mg，精密稱定，置100 ml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，制得對照品溶液。

2.1.2供試品溶液 精密吸取樣品溶液25 ml(約相當(dāng)于5 mg的甲硝唑)，置50 ml量瓶中，用水稀釋至刻度。搖勻。精取5.0 ml置50 ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

2．1．3陰性對照溶液 按處方規(guī)定制備不含甲硝唑的陰性樣品，并依“2.1.2”項下方法制備陰性對照溶液。

2.2測定波長的選擇 取對照品溶液適量，以水為空白對照，在200～500 nm波長范圍內(nèi)掃描。同時取供試品和陰性對照液適量進(jìn)行紫外波長掃描。結(jié)果顯示，甲硝唑在320 nm波長處有最大吸收，輔料對主藥吸收峰無干擾。故選擇320 nm作為測定波長。見圖1。

2.3線性關(guān)系考察 分別精密吸取對照品溶液1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 ml，置于50 ml量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。以水為空白對照，照紫外分光光度法，在320 nm波長處分別測定吸光度。以吸光度(A)對溶液的濃度 (C)線性回歸，得回歸方程：A=18.159C-0.727 7(r=0.999 9，n=5)。結(jié)果表明，甲硝唑在4.096～12.288 μg/ml 濃度范圍內(nèi)與吸光度成良好線性關(guān)系。

1.陰性溶液 2.對照品 3.供試品

2.4精密度實(shí)驗(yàn) 取同一濃度對照品溶液，在320 nm波長處測定吸光度，連續(xù)測定6次。結(jié)果顯示，RSD為1.7%，表明精密度良好。

2.5穩(wěn)定性考查 在室溫下取同一批號供試品溶液1 m1，在2、4、6、8、10和12 h分別依法測定吸光度。結(jié)果顯示，RSD為1.4%(n=6)，表明供試品溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.6重復(fù)性考查 精密吸取“2.1.2”項下供試品溶液1 m1，共6份，在波長320 nm處重復(fù)測定6次，并計算含量，結(jié)果顯示：平均含量為96.5%，RSD為0.38%(n=6)，方法重復(fù)性較好。

2.7加樣回收率試驗(yàn) 精密吸取已知含量(0.210 3 mg/ml)的樣品溶液5 m1(批號為20101112)，分別按已知含量的80%、100%和120%加入甲硝唑?qū)φ掌?，照紫外分光光度法測定。結(jié)果平均加樣回收率為99.16% ，RSD為0.88%。見表1。

表1 加樣回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.8樣品測定 精密吸取樣品溶液25 ml(約相當(dāng)于5 mg的甲硝唑)，置50 ml量瓶中，用水稀釋至刻度,搖勻。精取5.0 ml置50 ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液，分別在320 nm的波長處測定吸光度。結(jié)果見表2。

表2 甲硝唑含量測定結(jié)果(n=3)

3 討論

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，采用本法測定甲硝唑的含量，在320 nm處方法重現(xiàn)性好，穩(wěn)定性好，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

甲硝唑的含量測定方法有高效液相色譜法、紫外分光光度法[2]、氣相色譜法[3]，高效液相色譜法及氣相色譜法因儀器昂貴，運(yùn)行成本高而受到局限。而本實(shí)驗(yàn)測定甲硝唑含量的方法，引入對照品作為參比，以320 nm作為檢測波長，操作簡便快速，且經(jīng)濟(jì)實(shí)用，適用于甲硝唑的質(zhì)量控制。

1 蔣克春．甲硝唑的毒副作用及應(yīng)注意事項．航空軍醫(yī)雜志，2003，31(4)：183

2 中國藥典.二部．2005：665

3 徐麗娟，邱涵．甲硝唑葡萄糖注射液中甲硝唑的含量測定．海峽藥學(xué)雜志,2004，16(5)：91