王淑賢,原德新

(1.佳木斯大學第一附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科,黑龍江 佳木斯 154003;2.佳木斯大學基礎醫(yī)學院組胚教研室,黑龍江 佳木斯 154007)

腦卒中分為缺血性腦卒中和出血性腦卒中,其中以缺血性腦卒中占 80%左右[1]。當今社會缺血性腦卒中是威脅人類健康的主要疾病之一,我國為腦卒中高發(fā)國家,2009年我國缺血性腦卒中發(fā)生者達 160萬人,在生存者中,75%留有不同程度的殘疾,給社會、家庭和個人帶來很大的經(jīng)濟負擔和巨大的精神壓力。缺血性腦卒中的發(fā)病率逐年呈上升的趨勢,發(fā)病的年齡越來越趨向于年輕化,逐漸威脅中老年人群的健康問題。黃芪注射液是從黃芪中提取的有效成分精制而成的,其主要成分有:黃酮類、多糖、氨基酸、黃芪皂苷、微量元素等物質,在體內能清除氧自由基,抗氧化損傷及促進Na+-K+-ATP酶活性等作用,對腦缺血再灌注后腦損傷有保護作用。本實驗通過建立大鼠大腦中動脈栓塞模型,探討黃芪注射液預處理對大鼠腦缺血再灌注后的神經(jīng)功能評分的影響。

1 材料和方法

1.1 材料

動物:雄性 Wistar大鼠,體重 (250±30)g,佳木斯大學實驗動物中心提供。藥物:黃芪注射液由上海福達制藥有限公司生產(chǎn);水合氯醛購自北京鼎國生物公司。儀器:眼科手術剪;眼科手術鑷等。

1.2 方法

1.2.1 實驗分組和給藥:實驗前自行飼養(yǎng) 7d,隨機分為 3組,分別為:正常對照組(即 A組 ,10只);假手術組(即 B組,10只,僅分離血管 ),腦缺血再灌注組 (即 C組,10只 )、黃芪注射液預處理組 (即 D組,10只)。 C組與 D組術前 7天開始用黃芪注射液 4.5g/kg腹腔注射,每日一次,共 7次。A組與B組用等量的生理鹽水腹腔注射。C組與 D組大鼠于腦缺血2h再灌注 24h后取材。

1.2.2 模型的建立:采用改良的 Longa[2]模型建立大鼠大腦中動脈缺血 /再灌注線栓法模型,大鼠用 10%水合氯醛(0.35mL/100g)腹腔注射麻醉后,頸正中剪開,分離出左側頸總動脈、頸內動脈和頸外動脈并結扎頸總動脈和頸外動脈,用動脈夾夾閉頸內動脈,用眼科剪將頸總動脈距離分叉2mm處剪一小口,選擇合適的魚線型號,插入魚線,深度18mm左右,稍遇到阻力后 ,結扎頸內動脈 ,縫合(留一部分魚線在皮膚外易于拔線)。假手術組僅分離出頸總動脈、頸內動脈和頸外動脈 ,不結扎血管。C組和 D組于缺血 2h將魚線退至頸內動脈與頸總動脈分叉處,再灌注 24h后取材。參照Zea-longa的分級標準進行評分:1～ 3分者入組 ,死亡和不合格的動物隨機替補。

1.2.3 神經(jīng)功能評分:參照 Zea-longa的分級標準進行行為學評分:0分,無神經(jīng)缺損體征;1分,不能充分屈曲右側前爪;2分,向右側轉圈;3分,向右側傾倒;4分,不能自發(fā)行走,意識喪失。各組大鼠于拔線后 2h進行神經(jīng)功能評分。

1.3 統(tǒng)計學分析

數(shù)據(jù)均用 SPSS17.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計,各組計量數(shù)據(jù)以± s表示。 各組數(shù)據(jù)的顯著性比較 ,采用 studen’tt檢驗,多組間比較采用單因素方差分析。以 P＜0.05為有統(tǒng)計學差異。

2 結果

黃芪注射液預處理對腦缺血再灌注后神經(jīng)功能評分的影響:正常對照組和假手術組均未出現(xiàn)神經(jīng)功能障礙,腦缺血再灌注組和黃芪注射液預處理組均有神經(jīng)功能障礙;與腦缺血再灌注組相比,黃芪注射液預處理組可以明顯降低腦缺血 2h再灌注 24h的神經(jīng)功能評分,有顯著統(tǒng)計學差異(P ＜0.01),結果見表1。

表1 黃芪注射液預處理對腦缺血再灌注后大鼠神經(jīng)功能評分的影響(±s,n=10)

表1 黃芪注射液預處理對腦缺血再灌注后大鼠神經(jīng)功能評分的影響(±s,n=10)

◆P ＜ 0.01,vs A組和 B組;★P ＜ 0.01,vs C組。

3 討論

大腦中動脈栓塞模型被普遍認為是局灶性腦缺血的標準模型[3～6],理由是:大鼠的腦血管也有 Wllis環(huán),解剖結構與人類較接近;血管損傷部位較恒定、重復性好;可行性強、操作簡單;費用低;大鼠飼養(yǎng)管理方便、體重小;大鼠腦體積小易于固定和免疫組織化學分析;純種鼠近親交配,品種相對一致等方面[7]。腦缺血再灌注損傷可以引起神經(jīng)功能障礙,主要表現(xiàn)有:對側肢體無力,出現(xiàn)運動及感覺障礙,尤其以運動障礙最為明顯[8]。參照再 Zea-Longa評分標準,對栓塞大腦中動脈的大鼠進行神經(jīng)功能評分,結果顯示:黃芪注射液預處理組能明顯降低大鼠腦缺血 2h再灌注 24h的神經(jīng)功能評分,改善神經(jīng)功能。本實驗為臨床上使用黃芪注射液來減少神經(jīng)元損傷促進其功能恢復提供實驗基礎。

[1] 楊彬源.促紅細胞生成素在腦缺血再灌注損傷中對神經(jīng)元線粒體的影響及作用機制的研究 [D].廣州:廣州醫(yī)學院,2009

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