陳光,王艷麗,姜璟瑛,周敏
(黑龍江中醫(yī)藥大學(xué),黑龍江 哈爾濱 150040)
椎動脈型頸椎病(CSA)是頸椎病常見類型之一,臨床常見眩暈、眼花、耳鳴,甚則可致昏厥[1-2]。眩暈多由腦動脈供血不足導(dǎo)致,而67.5%腦動脈供血不足是由椎動脈供血障礙引起[3]。本實驗通過觀察頸痛寧丸對椎動脈型頸椎病模型家兔血漿 ET和血清NO的影響,從而為探討頸痛寧丸治療椎動脈型頸椎病的作用機制奠定基礎(chǔ)。
1.1 造模方法 健康新西蘭大耳白家兔70只,雌雄各半,體質(zhì)量2.5kg~2.8kg,由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)動物實驗中心提供。用脫毛劑去除各家兔枕后及頸部體毛,TCD檢測各家兔椎-基底動脈血流速度。然后抽取硬化劑消痔靈10ml注射于兔左側(cè)C3~C5頸椎橫突側(cè)面,并于第2、4周重復(fù)注射。再次TCD檢測,選取左側(cè)椎動脈、右側(cè)椎動脈、基底動脈血流速度均減小10cm/s以上者為成功模型。
1.2 分組及給藥 挑選成模家兔40只,隨機分為5組,每組8只。頸痛寧丸高劑量組每日給予頸痛寧丸2g/kg(33.3%,6ml/kg);頸痛寧丸中劑量組每日給予頸痛寧丸1g/kg(25%,4ml/kg);頸痛寧丸低劑量組每日給予頸痛寧丸0.5g/kg(12.5%,4ml/kg);陽性對照組每日給予頸復(fù)康顆粒1g/kg(25%,4ml/kg);模型對照組給予等容積生理鹽水。另取8只健康家兔作為空白對照組,正常飼養(yǎng)。各家兔采取灌胃給藥方法,每日1次,給藥4周。
1.3 藥物制備 頸痛寧丸由丹參,當歸,桃仁,川芎,紅花,桑枝,葛根,穿山甲等組成,蜜丸。
1.4 儀器與試劑 722光柵分光度計9301139(上海第三分析儀器廠);自動酶標儀anthosHTⅡ型(奧地利);離心機LDZ4-1.2(北京醫(yī)用離心機廠);恒溫水浴DGX-9143B-1(上海福碼實驗設(shè)備有限公司);ET分析測定盒(北京北方生物技術(shù)研究所生產(chǎn));NO試劑盒(化學(xué)法,南京建成生物工程研究所);消痔靈注射液(吉林省集安益盛藥業(yè)股份有限公司,批號0907253);頸復(fù)康顆粒(承德中藥集團有限公司,批號090124)。
1.5 指標檢測 末次給藥后30min,各動物空腹下腔靜脈采血。抗凝血3 500rpm離心15min,分離血漿,-80℃保存;非抗凝血2 000rpm離心10min,分離血清,-40℃保存。酶聯(lián)免疫法檢測血漿中ET含量,化學(xué)法檢測血清中NO含量。
1.6 統(tǒng)計學(xué)處理 實驗數(shù)據(jù)用統(tǒng)計軟件SPSS 13.0處理,以均數(shù)±標準差(±s)表示,進行t檢驗。
頸痛寧丸對椎動脈型頸椎病家兔血清NO和血漿ET含量的影響,見表1。
表1 頸痛寧丸對椎動脈型頸椎病家兔血清NO和血漿ET含量的影響(n=8,±s)
表1 頸痛寧丸對椎動脈型頸椎病家兔血清NO和血漿ET含量的影響(n=8,±s)
注:與模型組比較,*P <0.05,**P<0.01。
組別 NO濃度(μmol/L) ET含量(ng/L)空白對照組 21.77±2.16** 38.66±4.34**模型對照組 16.48 ±1.72 46.05 ±1.90高劑量組 20.67±1.88** 40.54±3.82**中劑量組 19.05 ±2.00* 42.37 ±2.74*低劑量組 17.21 ±2.01 43.68 ±4.69陽性對照組 19.93 ±2.91* 41.74 ±4.77*
由表1可知,給藥后,各給藥組與模型組相比,頸痛寧丸高劑量組血清中NO濃度顯著升高(P<0.01),血漿ET含量顯著降低(P<0.01);頸痛寧丸中劑量組血清NO濃度亦明顯升高(P<0.05);血漿ET含量亦明顯降低(P<0.05),頸痛寧丸低劑量組均無統(tǒng)計學(xué)差異。
NO、ET為內(nèi)皮源性血管活性因子。在某些病理情況下,機體受損,發(fā)生內(nèi)皮功能障礙時,表現(xiàn)為NO減少或活性降低,而ET釋放增加等。本實驗通過觀察頸痛寧丸對模型組血漿ET和血清NO的影響,提示頸痛寧丸可能有改善椎動脈供血、清除自由基、調(diào)整內(nèi)皮細胞功能的作用,從而為探討頸痛寧丸治療椎動脈型頸椎病的作用機制奠定基礎(chǔ)。
[1] 范榮.中藥治療椎動脈型頸椎病的研究進展和作用機理[J].中醫(yī)藥導(dǎo)報,2009,15(7):98 -99.
[2] 李丹牧.天麻鉤藤飲治療椎動脈型頸椎病33例[J].中醫(yī)藥學(xué)報,2008,36(3):57 -58.
[3] 王歡,王海義,史鐵梅,等.椎動脈型頸椎病新的診斷標準[J].中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,1994,23(增刊):100.