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(1.浙江天利實(shí)業(yè)有限公司,浙江諸暨 311800;2.金華職業(yè)技術(shù)學(xué)院)
豬鏈球菌病是一種常見傳染病。該病發(fā)病急,病程短,死亡率高,尤以哺乳仔豬和剛斷奶仔豬為主,大豬則發(fā)病率較低。除可引起敗血癥、腦膜炎外,還可致關(guān)節(jié)炎,淋巴膿腫,皮炎等病癥,給養(yǎng)豬生產(chǎn)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失。由于豬鏈球菌有較多的血清型,疫苗防治不能取得滿意效果,用青霉素等常規(guī)抗生素治療效果不顯著。
有鑒于此,筆者在浙江某種豬有限公司收集各種豬鏈球菌病病原的基礎(chǔ)上通過藥敏試驗(yàn)測(cè)定其藥物敏感性,篩選出對(duì)目前發(fā)病菌株敏感的藥物,以期指導(dǎo)用藥,從而有效控制豬鏈球菌病。
據(jù)調(diào)查測(cè)定,該種豬有限公司種豬場(chǎng)、后備母豬、哺乳母豬、哺乳仔豬、保育舍仔豬和測(cè)定舍仔豬群中均有該病發(fā)生,豬場(chǎng)發(fā)病情況,詳見表1。
表1 豬場(chǎng)豬鏈球菌病的發(fā)病情況調(diào)查
該豬場(chǎng)曾先后多次從上述病例的肝臟、心血、胸腹腔滲出物、滲出性皮炎病豬病灶表皮刮取物中分離到疑似球菌。
2.1樣本采集 采集自懷孕母豬關(guān)節(jié)膿腫部膿液和豬心血。
2.2試劑及儀器 普通血平板、鏈球菌快速鑒定試條Rapid ID Strep,購(gòu)自生物梅里埃公司,藥敏紙片由杭州天和微生物試劑有限公司提供,ATP細(xì)菌鑒定儀為生物梅里埃公司產(chǎn)品。
2.3細(xì)菌分離培養(yǎng) 將病料標(biāo)本分離劃線接種于血平板上,37℃培養(yǎng)24 h。
2.4細(xì)菌鑒定
2.4.1形態(tài)學(xué)檢查 挑取血平板上可疑菌落,革蘭氏染色后鏡檢。鏡檢后疑似鏈球菌株再進(jìn)行純培養(yǎng)18~24 h。
2.4.2觸酶試驗(yàn) 用接種環(huán)取一環(huán)3%過氧化氫溶液于純凈的載玻片上,再用接種環(huán)或接種針蘸取待檢菌落涂于過氧化氫溶液中,若立即出現(xiàn)氣泡者為過氧化氫試驗(yàn)陽(yáng)性。
2.4.3Rapid ID STREP試條鏈球菌快速鑒定 革蘭氏染色和觸酶試驗(yàn)初步鑒定的疑似菌種接種于Rapid ID STREP,37℃培養(yǎng)4 h后分別加入VPA,VPB,FB和NIN試劑,立即在ATB細(xì)菌鑒定儀上讀取結(jié)果。
2.5藥敏試驗(yàn) 將豬鏈球菌株制成1×10/mL菌懸液,用滅菌棉簽均勻涂布于血平板上,采用K-B紙片法進(jìn)行藥敏試驗(yàn),用消毒眼科小鑷子正確貼放藥敏紙片,每塊平板貼6片。
3.1細(xì)菌鑒定 所有病料經(jīng)革蘭氏染色后分離出疑似菌落66例,血平板上疑似菌落較小,凸起,灰白色,較干燥,光滑,邊緣整齊,周圍有透明溶血環(huán)。鏡檢呈單個(gè),雙鏈或短鏈狀排列的革蘭氏陽(yáng)性球菌。
3.2觸酶試驗(yàn) 詳見表2。
表2 觸酶試驗(yàn)結(jié)果
其中1、2、3號(hào)病料為懷孕母豬膿腫液,4、5號(hào)為測(cè)定舍豬心血。
經(jīng)純培養(yǎng)后的細(xì)菌觸酶試驗(yàn)結(jié)果與表2相同。
3.3ATB鑒定 詳見表3。
3.4藥敏試驗(yàn) 詳見表4。
由表4可見,豬鏈球菌分離菌株對(duì)先鋒九號(hào)、氟苯尼考、先鋒五號(hào)敏感(抑菌圈直徑>30 mm);卡那霉素、復(fù)方新霉素、鏈霉素耐藥(抑菌圈直徑為0 mm);克林霉素、環(huán)丙沙星、恩諾沙星、硫酸阿米卡星、氨芐青霉素、痢菌凈中敏(抑菌圈直徑11~25 mm)。
表3 ATB鑒定結(jié)果
表4 豬鏈球菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果
4.1本次所采集到的病例,以革蘭氏陽(yáng)性球菌為主,結(jié)合以往臨床病例中多次分離到類似球菌,特別是從胸膜炎、腹膜炎病例中分離到本菌,表明鏈球菌污染在該場(chǎng)仍然比較嚴(yán)重。該場(chǎng)是2002年底投入生產(chǎn)運(yùn)行的一家新豬場(chǎng),且采用離地飼養(yǎng)和平養(yǎng)方式,衛(wèi)生條件相對(duì)較好,但仍存在感染鏈球菌問題,必須引起重視,應(yīng)將本病防治列入常規(guī)防疫日程。
4.2據(jù)調(diào)查,該場(chǎng)自建場(chǎng)以來(lái),一直未曾采用豬鏈球菌疫苗免疫注射,雖然該場(chǎng)對(duì)豬舍地面、欄舍采用燒堿和氯制劑交替使用消毒,平時(shí)帶豬消毒一直采用有機(jī)氯制劑,比較單一,豬只體表污染的病原菌得不到有效清除;且生產(chǎn)操作中還不能按照全進(jìn)全出要求進(jìn)行,各批仔豬之間相互交叉接觸感染情況不能避免。
4.3從藥敏試驗(yàn)結(jié)果看,該場(chǎng)菌株對(duì)先鋒九號(hào)、氟苯尼考和先鋒五號(hào)敏感,對(duì)卡那霉素、鏈霉素、復(fù)方新霉素耐藥,對(duì)硫酸阿米卡星、恩諾沙星、環(huán)丙沙星、克林霉素、氨芐青霉素、痢菌凈中敏。說(shuō)明本菌較易產(chǎn)生耐藥性,在臨床用藥時(shí)應(yīng)該定期進(jìn)行細(xì)菌分離及藥敏試驗(yàn),針對(duì)性地選用藥物,以提高療效。
4.4據(jù)生產(chǎn)實(shí)踐,仔豬斷奶后可在日糧中添加藥物進(jìn)行預(yù)防,如每t飼料中添加強(qiáng)力霉素150 g和阿莫西林200 g,或四環(huán)素125 g,連續(xù)飼喂14 d,可有效預(yù)防本病的發(fā)生。
4.5應(yīng)激因素對(duì)豬鏈球菌病的發(fā)生有非常重大的影響,本病常在環(huán)境、飼料等突然改變或運(yùn)輸混群后發(fā)生。因此,加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,創(chuàng)造有利于豬體健康生長(zhǎng)的環(huán)境衛(wèi)生條件至關(guān)重要。
4.6豬鏈球菌病有較多血清型,不同豬場(chǎng)發(fā)生豬鏈球菌病的血清型可能不同,病豬的臨床癥狀和病理變化也不完全相同,對(duì)藥物的敏感性可能也有差異。即使同一個(gè)血清型,在不同豬場(chǎng)或在同一個(gè)豬場(chǎng)不同時(shí)期、豬只不同生長(zhǎng)階段,對(duì)藥物的敏感性也可能不一樣。因此,在進(jìn)行藥物防治前,必須進(jìn)行藥敏試驗(yàn),選擇高敏藥物和適當(dāng)劑量,以提高治療效果,防止不良反應(yīng)。
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