葉建美
(湖北省農(nóng)科院經(jīng)濟(jì)作物研究所 武漢 430070)
家蠶細(xì)菌病防治藥劑 煙酸諾氟沙星粉(蠶用)是由湖北省農(nóng)科院經(jīng)濟(jì)作物研究所2000年研制成功的一種新藥,當(dāng)時(shí)取名為“蠶病靈”,2007年經(jīng)農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)同意地方標(biāo)準(zhǔn)上升為國家標(biāo)準(zhǔn),2008年1月8日農(nóng)業(yè)部獸藥產(chǎn)品批準(zhǔn)文號批件批復(fù),獸藥通用名為:煙酸諾氟沙星粉(蠶用),商品名改為:蠶寧。批準(zhǔn)文號為:獸藥字(2008)170359835,含量規(guī)格為每小包5g:0.25g,5小包為1大袋。由湖北農(nóng)科生物化學(xué)有限公司生產(chǎn)與銷售。
1.1.1試驗(yàn)動物
蠶品種為春蕾×鎮(zhèn)珠,由湖北省農(nóng)科院經(jīng)濟(jì)作物研究所蠶桑研究室提供。在常規(guī)條件下飼養(yǎng)至5齡起蠶時(shí)進(jìn)行試驗(yàn),接種后試驗(yàn)蠶在24~25℃的溫度下飼養(yǎng)。
1.1.2菌懸液的制備與接種
試驗(yàn)菌種為黑胸?cái)⊙【?Bacillus sp.)和黏質(zhì)沙雷氏菌(Serratia marcescens Bizio),均為湖北省農(nóng)科院經(jīng)濟(jì)作物研究所提供。試驗(yàn)前將以上菌種接種于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)72h,試驗(yàn)時(shí),將10 ml無菌水加入新鮮斜面培養(yǎng)試管中,用毛細(xì)吸管將細(xì)菌培養(yǎng)物輕輕吹吸下來后,經(jīng)充分振動,使菌體完全分散,用細(xì)菌濃度比濁測定法粗測含菌濃度,然后用無菌水調(diào)成含菌約108~109個(gè)/ml的菌懸液。用經(jīng)酒精燈火焰滅菌的接種針蘸取少量菌液給5齡起蠶進(jìn)行體表下穿刺接種。
1.1.3試驗(yàn)組的設(shè)計(jì)
受試藥物“蠶寧”由湖北農(nóng)科生物化學(xué)有限公司提供,生產(chǎn)批號:20090202。規(guī)格:5g:煙酸諾氟沙星250mg。
推薦劑量為500 mg/l,根據(jù)臨床檢驗(yàn)劑量設(shè)計(jì)的原則,在推薦劑量上、下各增加1個(gè)劑量進(jìn)行試驗(yàn)。設(shè)高、中、低劑量:250mg/l、500 mg/l和 1 000 mg/l三個(gè)劑量組,同時(shí)設(shè)陽性對照組和陰性對照組,陽性對照組即感染不給藥組,陰性對照組即不感染不給藥組。每組50頭蠶,重復(fù)3區(qū)。
1.1.4給藥方法
將“蠶寧”用蒸餾水配成250mg/l、500mg/l和1 000 mg/l三種濃度的藥液,然后用噴霧器均勻地噴在桑葉上,以正反面濕潤為宜,稍干后喂蠶。從接種結(jié)束后開始喂藥葉,第1天內(nèi)24h全部喂藥葉,第2、3天分別喂藥葉6h。
1.1.5發(fā)病調(diào)查
根據(jù)試驗(yàn)蠶發(fā)病死亡的癥狀進(jìn)行調(diào)查。即:黑胸?cái)⊙⌒Q剛死不久胸部變黑,繼后擴(kuò)展到全身;靈菌敗血病死后不久全身發(fā)紅。陽性對照組調(diào)查統(tǒng)計(jì)72h內(nèi)的發(fā)病死亡率,給藥處理組除了調(diào)查給藥期間的發(fā)病個(gè)體數(shù)外,給藥結(jié)束后繼續(xù)飼養(yǎng)48h調(diào)查發(fā)病死亡蠶個(gè)數(shù),合計(jì)總的發(fā)病數(shù),計(jì)算發(fā)病死亡率。
1.1.6治療有效率的計(jì)算
試驗(yàn)重復(fù)3次,統(tǒng)計(jì)平均有效率。a為陽性對照組發(fā)病死亡率;b為藥物試驗(yàn)組發(fā)病死亡率。
1.1.7結(jié)果判定
陽性對照組發(fā)病死亡率≥90.0%;以平均有效率≥95.0%判定該抗微生物藥物治療有效。
1.2.1 “蠶寧”對家蠶黑胸?cái)⊙〉姆乐涡Ч?/p>
經(jīng)過3次臨床試驗(yàn)(表1),“蠶寧”對家蠶黑胸?cái)⊙〉姆乐涡ЧS著劑量的增加其有效率也呈增加的趨勢,250mg/l、500 mg/l和 1 000 mg/l“蠶寧”溶液的平均有效率分別為93.61%、95.96%和96.80%。從3次試驗(yàn)結(jié)果看,500 mg/l和1 000 mg/l的每次有效率都在95%以上,而250mg/l的有效率每次都低于95%。因此,“蠶寧”對家蠶黑胸?cái)⊙∵_(dá)到有效治療作用的劑量在500mg/l以上。
表1 “蠶寧”對家蠶黑胸?cái)⊙〉姆乐涡Ч?2009年)
1.2.2 “蠶寧”對家蠶靈菌敗血病的防治效果
3次臨床試驗(yàn)結(jié)果顯示(表 2),250mg/l和500mg/l的“蠶寧”對家蠶靈菌敗血病無良好治療作用,1 000mg/l的平均有效率也僅有7.25%。另外,試驗(yàn)中觀察到,500mg/l和1 000mg/l的“蠶寧”給藥組蠶的發(fā)病死亡都發(fā)生在停藥后48h內(nèi),說明“蠶寧”對家蠶靈菌僅有一定的抑菌作用,不能完全殺滅蠶體內(nèi)的菌體,停藥后細(xì)菌大量繁殖導(dǎo)致蠶發(fā)病死亡。結(jié)果表明“蠶寧”不能有效地防治家蠶靈菌敗血病。
表2 “蠶寧”對家蠶靈菌敗血病的防治效果(2009年)
根據(jù)臨床試驗(yàn)結(jié)果表明,“蠶寧”能有效地防治家蠶黑胸?cái)⊙?,臨床使用推薦劑量為500mg/l。
給藥方法為:取本品一小包加少量約65℃熱水溶解后,再加清水至500ml,噴桑葉5kg,在4齡第3天、5齡第1天、第3天、上蔟前一天各用藥一次;當(dāng)發(fā)現(xiàn)病蠶時(shí),用兩小包溶于500ml清水中,第1天連續(xù)添食三次,每8h一次,以后每天一次,每次6h。因縮短給藥時(shí)間會影響防病效果,必須充分保證給藥的時(shí)間。
新蠶藥“蠶寧”自2001年投產(chǎn)以來,到2010年的10年中共推廣應(yīng)用到湖北、湖南、廣西、廣東、云南、四川、山東、安徽、重慶等9省市,共推廣應(yīng)用150多萬袋,平均每袋應(yīng)用到1張蠶種上,共應(yīng)用到150萬張蠶種,平均每張蠶種增產(chǎn)蠶繭2.4kg,累計(jì)增加蠶繭產(chǎn)量3 600t,增加產(chǎn)值6 660萬元,取得了較大的經(jīng)濟(jì)效益和社會效益。
新蠶藥“蠶寧”為可溶性粉劑,采用的配方解決了該抗生素在水中難以溶解和不穩(wěn)定的問題,為鋁鉑袋包裝,具有藥效穩(wěn)定、不吸潮、使用方便(1次1小包獨(dú)立包裝,5小包裝1袋)、有效期長(2年)和貯運(yùn)方便等特點(diǎn)。在蠶桑生產(chǎn)中的應(yīng)用量已越來越大,主要用于防治以芽孢桿菌為主所引起的家蠶黑胸?cái)⊙。瑢Σ《静∫灿幸欢ǖ囊种谱饔?。?shí)踐證明,在生產(chǎn)中添食“蠶寧”后,全繭量有所增加,秋蠶期尤為明顯,是目前替代蠶用氯霉素溶液的較佳產(chǎn)品。