覃彥平 柯柳華
目前,各種型號的生化分析儀已經(jīng)廣泛應(yīng)用于臨床實(shí)驗(yàn)室,生化分析儀具有快速、高效、準(zhǔn)確、重復(fù)性好及多項(xiàng)目、多樣本處理能力等優(yōu)點(diǎn)。近年來,隨著各種檢測方法學(xué)在不斷改進(jìn),試劑、校準(zhǔn)品質(zhì)量也在不斷提高,使得臨床生化分析檢測結(jié)果重復(fù)性和穩(wěn)定性得到了進(jìn)一步的提高。但由于生化分析儀在分析過程中必須共用吸樣針、試劑針、攪拌棒以及比色杯,使得交叉污染的問題也隨之產(chǎn)生[1]。交叉污染分為吸樣針、攪拌棒、樣品杯及試劑間的交叉污染,其中試劑間的交叉污染常不易發(fā)現(xiàn),具有偶然性,對檢測結(jié)果的影響最為嚴(yán)重[2]。下面,本文就生化分析儀試劑間交叉污染和處理作一簡要介紹。
生化分析儀試劑間的交叉污染主要是因?yàn)閮x器的清洗能力下降,特別是儀器老化、日常維護(hù)欠缺和儀器內(nèi)積聚的污垢均使得儀器不能有效消除攜帶污染。生化分析儀的試劑針在加樣時(shí)要接觸各種試劑成分,而攪拌棒需將血清和試劑在反應(yīng)杯中混勻,如果試劑針、吸樣針和攪拌棒清洗不干凈,就容易在測試項(xiàng)目之間出現(xiàn)交叉污染,因?yàn)榍耙粶y試項(xiàng)目在試劑針、樣品針或混勻器的殘留部分會對下一測定項(xiàng)目造成影響。特別是如果前一測試項(xiàng)目的某一試劑含有下一測定項(xiàng)目的測試所要測定的底物或含有的某種成分與下一測定項(xiàng)目的反應(yīng)所要測定的底物有作用,就會直接干擾下一測定項(xiàng)目的反應(yīng)的測定結(jié)果;如果試劑污染了,下一測定項(xiàng)目的反應(yīng)就是前后兩種試劑綜合作用的結(jié)果,會干擾下一測定項(xiàng)目的反應(yīng)的測定結(jié)果[3]。朱武軍等[4]研究了26個(gè)常用生化項(xiàng)目試劑對TBA測定的干擾現(xiàn)象,發(fā)現(xiàn)HDL-C、TC、Cr和TG試劑對TBA測定產(chǎn)生正干擾的原因是由于試劑交叉污染,可能是HDL-C、TC和TG試劑所含的膽酸鈉具有膽汁酸的反應(yīng)特性,從而對TBA測定造成干擾;而Cr對TBA的干擾可能與前者試劑所含抗壞血酸氧化酶有關(guān),其影響了后者氧化還原的進(jìn)程。
在臨床檢驗(yàn)工作中生化分析儀試劑間出現(xiàn)交叉污染主要表現(xiàn)為某一項(xiàng)目的測定結(jié)果一直符合臨床要求,一段時(shí)間后其測定結(jié)果趨高或減低,日益明顯;但單獨(dú)測定該項(xiàng)目時(shí)其測定結(jié)果又合理起來,鐘原勝等[5]檢測了DBIL后再檢測的ALT發(fā)現(xiàn)DBIL試劑對ALT的檢測有負(fù)干擾,而單獨(dú)檢測的ALT與增加2項(xiàng)對研究對象無干擾項(xiàng)目測定后再測定,則發(fā)現(xiàn)檢測結(jié)果合理,無干擾。而且交叉污染的出現(xiàn)具有偶然性,例如在實(shí)際工作中,化驗(yàn)單的檢測項(xiàng)目不一定相同,當(dāng)儀器的清洗能力下降時(shí),如果某檢測項(xiàng)目之前有對其有干擾的項(xiàng)目,那么該項(xiàng)目的檢測就受到干擾;如果某檢測項(xiàng)目之前無干擾的項(xiàng)目,該項(xiàng)目的檢測就不受干擾。再者由于質(zhì)控觀察常常不能反映其存在,判斷全自動生化分析儀試劑間出現(xiàn)交叉污染具有一定困難性[6]。
3.1 增加清洗次數(shù)及用專用清洗液加強(qiáng)清洗,以提高清洗效果。按常規(guī)清洗,一般不易清洗干凈,通過增加清洗次數(shù)可顯著減少生化分析儀攜帶的污染;生化分析儀專用的堿性清洗液對儀器管道及針腔有較好的清洗作用。對于肌酐、直接膽紅素、總蛋白等污染性較強(qiáng)的項(xiàng)目,要設(shè)置增加堿性清洗液沖洗次數(shù)的分析程序,才能減少污染[7]。
3.2 合理設(shè)置項(xiàng)目測試順序。為了消除部分檢驗(yàn)項(xiàng)目之間干擾現(xiàn)象,應(yīng)將被干擾項(xiàng)目的順序排在干擾項(xiàng)目順序之前或中間增加其他項(xiàng)目,使兩者的直接聯(lián)系被隔斷,可降低污染[8]。各項(xiàng)目測定順序安排好后,不要隨意更動順序[9]。
3.3 應(yīng)加強(qiáng)儀器的日常保養(yǎng)和維護(hù)。生化分析儀經(jīng)過長期使用或保養(yǎng)不當(dāng),其清洗能力下降,達(dá)不到應(yīng)有的清洗效果,進(jìn)而引起試劑間的攜帶污染。試劑針和攪拌棒應(yīng)每天用無水乙醇輕輕擦拭。如果儀器有加強(qiáng)清洗程序,應(yīng)當(dāng)啟用該程序以降低交叉污染[1]。
3.4 檢驗(yàn)工作人員應(yīng)對儀器工作流程、工作狀態(tài)充分了解,對各試劑反應(yīng)原理和組成均應(yīng)熟悉,合理安排項(xiàng)目順序或樣本順序,合理設(shè)計(jì)參數(shù)及程序,盡可能地避免交叉污染[3]。做好質(zhì)量控制工作,能熟練運(yùn)用質(zhì)控方法進(jìn)行控制[10],在失控時(shí),能盡快查出原因、及時(shí)處理,并對具體檢測過程進(jìn)行回顧性分析。認(rèn)真做好儀器的維護(hù)和保養(yǎng)工作,使儀器處于最佳工作狀態(tài),為臨床提供可靠的檢測結(jié)果。
總之,在臨床生化檢驗(yàn)中,檢驗(yàn)人員除了要有高度責(zé)任心,熟練掌握生化分析儀的操作保養(yǎng)外,還要有一定分析檢測結(jié)果是否受到生化分析儀試劑間交叉污染等干擾及處理干擾的能力,才能保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
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