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米醋抑菌作用的實(shí)驗(yàn)研究

2012-01-11 06:45何曉燕聶鑫鑫宮汝淳苗婷婷
關(guān)鍵詞:米醋金黃色酵母菌

何曉燕,聶鑫鑫,宮汝淳,苗婷婷

(通化師范學(xué)院 生命科學(xué)學(xué)院,吉林 通化134002)

米醋是我國(guó)四大名醋之一,它不僅是人們經(jīng)常食用的一種調(diào)味品,而且還是中外傳統(tǒng)的養(yǎng)顏、健膚、美容的保健品,其物美、價(jià)廉、有效且無副作用[1].《本草綱目》中記載醋能“消痛腫、散水氣、殺邪毒、理諸藥”[2-3].據(jù)資料報(bào)道,米醋中含有醋酸、乳酸、氨基酸、甘油和醛類化合物,故對(duì)人的皮膚有柔和的刺激作用,能使?fàn)I養(yǎng)供應(yīng)充足、皮膚豐潤(rùn)飽滿[4];同時(shí)醋能改善血液的流變性,具有很好的調(diào)節(jié)功能[5-6];另外醋還能止癢,減輕炎性滲出浸潤(rùn),從而使表皮的角質(zhì)層恢復(fù)正常[7].雖然對(duì)米醋的研究已有很多報(bào)道,但對(duì)米醋的抑菌作用尚未見試驗(yàn)報(bào)道.人類皮膚上的菌叢有固有性和暫時(shí)性兩大類,菌的種類達(dá)200余種.本實(shí)驗(yàn)通過觀察不同濃度米醋對(duì)枯草桿菌、金黃色葡萄球菌和酵母菌的抑制作用,以期為保健醋開發(fā)提供一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù).

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)菌種

枯草桿菌(Bacillussubtilis),金黃色葡萄球菌(Staphyloccocusaureus),酵母菌(Yeast),以上菌種購(gòu)于中國(guó)工業(yè)微生物菌種保藏管理中心.

1.2 實(shí)驗(yàn)藥品

米醋,總酸含量9g/100mL,批號(hào)20110311,通化市祥源調(diào)味食品廠生產(chǎn);牛肉膏,批號(hào)941208,北京市海淀區(qū)微生物培養(yǎng)基制品廠生產(chǎn);葡萄糖,批號(hào)20100110,天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn);蛋白胨,批號(hào)20101002,北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司生產(chǎn);瓊脂粉,批號(hào)20090802,北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司生產(chǎn);浴鹽,批號(hào)20100803,韓國(guó)蘭蔻伊人化妝品(國(guó)際有限公司)生產(chǎn).

1.3 實(shí)驗(yàn)儀器

生化培養(yǎng)箱:型號(hào)HPS-280,哈爾濱市東聯(lián)電子技術(shù)開發(fā)有限公司;精密電子天平:型號(hào)JA2003SHP07003,上海恒平科學(xué)儀器有限公司;高壓濕熱滅菌鍋:型號(hào)CN61M,西安醫(yī)療器械廠;雙人水平超凈工作臺(tái):型號(hào)HD-1360,北京東聯(lián)哈爾儀器制造有限公司.

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 培養(yǎng)基的制備及滅菌

牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基:牛肉膏3g,蛋白胨10g,NaCl5g,瓊脂粉15~20g,水1000ml,pH:7.4~7.6.PDA培養(yǎng)基:馬鈴薯200g,葡萄糖20g,瓊脂15g,蒸餾水1000ml,自然pH值[8].將實(shí)驗(yàn)器材和培養(yǎng)基用高壓濕熱滅菌鍋滅菌.

2.2 菌種活化

用接菌環(huán)將實(shí)驗(yàn)室中的枯草桿菌、金黃色葡萄球菌接種在牛肉膏蛋白胨斜面培養(yǎng)基,酵母菌接種在PDA斜面培養(yǎng)基進(jìn)行活化,枯草桿菌和金黃色葡萄球菌于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h,酵母菌于28℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h.

2.3 菌懸液的制備

取經(jīng)培養(yǎng)的枯草桿菌、金黃色葡萄球菌、酵母菌各2mL加20ml無菌水混勻制成菌懸液備用[9-11].

2.4 供試液與濾紙片的制備

用移液管量取米醋和無菌水,分別配制成醋酸濃度為2%、4%、6%、9%的供試液,浴鹽與無菌水制成飽和溶液作為陽(yáng)性對(duì)照,無菌水作為陰性對(duì)照,分別置于培養(yǎng)皿中,將預(yù)先剪好、直徑為6.5cm并滅菌的濾紙片完全浸沒在不同濃度的供試液中5min.

2.5 抑菌作用測(cè)定試驗(yàn)

采用濾紙法測(cè)定不同稀釋濃度米醋對(duì)三種菌的抑菌作用.取滅菌后、內(nèi)徑為120mm培養(yǎng)皿,在無菌室的超凈工作臺(tái)中操作,加入滅菌后的培養(yǎng)基20ml,并置于恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h后進(jìn)行無菌檢查.枯草桿菌和金黃色葡萄球菌用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,酵母菌用PDA培養(yǎng)基.用膠頭滴管吸取0.5ml菌懸液滴于通過無菌檢查的培養(yǎng)基上,用涂布器涂勻,將浸泡好的濾紙片放置在涂過菌的培養(yǎng)基上,一個(gè)培養(yǎng)皿中放置四個(gè)同種處理,每個(gè)處理重復(fù)8次,將放置好紙片的培養(yǎng)皿置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h,枯草桿菌和金黃色葡萄球菌適宜溫度為37℃,酵母菌為28℃,用尺量取抑菌環(huán)直徑[12].

2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 不同濃度的米醋對(duì)枯草桿菌的抑制作用

表1 不同濃度的米醋對(duì)枯草桿菌的抑制作用

注:與無菌水組比較*P<0.05,**P<0.01

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:與無菌水組比較,2%的米醋對(duì)枯草桿菌沒有抑制作用,其他濃度的米醋均有抑菌效果,其抑制作用隨濃度的升高而增強(qiáng),且4%、6%的米醋組差異顯著(P<0.05),9%的米醋組差異極顯著(P<0.01),浴鹽組差異顯著(P<0.05),因此,米醋具有一定的抑菌作用,且9%的米醋對(duì)枯草桿菌的抑菌作用比浴鹽對(duì)枯草桿菌的抑菌作用強(qiáng).

3.2 不同濃度的米醋對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制作用

表2 不同濃度的米醋對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制作用

注:與無菌水組比較*P<0.05,**P<0.01.

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:與無菌水組比較,2%的米醋對(duì)金黃色葡萄球菌沒有抑制作用,其他各個(gè)濃度的米醋均有抑菌效果,其抑制作用均隨其濃度的升高而增強(qiáng),且4%、6%的米醋組差異顯著(P<0.05),9%的米醋組差異極顯著(P<0.01),因此米醋對(duì)金黃色葡萄球菌有一定的抑菌作用,且9%的米醋對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌作用比浴鹽對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌作用強(qiáng).

3.3 不同濃度的米醋對(duì)酵母菌的抑制作用

表3 不同濃度的米醋對(duì)酵母菌的抑制作用

注:與無菌水組比較*P<0.05,**P<0.01.

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:與無菌水組比較,2%、4%的米醋對(duì)酵母菌的抑菌作用微弱,無顯著性差異,6%、9%的米醋組差異顯著(P<0.05),浴鹽組差異極顯著(P<0.01).因此,米醋對(duì)酵母菌有一定的抑菌作用且其抑菌作用比浴鹽弱.

4 討論

米醋不僅是調(diào)味佳品,現(xiàn)今更是凈身、美容的保健品.醋酸是米醋的主要成分,米醋通過降低pH值使細(xì)菌處于不利的生長(zhǎng)環(huán)境,酸性物質(zhì)改變蛋白質(zhì)構(gòu)型,擾亂多肽鏈的折疊方式,造成蛋白變性,尤其是酶的變性導(dǎo)致細(xì)菌代謝活動(dòng)終止,從而起到殺菌作用.實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,米醋對(duì)枯草桿菌和金黃色葡萄球菌有一定的抑菌作用,其抑菌作用隨著濃度的增加而增強(qiáng),說明米醋對(duì)細(xì)菌是有較強(qiáng)的抑菌作用.酵母菌屬真菌,真菌是喜酸性的菌,所以米醋對(duì)其抑制作用比對(duì)細(xì)菌的抑菌作用弱[13].浴鹽是沐浴佳品,它具有軟化硬水、軟化角質(zhì)、殺菌和促進(jìn)血液循環(huán)的作用[14-15].浴鹽對(duì)枯草桿菌、金黃色葡萄球菌和酵母菌均有一定的抑制作用.但與米醋比較,對(duì)枯草桿菌、金黃色葡萄球菌的抑制作用較弱,對(duì)酵母菌的抑制作用較強(qiáng).可見米醋不僅是調(diào)味佳品和保健品,而且是一種消毒劑.因此,可以考慮將米醋作為保健醋和殺菌劑進(jìn)行開發(fā).另外,對(duì)于米醋的劑量安全試驗(yàn)及其與劑量效果的關(guān)系有待于進(jìn)一步探討.

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