羅小兵，尤舉銘（.廣州市番禺區(qū)第二人民醫(yī)院檢驗科 5470；.陜西省漢中市中心醫(yī)院檢驗科 73000）

UF－1000i尿沉渣分析儀是目前常用于尿液有形成分篩查的自動化分析儀，該儀器具有檢測快速、敏感度高、精密度好等優(yōu)點。但有文獻報道，大量酵母菌可引起儀器紅細胞計數(shù)的假性增高［1］。為準確了解該儀器對酵母樣真菌的檢出濃度與產(chǎn)生干擾濃度以及兩者間的關系，作者進行了相關分析，以期為儀器的全面評價和結(jié)果正確判斷提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 UF－1000i尿沉渣分析儀及配套試劑，質(zhì)控物均購自日本Sysmex株式會社。10μL定量接種環(huán)購自法國生物梅里埃公司。

1.2 方法

1.2.1 菌懸液制備及實驗分組 實驗分為生理鹽水（對照）組、白色念珠菌懸液組、含血細胞生理鹽水組（血細胞對照組）和含血細胞白色念珠菌菌懸液組。白色念珠菌來自本科細菌室（分離自尿液標本），用無菌生理鹽水將其制成103、104、105、106、107／mL不同濃度菌懸液組，每個濃度設3個平行樣本，濃度確定采用顯微鏡計數(shù)結(jié)合平板計數(shù)法。然后再取一定體積的5種菌懸液分別加入已知濃度的紅細胞（RBC）和白細胞（WBC），制成含血細胞的菌懸液組。

1.2.2 檢測方法 UF－1000i尿沉渣分析儀按儀器操作規(guī)程進行操作，先測定質(zhì)控品，質(zhì)控合格后再進行樣本測定。每個濃度的菌懸液及生理鹽水對照組均交替平行測定5次后，再同樣方法測定含血細胞的菌懸液及生理鹽水（血細胞對照組），所有測定于3 h之內(nèi)完成，然后記錄、統(tǒng)計分析結(jié)果。

1.3 統(tǒng)計學處理 用于分析統(tǒng)計的軟件為SigmaState，實驗數(shù)據(jù)以表示，統(tǒng)計分析采用單因素方差分析（ANOVA），實驗組與對照組的比較采用最小顯著差法（LSD），實驗組間的比較采用q檢驗（Newman－keuls test），P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1 不同濃度菌懸液時紅細胞、白細胞和酵母菌的儀器計數(shù)結(jié)果（表1）。

2.2 不同濃度菌懸液中加入定量的血細胞后3項指標的儀器計數(shù)結(jié)果（表2）。由表1、表2的結(jié)果可以看出：當白色念珠菌的菌懸液濃度小于105／mL時，儀器對其不能檢出，亦沒有引起紅細胞和白細胞計數(shù)的差異。但當濃度達到105／mL時，在其被檢出的同時也造成了紅細胞計數(shù)的明顯差異（P＜0.05），而且這種差異程度隨著濃度的增加而增加。當其濃度達到107／mL，白細胞計數(shù)結(jié)果也明顯高于含血細胞生理鹽水組（P＜0.05）。

表1 不同濃度菌懸液3項指標的儀器測定結(jié)果（，n＝15，個／微升）

表1 不同濃度菌懸液3項指標的儀器測定結(jié)果（，n＝15，個／微升）

注：與生理鹽水組比較，a P＞0.05，b P＜0.05。

0 2±1 0 103／mL組 0 2±2a 0 104／mL組 0 3±2a 0 105／mL組 34±4b 39±6b 2±2ab 106／mL組 256±36b 407±49b 3±2ab 107／mL組 2 953±87b 3 872±92b 16±5b P＜0.01 ＜0.01 ＜組別 酵母菌 紅細胞 白細胞生理鹽水組0.01

表2 含血細胞菌懸液3項指標的儀器測定結(jié)果（，n＝15，個／微升）

表2 含血細胞菌懸液3項指標的儀器測定結(jié)果（，n＝15，個／微升）

注：與血細胞對照組比較，a P＞0.05；與血細胞對照組比較，b P＜0.05。

22±3 8±3 103／mL組 0 23±5a 9±3a 104／mL組 0 25±6a 10±4a 105／mL組 48±10b 45±8b 9±5a 106／mL組 387±28b 307±59b 11±3a 107／mL組 3 765±71b 2 102±112b 28±6b P＜0.01 ＜0.01 ＜組別 酵母菌 紅細胞 白細胞含血細胞生理鹽水組 0 0.01

3 討 論

UF－1000i全自動尿沉渣分析儀采用流式細胞及電阻抗的原理，通過檢測經(jīng)熒光染色后的單個細胞的熒光強度、散射光強度及電阻抗的大小來識別尿內(nèi)細胞、管型、結(jié)晶等各種有形成分。近年來，關于酵母樣真菌引起其紅細胞計數(shù)假性增高的報道日漸增多［2-4］。這些報道較好分析了酵母樣真菌干擾細胞計數(shù)的大體情況和導致干擾的原因，但都沒有指出產(chǎn)生干擾的具體濃度和相應的檢出濃度，以及二者存在何種關系?；诖它c，作者用臨床最常見的酵母樣真菌（白色念珠菌）進行了儀器的檢出及抗干擾濃度分析，以期為儀器的合理、客觀評價和臨床結(jié)果判斷提供一定依據(jù)。

結(jié)果顯示，UF－1000i尿沉渣分析儀檢測白色念珠菌時，檢出濃度和產(chǎn)生干擾濃度均是105／mL，說明儀器檢測白色念珠菌可能存在“只要檢出即有干擾”現(xiàn)象。因此，使用該儀器檢測到酵母菌時，應當考慮到紅細胞計數(shù)的假性增高。同時，在檢測其他體液標本比如腦脊液中酵母樣真菌（如新型隱球菌）時，還應注意檢出的濃度下限，當檢出結(jié)果為陰性時不能排除感染。結(jié)果還顯示，紅細胞的假性增高隨著白色念珠菌的濃度增加而加劇，這與有關報道一致［5］。一些報道指出，儀器的部分熒光參數(shù)有助于鑒別紅細胞與細菌或酵母菌［6-7］。作者對此也進行了初步試驗，發(fā)現(xiàn)酵母菌存在時，儀器的前向散射光強度（S－FSC）、側(cè)向散射光強度（S－SSC）及熒光強度（S－FLH 和 SFLL）均明顯高于單純血細胞組（P＜0.01，數(shù)據(jù)未列出）。應當注意的是，本研究樣本量有限，標本也與臨床標本有所不同，還需要更多的臨床數(shù)據(jù)來支持與驗證。

此外，還發(fā)現(xiàn)當白色念珠菌的濃度達到107／mL時，亦會引起儀器白細胞計數(shù)的假性增高。這可能與白色念珠菌濃度較大時，因其本身含有的大量細胞核及孢子等物質(zhì)，導致熒光信號與白細胞重疊或類似有關［5］。這也提示，儀器測定白細胞時還應鑒別大量酵母菌的干擾。作者發(fā)現(xiàn)白色念珠菌的菌體大小和連體孢子的數(shù)量及大小、菌體內(nèi)是否有細胞核等都會影響儀器的3項指標的計數(shù)結(jié)果。通常情況下，菌體較小、連體孢子多及無細胞核時更易干擾紅細胞計數(shù)；反之，對白細胞的干擾作用有所增加。還有，由于作者使用的溶劑不是尿液，也可能對計數(shù)結(jié)果造成一定影響，但作者認為不會影響到結(jié)果的統(tǒng)計學意義。

綜上所述，UF－1000i尿沉渣分析儀檢測酵母樣真菌時，應當注意“檢出即有干擾”的現(xiàn)象，當顯示檢出酵母菌時，應考慮紅細胞和白細胞存在假性增高。

［1］馬鄭輝.UF－100全自動尿沉渣分析儀各檢測項目假陽性結(jié)果的分析［J］.臨床檢驗雜志，2004，22（1）：67.

［2］劉景瑤，孟冬梅，趙冬梅，等.Sysmex UF－100全自動尿沉渣分析儀在臨床檢測中的應用［J］.中國誤診學雜志，2009，9（10）：2356－2357.

［3］陳忠，鄒曉月，袁立新.UF－100尿沉渣分析儀和干化學檢測尿中紅細胞和白細胞及管型的干擾因素分析［J］.中國實驗診斷學，2008，12（4）：534－537.

［4］毛菊珍，顧國浩，豐斌，等.iQ200全自動尿沉渣分析儀假陽性圖像的影響因素探討［J］.臨床檢驗雜志，2006，24（5）：397－398.

［5］馬麗，袁漢堯，王小梅.酵母菌對UF－100全自動尿沉渣分析儀紅細胞檢測結(jié)果的影響［J］.上海醫(yī)學檢驗雜志，2001，16（3）：161－162.

［6］馬駿龍，叢玉隆.細菌對尿液分析儀測定尿紅細胞的影響［J］.中華醫(yī)學檢驗雜志，1999，22（4）：205.

［7］邱方城，秦維超，李雅嫦，等.Sysmex UF－100全自動尿沉渣分析儀檢測尿紅細胞影響因素分析［J］.臨床檢驗雜志，2006，24（6）：472.