王祥麒，司瑞超

(1.河南中醫(yī)學院第三附屬醫(yī)院，河南 鄭州 450008;2.河南中醫(yī)學院，河南 鄭州 450008)

ITP是一種自身免疫性疾病，其具體發(fā)病機理目前并不完全清楚，研究及臨床觀察表明，其主要起病因素是免疫功能紊亂，其中CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細胞與其發(fā)病密切相關。中醫(yī)學將其歸屬于“血證”、“發(fā)斑”、“葡萄疫”、“肌衄”、“虛勞”等范疇。我們于2009年8月～2010年8月，運用兩種方法分別治療32例ITP患者，并觀察臨床療效、外周血中CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細胞比例等情況，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

64例病例均來自河南中醫(yī)學院三附院血液病住院部及門診的ITP患者，符合ITP的診斷標準［1］。其中住院病人12例，門診病人52例;男性20例，女性44例;年齡10～60歲，中位年齡32歲;病程7月～11年，平均病程42.1月。兩組患者在性別、年齡、病情、病程方面均無顯著性差異(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 治療方法

治療組口服仙連顆粒(河南中醫(yī)學院第三附屬醫(yī)院提供)，每日1劑，分早晚兩次沖服;對照組口服強的松片(1mg/kg)，分2次口服，待血小板恢復正常后，每兩周減5mg，減至維持量5～10mg/d。2個月為1個療程，2個療程后判定療效。

1.3 觀察指標

兩組患者的臨床療效;治療前后血小板計數(shù)的變化:采用F－800血細胞計數(shù)儀;外周血CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細胞水平變化:采用FAC Scan流式細胞儀(購自美國BECTON DICKINSON公司)，LD5－2A型醫(yī)用離心機(購自北京離心機廠)，鼠抗人CD4－FITC單克隆抗體，CD25－PE單抗及同型對照鼠IgG1－FITC、IgG1－PE，流式細胞檢測試劑(深圳晶美生物工程有限公司)。

1.4 療效判定標準［1］

兩組患者的療效判定標準參照第二屆全國血液學學會擬定的ITP療效標準草案。

1.5 統(tǒng)計學處理

數(shù)據(jù)采用計算機SPSS 17.0統(tǒng)計分析軟件處理，計數(shù)資料采用χ2檢驗;計量資料采用t檢驗，等級資料采用Ridit分析。

2 結(jié)果

2.1 兩組臨床療效比較 見表1。

表1 兩組ITP患者臨床療效比較 ［n(%)］

經(jīng)Ridit方法分析，治療組與對照組比較，治療組療效明顯優(yōu)于對照組(P＜0.01)。

2.2 兩組患者治療前、后血小板計數(shù)的比較 見表2。

表2 治療前、后PLT計數(shù)的比較(±s，n=32)

表2 治療前、后PLT計數(shù)的比較(±s，n=32)

注:治療前、后比較，■P ＜0.01;組間比較，△P ＞0.05，★P ＜0.01;與第1療程相比較，#P＜0.01。

組別 療前PLT(×109)1療程PLT(×109)2療程PLT(×109)治療組 27.09 ±8.32△ 68.53 ±16.38■△ 86.91 ±30.73■★#對照組 26.22 ±9.75 69.97 ±27.71■ 41.81 ±22.65■#

2.3 兩組患者治療前后外周血CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細胞比例的比較 見表3。

表3 兩組療前、后CD4+、CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細胞比例的比較(±s)

表3 兩組療前、后CD4+、CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細胞比例的比較(±s)

注:與治療前相比，■P＜0.01，*P＜0.05;治療組與對照組組間比較，□P ＜0.05，△P＞0.05。

組別 n CD4+T/淋巴細胞 CD4+CD25+Treg/CD4+T治療組 32 療前 17.97±7.21△ 1.78±1.28△療后 27.37±5.34■□ 4.93 ±2.48■□對照組 32 療前 17.54±4.91 1.87±0.94療后 24.96 ±1.35* 3.95 ±1.51*

治療前兩組患者的外周血中CD4+、CD4+CD25+T細胞無顯著性差異(P＞0.05)，具有可比性。經(jīng)過2個療程治療后，與治療前相比，兩組各項指標均有所提高。其中治療組CD4+、CD4+CD25+T細胞比例與治療前比有非常顯著性差異(P＜0.01)，而對照組治療前、后比較有顯著性差異(P＜0.05)，兩組治療后CD4+、CD4+CD25+T細胞比較，具有顯著性差異(P＜0.05)。

3 討論

ITP是一種因血小板免疫性破壞，導致外周血中血小板減少的出血性疾病。它以廣泛皮膚粘膜及內(nèi)臟出血、血小板減少、骨髓巨核細胞發(fā)育成熟障礙、血小板生存時間縮短及抗血小板自身抗體出現(xiàn)等為特征［2］。經(jīng)過多年的臨床觀察與研究，我們認為，ITP的病因病機在臨床上表現(xiàn)為“伏熱傷氣擾血，出血與瘀血并存”，其共同的病理變化可歸為熱、虛、瘀三個方面，為此我們研制對ITP各種證型都有一定療效的中藥復方制劑—仙連顆粒。本方由仙鶴草、連翹、生地黃、雞血藤、三七粉、茜草、石上柏、牡丹皮等藥物組成，其中仙鶴草具有收斂止血、補虛、止痢等功效;連翹能清熱解毒，消癰散結(jié)，透熱轉(zhuǎn)氣，長于清心火而散上焦風熱;生地黃具有清熱涼血，養(yǎng)陰生津的作用，三藥合用協(xié)同起到滋陰清熱、涼血止血之效，共為君藥。雞血藤行血補血;茜草與三七粉共用止血活血，止血而不留瘀;石上柏清熱解毒;牡丹皮清熱涼血，活血散瘀，清透陰分伏熱。諸藥合用共奏清熱止血，益氣散瘀之功。仙連顆粒所含諸藥從現(xiàn)代藥理研究的角度來看，具有減少血小板破壞、促進血小板生成、降低毛細血管通透性、調(diào)節(jié)免疫等作用。本研究提示，仙連顆粒治療ITP在臨床上取得了很好的療效，其總有效率達到87.5%，明顯優(yōu)于強的松，而且該藥沒有明顯的副作用;且在改善臨床癥狀，提升血小板計數(shù)，提高外周血CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細胞比例，恢復細胞免疫功能等方面均優(yōu)于強的松。ITP時患者的CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細胞比例減少對機體自身反應性T細胞的抑制作用減弱，外周血自身反應性T細胞被活化，而激活的CD4+T細胞可分泌IL－2、IFN－γ等細胞因子活化CD8+T細胞、巨噬細胞，吞噬殺傷血小板，也可輔助B細胞活化增殖產(chǎn)生抗血小板的相關抗體，進而通過補體系統(tǒng)或調(diào)理吞噬作用破壞血小板。仙連顆粒正是通過升高CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細胞比例，進而抑制自身反應性T細胞，而達到治療ITP的目的。

［1］ 張之南.血液病診斷及療效標準［S］.2版.北京:科學技術出版社，1998:279 －281.

［2］ 李海昌，溫成平，謝志軍，等.特發(fā)性血小板減少性紫癜激素治療不同階段證型特點的研究［J］.中醫(yī)藥學報，2009，37(6):59 －61.