候其華 田 丹

黑龍江省嫩江縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，黑龍江 嫩江 161400

目前，臨床上常用的乙型肝炎病毒表面抗原 (HBsAg)的檢測方法有酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) (ELISA)、膠體金免疫層析 (GIA)法等。我們采用GIA法和ELISA法對(duì)155份血清標(biāo)本進(jìn)行HBsAg平行檢測并比較了兩法的測定結(jié)果，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料和方法

1.1 待檢標(biāo)本 155份常規(guī)靜脈血清標(biāo)本，均來自我院住院患者，年齡25～61歲。

1.2 試劑 GIA法HBsAg檢測試條，由杭州艾康生物技術(shù)有限公司提供;ELISA法HBsAg檢測試劑盒，上?？迫A公司產(chǎn)品。所有試劑均經(jīng)過衛(wèi)生部生物制品檢定所批批檢，均在有效期內(nèi)。

1.3 方法 ELISA法按照試劑說明書操作，設(shè)陰陽性對(duì)照及空白對(duì)照。GIA法采用高特異性的抗體抗原反應(yīng)的免疫層析技術(shù)，試劑條含有預(yù)先固定于膜上測試區(qū) (T)和質(zhì)控區(qū) (C)的抗體。測試時(shí)，將試劑條插入血清標(biāo)本，在測試區(qū) (T)內(nèi)出現(xiàn)一條紫紅色條帶為陽性，沒有出現(xiàn)紫紅色條帶為陰性，無論是陰性或陽性結(jié)果，在質(zhì)控區(qū) (C)內(nèi)都會(huì)有一條紫紅色條帶，在20分鐘內(nèi)判定測試結(jié)果。

2 結(jié)果

ELISA法檢測出HBsAg陽性69份，陰性86份。GIA法檢測出HBsAg陽性63份，陰性92份;有6份ELISA法陽性結(jié)果標(biāo)本膠體金法沒有檢出，兩法結(jié)果總符合率96.1%。若以ELISA法結(jié)果作為真值，則GIA法的敏感性為92.0%，特異性為100%，準(zhǔn)確率為96.1%。

3 討論

準(zhǔn)確檢測HBsAg對(duì)于早期發(fā)現(xiàn)乙肝及其無癥狀攜帶者具有重要意義。ELISA法是檢測HBsAg的常用方法，具有高度的敏感性和特異性，但操作程序較為繁瑣，耗時(shí)長。GIA法檢測HBs，用膠體金代替酶標(biāo)記抗HBs，樣品中HB-sAg與金一抗HBs結(jié)合后沿硝酸纖維素膜遷移，在包被有抗HBs處形成“抗HBs一HBsAg一金抗體”夾心物而出現(xiàn)紫紅色線。此法集免疫反應(yīng)與色譜層析之特點(diǎn)，使待測樣品的HBsAg與吸水纖維上的金抗體HBs不斷結(jié)合，形成HBsAg一金標(biāo)抗體復(fù)合物，再由層析作用持續(xù)通過硝酸纖維素膜，與膜上固相抗HBs結(jié)合。因?yàn)樗袠悠肪?jīng)過較窄的纖維素膜的持續(xù)性反應(yīng)，實(shí)際上對(duì)被測的物質(zhì)起到了濃縮作用，提高了敏感性。由于無須洗滌，大大減少了污染機(jī)會(huì)，且不需要儀器設(shè)備，易于操作，整個(gè)檢測過程在20分鐘內(nèi)即可完成，能滿足急診檢驗(yàn)的需要。我們采用GIA法和ELISA法對(duì)155份血清標(biāo)本進(jìn)行了平行檢測并進(jìn)行結(jié)果比較。GIA法出現(xiàn)6份假陰性結(jié)果，無假陽性結(jié)果，兩法結(jié)果總符合率96.1%，說明 GIA法的敏感性低于ELISA法。筆者認(rèn)為，造成GIA法出現(xiàn)假陰性結(jié)果的常見原因主要有:①試劑本身的靈敏度較低，導(dǎo)致漏檢;②加樣量不準(zhǔn)確，導(dǎo)致反應(yīng)不充分，影響結(jié)果判定;③實(shí)驗(yàn)溫度過低，導(dǎo)致反應(yīng)速度降低，在20分鐘判定結(jié)果時(shí)弱陽性不能完全顯示出來;④稀釋液加法不正確。與ELISA比較，GIA檢測HBsAg一般不出現(xiàn)假陽性，對(duì)抗原量過大的標(biāo)本未發(fā)現(xiàn)有前帶反應(yīng)，表明GIA檢測HBsAg具有高特異性［1]。GIA法能夠檢測血清和末梢全血，即采即測，既可單份操作，也可大批量檢測，不需特殊儀器和設(shè)備，試劑穩(wěn)定，無須洗滌，沒有四甲基聯(lián)苯胺等有害物質(zhì)成分，不會(huì)污染環(huán)境;結(jié)果受外因影響較少，特異性高，敏感性較好，通常情況下，20分鐘即可報(bào)告結(jié)果。GIA法除了適用于急需的快速診斷外，還可以在流行病學(xué)調(diào)查和健康人群體檢中作為快速初篩普查手段。

總之，ELISA法具有高度的敏感性和特異性，但操作程序較為繁瑣，耗時(shí)長;GIA法能夠檢測血清和末梢全血，既可單份操作，也可大批量檢測，特異性高，出結(jié)果快，但敏感性低于ELISA法。兩法測定HBsAg各具有優(yōu)點(diǎn)及不足，應(yīng)根據(jù)具體情況進(jìn)行選擇。

［1]陶義訓(xùn).快速免疫結(jié)合試驗(yàn)在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用評(píng)估.中華醫(yī)學(xué)雜志，2007，21(5):30-32.