陳 軍趙春剛趙 立

（1淮陰工學(xué)院生命科學(xué)與化學(xué)工程學(xué)院，江蘇 淮安，223003；2中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院黑龍江水產(chǎn)研究所，黑龍江 哈爾濱，150070）

大麻哈魚（Oncorhynchus keta）隸屬于鮭科（Salmonidae）大麻哈魚屬（Oncorhynchus Suckley），俗稱麻哈魚、馬哈魚、鮭魚、麻糕魚，有春型和秋型二類，主要分布于北緯35度以北美國(guó)、加拿大、日本、俄羅斯、朝鮮半島、中國(guó)的太平洋和大西洋水域，占世界水產(chǎn)品總產(chǎn)值的15%，在國(guó)際漁業(yè)經(jīng)濟(jì)中占有十分重要的地位[1，2]。我國(guó)主要品種為來(lái)自太平洋的秋型大麻哈魚，幼魚春季降河入海，在海里生長(zhǎng)3～5年后，成魚溯河洄游到原產(chǎn)地繁殖，屬典型的回歸性洄游魚類?，F(xiàn)在主要產(chǎn)于黑龍江支流烏蘇里江，漁場(chǎng)主要集中在下游河區(qū)的烏蘇鎮(zhèn)至抓吉江段，以烏蘇鎮(zhèn)灘地捕獲量最高。綏芬河、圖們江、呼瑪河支流、牡丹江和松花江也有少量的大麻哈魚進(jìn)入[3，4，5]。其肉質(zhì)細(xì)嫩，豐厚，呈紅色，味鮮美，脂肪含量極為豐富，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值相當(dāng)高。此外，還含有糖類和多種維生素?？衫鋬?、鹽漬或制成罐頭。其卵富含磷酸鹽、鈣質(zhì)及維生素A、D，將其鹽漬成“大麻哈魚籽”價(jià)格昂貴，在國(guó)際市場(chǎng)上極受歡迎[6]。近年來(lái)由于生態(tài)環(huán)境的改變和捕撈強(qiáng)度過大，大麻哈魚產(chǎn)量急劇下降，親魚群體結(jié)構(gòu)也向低齡化轉(zhuǎn)變，資源現(xiàn)狀十分惡劣，亟待采取有效措施對(duì)其資源加以保護(hù)和恢復(fù)。目前，國(guó)內(nèi)外主要采用的方式是人工放流增殖，這是迄今為止最普遍也最有效的大麻哈魚增殖方式。人工放流比自然產(chǎn)卵增殖洄游率要高2～3倍。我國(guó)自1956年建立放流站以來(lái)一直堅(jiān)持人工放流，近年來(lái)捕獲量已有所增加，從1996年的1萬(wàn)尾提高到目前的1.5～2.0萬(wàn)尾。但由于放流數(shù)量有限，洄游數(shù)量增長(zhǎng)慢。而通過人工繁殖技術(shù)提高產(chǎn)卵率、授精率、發(fā)眼率、孵化率，增加放流數(shù)量是提高大麻哈魚產(chǎn)量的主要手段。在人工催產(chǎn)繁殖秋大麻哈魚方面從未有過報(bào)道，本文主要從這一方面進(jìn)行研究。

1 材料與方法

1.1 親魚來(lái)源

黑龍江支流烏蘇里江下游捕獲的野生大麻哈魚親魚。暫養(yǎng)于江水的網(wǎng)箱中。江水流速0.65m/s，水溫2～4℃。親魚置于網(wǎng)箱內(nèi)可保證有充足的溶氧和一定的水流刺激，并保持純自然條件下的水體溫度變化，有利于性腺的發(fā)育。

1.2 雌雄鑒別

生殖季節(jié)有明顯的婚姻色，魚體兩側(cè)有8～12條橙紅色斑條紋，雌魚色較濃，雄魚斑條較大。雌魚腹部膨大柔軟，顏色發(fā)暗，下頜前端稍平滑。雄魚生殖孔突出，輕壓腹部有少量精液流出，下頜前端有一個(gè)似鳥喙?fàn)畹墓?，上下頜不愈合狀況比雌魚顯著。

1.3 催產(chǎn)藥物

在捕獲的親魚中，絕大多數(shù)雄魚成熟較好，能夠擠出精液，無(wú)須注射催產(chǎn)藥物。雌魚雖腹部柔軟，但輕壓腹部均無(wú)卵粒流出，成熟度不夠。說(shuō)明雄性親魚較雌魚成熟要早。挑選成熟相對(duì)較好的雌性親魚60尾，分成3組，分別放入三個(gè)網(wǎng)箱中，每組20尾。對(duì)照組（S-GnRH-A組），只進(jìn)行S-GnRH-A藥物注射；試驗(yàn)1組（HCG組），注射S-GnRH-A和HCG；試驗(yàn)2組（17α-20βp組），注射S-GnRH-A、HCG和17α-20βp。采用背鰭基部注射，間隔2天，共進(jìn)行2次注射。

表1 大麻哈魚催產(chǎn)藥物種類及劑量

1.4 產(chǎn)卵、授精

由于水溫較低，只有2～4℃，催產(chǎn)藥物發(fā)揮作用較慢，效應(yīng)期較長(zhǎng)。在注射催產(chǎn)藥物后，每3天檢查一次親魚成熟情況。將親魚頭朝下倒提起，用手輕壓腹部，成熟的親魚卵巢內(nèi)的卵完全游離，有橘紅色或橘黃色的卵順利流出時(shí)，可以進(jìn)行人工采卵授精。事先檢查精液質(zhì)量，輕壓雄魚腹部擠出少量精液,精液入水后,立即散開，說(shuō)明精液質(zhì)量較好。同時(shí)對(duì)精子活力進(jìn)行鏡檢，選擇精子活力好的雄性親魚用來(lái)進(jìn)行人工授精，將幾尾雄魚精液混合為一組，以保證更好的受精率。雌雄親魚比例一般為3：1。取出成熟好的雌性親魚，從頸動(dòng)脈放出血液，避免血液流入腹腔對(duì)卵產(chǎn)生影響。剖開腹部，將成熟卵接入干凈的白瓷盆中，在無(wú)光線直射條件下將雄魚精液倒入白瓷盆中，用手輕輕攪拌，讓精卵充分接觸，使精子能均勻地分布到卵上，然后加干凈的清水激活精子，并用手?jǐn)嚢?分鐘以上，以保證魚卵能夠充分的受精。受精后，要不斷地用干凈的水沖洗受精卵，將受精卵上少量的血液、卵皮及精液產(chǎn)生的白沫沖洗掉，直至盆中的水清澈透明，同時(shí)用手撿出白卵。靜止1小時(shí)左右，讓其充分吸水膨脹，卵膜與卵黃膜分離,出現(xiàn)圍卵腔,并且卵膜開始硬，即可進(jìn)行孵化。

1.5 孵化

采用平列槽式進(jìn)行流水孵化。受精卵孵化要在避光的室內(nèi)，防止陽(yáng)光直射。每天用2%鹽水消毒一次,控制死卵水霉菌的滋生,待受精卵發(fā)育到發(fā)眼期,再把死卵以及滋生水霉的受精卵揀出,整個(gè)孵化期內(nèi)只有在受精卵發(fā)眼后才能撥動(dòng)卵，其他時(shí)期不要人為攪動(dòng)受精卵。

2 結(jié)果

2.1 繁殖力、成熟系數(shù)、肥滿度

隨機(jī)抽取大麻哈雌雄親魚各30尾進(jìn)行繁殖力、成熟系數(shù)和肥滿度測(cè)定，結(jié)果如表2：

表2 烏蘇里江大麻哈魚生殖群體繁殖力、成熟系數(shù)和肥滿度系數(shù)

2.2 人工繁殖

選取外形較好，體表無(wú)傷的大麻哈雌性親魚60尾，隨機(jī)分成三組進(jìn)行催產(chǎn)注射。大麻哈魚成熟卵圓形或橢圓形，橘紅色或橘黃色，具光澤，有較好彈性，卵徑0.54～0.66cm。采用地下井水進(jìn)行流水孵化，在水溫6～9℃輻度范圍內(nèi)，大麻哈魚經(jīng)過59天孵化出苗，孵化積溫440～480℃。三組魚試驗(yàn)結(jié)果如下：

表3 大麻哈魚人工催產(chǎn)效果

三個(gè)試驗(yàn)組受精率、發(fā)眼率、孵化率均相差不大，但催產(chǎn)率差異很大，17α-20βp組的催產(chǎn)率要大大高于S-GnRH-A組和HCG組，說(shuō)明在較低水溫條件下，17α-20βp對(duì)促進(jìn)親魚性腺發(fā)育具有很強(qiáng)的作用效果。三組試驗(yàn)魚共有18尾親魚成熟產(chǎn)卵，共獲得成熟卵63500粒，受精卵51680粒，發(fā)眼卵38815粒，魚苗36370尾。剛孵出的大麻哈魚身體透明，有一個(gè)較大且細(xì)長(zhǎng)的橘紅色或橘黃色卵黃囊，成群聚集在水底避光處，體全長(zhǎng)2.3～2.7cm，體重0.11～0.18g?？课兆陨砺腰S囊為營(yíng)養(yǎng)。

3 討論

3.1 人工繁殖的影響因素

大麻哈魚屬洄游性魚類，其洄游的主要目的就是回到繁殖地進(jìn)行產(chǎn)卵繁殖，在資料記載中絕大部分洄游個(gè)體年齡組成為3＋、4＋、5＋、6＋齡，其中以4＋、5＋齡為主，個(gè)體較大，性腺發(fā)育良好。一般捕獲的親魚暫養(yǎng)一段時(shí)間，人工給予適宜的水流刺激，性腺會(huì)自行發(fā)育達(dá)到游離產(chǎn)卵狀態(tài)。近年來(lái)由于人們大肆過度捕撈，其種群數(shù)量已大大減少，種群的年齡組成也逐年呈現(xiàn)低齡化，這種年齡組成的群體個(gè)體相對(duì)較小，肥滿度、成熟系數(shù)及絕對(duì)繁殖力均較低，性腺成熟程度稍差，不能達(dá)到自行游離產(chǎn)卵的效果，需使用人工注射催產(chǎn)藥物促進(jìn)其性腺發(fā)育，即使這樣，其產(chǎn)卵效果仍然不是很理想，除使用低溫催產(chǎn)劑的17α-20βp組的催產(chǎn)率達(dá)到65%外，S-GnRH-A組和HCG組均很低。除催產(chǎn)率外，三個(gè)試驗(yàn)組的受精率、發(fā)眼率、孵化率均相差不大，說(shuō)明大麻哈魚人工繁殖的主要技術(shù)難點(diǎn)是人工催產(chǎn)促使性腺發(fā)育這一關(guān)鍵步驟。攻克這一技術(shù)難關(guān)，就會(huì)增大人工繁殖的苗種規(guī)模，進(jìn)而加大人工放流量，促進(jìn)資源增殖起到積極的作用。

受精卵孵化對(duì)水中溶氧量有一定的要求。溶氧量過少，對(duì)受精卵胚胎發(fā)育不利，畸形魚苗出現(xiàn)率高。直射光對(duì)受精卵和前期仔魚有致死作用。因此,在整個(gè)孵化過程中和仔魚前期，應(yīng)在無(wú)光或光線較暗的條件下孵化。魚受精卵在胚胎發(fā)育過程中，對(duì)外界環(huán)境刺激比較敏感，其中胚盤形成期、胚環(huán)、胚盾出現(xiàn)期和體節(jié)分化期對(duì)外界機(jī)械刺激比較敏感,也即危險(xiǎn)期,要保持環(huán)境處于絕對(duì)安靜,以期胚胎發(fā)育順利進(jìn)行[7，8，9]。

3.2 低溫催產(chǎn)作用

大麻哈親魚暫養(yǎng)水溫為2～3℃，在這種低溫條件下，性腺發(fā)育較慢，為了提高親魚暫養(yǎng)成活率，促使其集中產(chǎn)卵，使用人工催產(chǎn)技術(shù)手段進(jìn)行繁殖。一般的催產(chǎn)藥物對(duì)魚類性腺發(fā)育的作用很小，基本上不能促使其性腺發(fā)育至產(chǎn)卵狀態(tài)。自上世紀(jì)七十年代以來(lái)，國(guó)外開展了對(duì)冷水魚類排卵效應(yīng)生理機(jī)制作用的研究，研制出了一種類固醇激素 17α-20βp，對(duì)虹鱒、白斑狗魚、泥鰍、鯉魚、鱘魚等做了低溫催產(chǎn)試驗(yàn)，均獲得了較好的效果[10，11，12，13]。本文通過注射17α-20βp，使催產(chǎn)率由常規(guī)催產(chǎn)藥物的10%、15%提高到65%，作用效果非常明顯。

3.3 資源保護(hù)與增殖途徑

大麻哈魚一生只繁殖一次，生殖后即死亡，產(chǎn)卵群體完全由補(bǔ)充群體組成，而補(bǔ)充群體的資源量正在逐年下降。產(chǎn)卵群體的年齡組成低齡化，規(guī)格減小，肥滿度下降，繁殖力降低，捕撈強(qiáng)度過大，生態(tài)環(huán)境惡化，使種群的補(bǔ)充能力減弱，是導(dǎo)致目前資源下降的幾方面重要因素。為了盡快恢復(fù)我國(guó)的野生資源量，實(shí)現(xiàn)大麻哈魚的增殖，必須解決以下幾個(gè)方面的問題：一、進(jìn)一步開展人工繁殖工作，加大人工放流數(shù)量，特別在目前資源利用大于自然繁衍速度情況下，采取人工增殖技術(shù)措施以補(bǔ)償種群資源儲(chǔ)量不足。二、保護(hù)生態(tài)環(huán)境，盡量減少環(huán)境污染，使生態(tài)環(huán)境保持穩(wěn)定，保持良性循環(huán)。三、合理捕撈，根據(jù)前一年捕撈群體規(guī)格、年齡組成，確定下一年的捕撈量。四、縮短捕魚期，延長(zhǎng)禁捕期，捕魚期內(nèi)嚴(yán)格控制捕撈船只數(shù)量。五、加強(qiáng)科學(xué)研究和國(guó)際交流與合作，學(xué)習(xí)國(guó)外比較成熟的技術(shù)和經(jīng)驗(yàn)，完善其配套技術(shù)。

（略）