孫正偉 趙均峰 金鋒

神經(jīng)干細(xì)胞治療腦卒中示近來(lái)國(guó)際神經(jīng)病學(xué)研究的一個(gè)前沿課題，神經(jīng)介入途徑治療腦卒中示近年來(lái)飛速發(fā)展及臨床充分證實(shí)的有效治療手段，神經(jīng)介入治療結(jié)合神經(jīng)干細(xì)胞移植治療腦卒中找到了腦卒中治療的一個(gè)新的模式，本研究治療及總結(jié)該治療模式下15例患者，取得較好的效果。

1 資料與方法

1.1 一般方法 15例腦卒中患者，男9例，女6例，年齡34～70歲，平均(57.3±12.7)歲，腦梗死7例，(其中急性腦梗死2例，腦梗死后遺癥5例)腦出血5例(其中急性腦出血1例，腦出血后遺癥4例)腦卒中后帕金森綜合征3例，對(duì)照組自身對(duì)照。

1.2 神經(jīng)干細(xì)胞分離及培養(yǎng) 取出胎齡6～8周人胚胎腦組織，分離出腦室區(qū)及室下區(qū)，加入終濃度0.25%胰蛋白酶消化，500～800 r/min的離心機(jī)中漂洗4 min，計(jì)數(shù)，調(diào)整細(xì)胞濃度為5105/ml，于培養(yǎng)液中加入 bFGF(20 ng/ml)，于37℃。5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)并傳代5～6代，離心取得神經(jīng)干細(xì)胞哦懸液，并計(jì)數(shù)，審核及驗(yàn)收。

1.3 方法 15例患者均局麻下于右側(cè)股動(dòng)脈Seldinger穿刺技術(shù)，采用5～6 F鞘管導(dǎo)入導(dǎo)管，DSA監(jiān)視下，明確腦血管及側(cè)支循環(huán)情況，責(zé)任血管神經(jīng)干細(xì)胞移植。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 樣本配對(duì)t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 療效 14例均有效，1例無(wú)效，有效率92%，9例患者肢體障礙及言語(yǔ)障礙有改善，3例構(gòu)音障礙及吞咽障礙改善，3例卒中后帕金森患者震顫均明顯改善，移植后ESS(55.2+20.1)較移植前(50.4+20.0，)移植后BI(42.1+32.1)較移植前(35.6+31.9)，應(yīng)改為ESS(55.2±20.1)較移植前(50.4±20.0)，移植后 BI(42.1±32.1)較移植前(35.6±31.9)，均有明顯提高。

2.2 不良反應(yīng) 2例患者一過(guò)性發(fā)熱，對(duì)癥治療后2～3均緩解，1例患者股動(dòng)脈穿刺部位局部血腫，余無(wú)不適，隨訪24個(gè)月。

以下數(shù)據(jù)內(nèi)容 ESS(55.2+20.1)較移植前(50.4+20.0)，移植后BI(42.1+32.1)較移植前(35.6+31.9)，應(yīng)改為ESS(55.2±20.1)較移植前(50.4±20.0，)移植后 BI(42.1±32.1)較移植前(35.6±31.9)。

3 討論

神經(jīng)干細(xì)胞(NSCs)的發(fā)現(xiàn)及研究室近年來(lái)神經(jīng)生物學(xué)領(lǐng)域最重要進(jìn)展之一，神經(jīng)干細(xì)胞具有分化性，低免疫源性，自我更新能力，較強(qiáng)的遷移能力[1]，電鏡下觀查神經(jīng)干細(xì)胞具有大量的多聚核糖體及高爾基復(fù)合體，說(shuō)明神經(jīng)干細(xì)胞具有旺盛的分泌能力[2]，我們采取神經(jīng)介入方式，將神經(jīng)干細(xì)胞直接注入責(zé)任腦血管，吸收及效果更直接，一過(guò)性發(fā)熱考慮免疫反應(yīng)有關(guān)，介入方式神經(jīng)干細(xì)胞移植較神經(jīng)介入其他治療，如超選擇溶栓及動(dòng)脈瘤填塞等并發(fā)癥及風(fēng)險(xiǎn)對(duì)比明顯較低，安全有效，研究表明NSCs移植后患者癥狀得到不同程度緩解，為進(jìn)一步臨床研究開展提供了依據(jù)，本實(shí)驗(yàn)15例腦卒中患者均行神經(jīng)介入干細(xì)胞移植，結(jié)果顯示14例均有效，有效率92%，移植后 ESS(55.2+20.1)較移植前(50.4+20.0)，移植后BI(42.1+32.1)較移植前(35.6+31.9)，均有明顯提高，缺血性腦損傷神經(jīng)干細(xì)胞修復(fù)作用可能在于內(nèi)源性NSC增活作用及外源性NSC移植后趨化作用及誘導(dǎo)分化作用[3]，尤其值得提出的是腦卒中后帕金森綜合征介入方式神經(jīng)干細(xì)胞移植震顫緩解均較明顯，原因可能是移植的細(xì)胞在局部環(huán)境信號(hào)的調(diào)控下具有表達(dá)DA能神經(jīng)的標(biāo)志酶-絡(luò)氨酸羥化酶(TH)的活性[4]，無(wú)明顯毒副作用，移植神經(jīng)干細(xì)胞能在宿主腦內(nèi)遷移并分化成神經(jīng)元，現(xiàn)隨訪觀察治療組無(wú)排斥反應(yīng)及腫瘤形成，因缺乏合理的細(xì)胞移植物的功能評(píng)價(jià)指標(biāo)，相關(guān)實(shí)驗(yàn)難以定論，但神經(jīng)干細(xì)胞移植對(duì)人類健康及疾病治療的意義是積極的，隨著干細(xì)胞分化，標(biāo)記，移植等方面研究的日益深入，前景廣闊。有關(guān)移植治療反應(yīng)和長(zhǎng)期療效待進(jìn)一步觀察及總結(jié)。

[1]Van der Kooy D，Weiss S.Why stem celle?Science，2000，287：1439-1411.

[2]安析華，翟晶，等.離體培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)學(xué)研究.中國(guó)康復(fù)理論及實(shí)踐，2004，8(10)：11-2.

[3]楊東波，楊立莊.缺血缺氧腦損傷治療的新方法-神經(jīng)干細(xì)胞移植.國(guó)外醫(yī)學(xué)腦血管病分冊(cè)，2003，11(2).

[4]李學(xué)坤，張卿，等.移植的神經(jīng)干細(xì)胞在帕金森模型小鼠腦內(nèi)的存活與分化.中國(guó)康復(fù)理論及實(shí)踐，2003，9(7)：387-389.