旋毛蟲病(trichinellosis)是一種嚴(yán)重的人獸共患寄生蟲病,人體感染旋毛蟲主要因生食或半生食含有幼蟲囊包的豬肉及其肉制品所致。我國(guó)除海南省以外的其他省、市、自治區(qū)均有動(dòng)物或人感染旋毛蟲病的報(bào)道[1-2]。據(jù)2001—2004年全國(guó)人體重要寄生蟲病現(xiàn)狀調(diào)查,我國(guó)10個(gè)省(市、區(qū))的人群旋毛蟲血清抗體陽(yáng)性率為3.31%[3],估計(jì)我國(guó)人體旋毛蟲感染者達(dá)4 000多萬(wàn)。河南省為我國(guó)旋毛蟲病的高發(fā)區(qū),1984-2004年曾發(fā)生16次人體旋毛蟲病暴發(fā)[4-5],但河南省東部的商丘地區(qū)尚無(wú)旋毛蟲病的報(bào)道。鑒于此,筆者在2010-2011年對(duì)河南商丘地區(qū)農(nóng)村屠宰生豬的旋毛蟲感染情況進(jìn)行了調(diào)查。

1 材料與方法

1.1 調(diào)查現(xiàn)場(chǎng)與肉樣采集 分別于2010、2011年農(nóng)歷春節(jié)前夕隨機(jī)選取河南省商丘某縣農(nóng)村的3個(gè)生豬屠宰點(diǎn)作為調(diào)查現(xiàn)場(chǎng),從每頭屠宰豬的膈肌角采集50g左右的肌肉樣本,并記錄生豬來(lái)源及飼養(yǎng)方式。

1.2 檢驗(yàn)方法

1.2.1 直接壓片鏡檢法 將肉樣逐一編號(hào),從不同部位隨機(jī)剪取米粒大小的肉樣24個(gè),用2張載玻片將肉樣壓薄至透過(guò)它能看到報(bào)紙上的字為準(zhǔn),并用濕棉線在載玻片兩端固定,光鏡下低倍鏡(×40)觀察。為提高工作效率,每2張載玻片間同時(shí)放置5個(gè)肉樣。

1.2.2 人工消化法 對(duì)所有肉樣進(jìn)行人工消化法檢查。分別從每份膈肌的不同部位剪取5g肉樣,每8份肉樣混合后為1份混合樣本(總重量40g)。將混合樣本分別置于攪拌器攪碎后,按1g肌肉：20mL人工消化液[0.7%鹽酸-1%胃蛋白酶(活性1∶3 000)-0.85%NaCl置于42℃消化4h～5h,肌肉消化完全后收集于錐形量杯中室溫沉淀30min,棄去上清,鏡檢并計(jì)數(shù)底部液體中的旋毛蟲幼蟲[6]。若在某份混合樣本中發(fā)現(xiàn)幼蟲,則按編號(hào)對(duì)8份肉樣逐個(gè)消化檢查。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用預(yù)測(cè)統(tǒng)計(jì)分析軟件包PASW Statistics 18.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行描述性分析,應(yīng)用卡方檢驗(yàn)(Chi-square test)進(jìn)行率之間的比較,檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05。

2 結(jié) 果

本次調(diào)查在河南省商丘某縣采集的273份豬肉樣本,全部來(lái)自農(nóng)村的圈養(yǎng)豬。對(duì)273份肌肉樣本應(yīng)用壓片鏡檢法檢驗(yàn)時(shí)未發(fā)現(xiàn)旋毛蟲幼蟲;應(yīng)用人工消化法檢驗(yàn)時(shí),旋毛蟲幼蟲的檢出率為 3.30%(9/273),消化法的檢出率明顯高于鏡檢法(χ2=7.230,P＜0.05)。消化法對(duì)3個(gè)采樣點(diǎn)肉樣的旋毛蟲檢出率分別為7.96%(9/113)、0(0/73)和0(0/87);消化法檢出的陽(yáng)性肉樣每g肌肉蟲荷(larvae per gram,lpg)為0.10～ 1.58,平均 lpg 為 0.48,見表1。

表1 2010-2011年河南商丘某縣豬膈肌的旋毛蟲感染度

3 討 論

本次調(diào)查結(jié)果表明,河南省商丘地區(qū)存在有豬的旋毛蟲自然感染,感染率為3.3%,但感染度較低,平均lpg為0.48,已低于旋毛蟲對(duì)公共衛(wèi)生構(gòu)成威脅的最低水平(lpg≥1)[7]。另?yè)?jù)河南省人群旋毛蟲病血清學(xué)流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果,河南省東部地區(qū)人體血清旋毛蟲抗體陽(yáng)性率為2.5%～4.9%[3,8],但在河南東部地區(qū)(商丘、開封、周口等)一直未發(fā)現(xiàn)旋毛蟲病患者,也未發(fā)生旋毛蟲病的暴發(fā),可能與當(dāng)?shù)刎i的旋毛蟲感染度低有關(guān)。河南省東部為平原地區(qū),農(nóng)民飼養(yǎng)生豬均為圈養(yǎng),加上顆粒食料的應(yīng)用與飼養(yǎng)周期的縮短,可能是當(dāng)?shù)刎i旋毛蟲感染度低的主要原因[9]。

肌肉壓片鏡檢法是我國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)(GB/T18642-2000)中規(guī)定的豬肉中旋毛蟲的檢驗(yàn)方法[10],該方法是檢驗(yàn)肉類中旋毛蟲的經(jīng)典方法,由于操作簡(jiǎn)便,在國(guó)內(nèi)生豬屠宰場(chǎng)與肉類檢疫機(jī)構(gòu)普遍應(yīng)用,但其敏感性較低,尤其是在感染度低時(shí)常有漏檢現(xiàn)象發(fā)生,如每克豬肉含有6條或6條以下幼蟲時(shí)漏檢率達(dá)52%[11]。本研究結(jié)果表明,每克豬肉含0.10～

1.58條幼蟲時(shí)鏡檢法的漏檢率達(dá)100%(9/9),其中2份肉樣的lpg(1.06與1.58)已高于旋毛蟲對(duì)公共衛(wèi)生構(gòu)成威脅的最低水平,因此,鏡檢法陰性的豬肉亦有可能導(dǎo)致旋毛蟲病的暴發(fā)。人工消化法是國(guó)際旋毛蟲病委員會(huì)(International Commission on Trichinellosis,ICT)推薦使用的肉類旋毛蟲檢驗(yàn)方法,特別是對(duì)消化法進(jìn)行改良后,每克肉樣含0.10～1條幼蟲時(shí)消化法的敏感性也可達(dá)100%[6,12]。因此,在旋毛蟲病低度流行區(qū),應(yīng)推廣使用消化法對(duì)肉類進(jìn)行旋毛蟲檢驗(yàn),以保證肉類及肉類食品的安全。

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