王彥芬，Syeda Amber Kazmi，曲林寧，王國平，2，劉玉平，洪霓，2

（1.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)植物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，湖北省作物病害監(jiān)測與安全控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，武漢，430070；2.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)微生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室；3.武漢市蔬菜科學(xué)研究所）

芋病毒病田間調(diào)查及毒氟磷對芋病毒病的防治效果

王彥芬1，Syeda Amber Kazmi1，曲林寧1，王國平1，2，劉玉平3，洪霓1，2

（1.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)植物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，湖北省作物病害監(jiān)測與安全控制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，武漢，430070；2.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)微生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室；3.武漢市蔬菜科學(xué)研究所）

對芋病毒病及類似病害癥狀進(jìn)行調(diào)查，其癥狀表現(xiàn)主要分為羽狀花葉、葉片向上卷曲并伴有黃化或花葉、脈間黃化、明亮褪綠黃斑、褪綠斑點(diǎn)（斑駁）及葉片皺縮和葉緣黃化。采用RT-PCR和PCR技術(shù)對隨機(jī)采集的32份表現(xiàn)癥狀的鄂芋一號樣品進(jìn)行了芋花葉病毒（DsMV）和芋桿狀病毒（TaBV）2種病毒的檢測，檢出率均為68.8%。同時(shí)，利用30%毒氟磷可濕性粉劑500倍液和1 000倍液對芋病毒病進(jìn)行田間藥效試驗(yàn)，第一次施藥后10 d調(diào)查，毒氟磷可濕性粉劑500倍液和1 000倍液的防治效果分別為30.9%和24.9%；第二次施藥后15 d調(diào)查，500倍液和1 000倍液防治效果分別為72.8%和59.4%。田間藥劑試驗(yàn)結(jié)果表明，毒氟磷可濕性粉劑500倍液比1 000倍的防治效果好，從田間芋頭長勢可看出，毒氟磷對芋頭生長有明顯的促進(jìn)作用。

芋；病毒?。环乐涡Ч?；毒氟磷

芋[Colocasia esculenta（L.）Schott]是天南星科（Araceae）芋屬（Colocasia）多年生宿根草本植物，作為糧食和蔬菜在世界各地廣泛種植[1，2]。芋主要通過球莖進(jìn)行繁殖，屬典型的無性繁殖作物，生產(chǎn)中長期的無性繁殖導(dǎo)致病毒在芋植株內(nèi)積累，病毒病為害逐年加重，植株衰退而造成其產(chǎn)量下降，品質(zhì)變劣[3~5]。為了明確我國芋病毒病害在田間發(fā)生特點(diǎn)及為害狀況，在武漢市蔬菜科學(xué)研究所試驗(yàn)基地選取了多年繁殖芋栽培地，調(diào)查了芋病毒病的發(fā)生與病毒侵染狀況，并在此基礎(chǔ)上采用毒氟磷開展了田間藥劑防治試驗(yàn)研究，以期尋找一種高效、低毒、低殘留的防治芋病毒病的新型藥劑。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

30%毒氟磷可濕性粉劑，為廣西田園生化股份有限公司生產(chǎn)，分別稀釋500倍和1 000倍后進(jìn)行葉面噴霧處理。芋品種為鄂芋一號。

1.2 病毒病調(diào)查及病毒檢測

試驗(yàn)在武漢市蔬菜科學(xué)研究所芋病毒病發(fā)生比較嚴(yán)重的芋頭田進(jìn)行。2012年5～6月對選定試驗(yàn)地的芋病毒病及類似病害癥狀表現(xiàn)進(jìn)行調(diào)查，記錄癥狀類型及嚴(yán)重度。同時(shí)根據(jù)癥狀特點(diǎn)，隨機(jī)采集表現(xiàn)不同癥狀的植株葉片，在室內(nèi)采用PCR和RT-PCR方法對1種桿狀DNA病毒（芋桿狀病毒，Taro bacilliform virus，TaBV）和1種RNA病毒（芋花葉病毒，Dasheen mosaic virus，DsMV）進(jìn)行了檢測。

1.3 試驗(yàn)方法

共設(shè)500倍液和1 000倍液毒氟磷噴霧2個處理，以未施藥區(qū)為對照，以2行為1個處理重復(fù)，每個處理設(shè)3個重復(fù)，共噴藥處理2次，間隔10 d和15 d。

施藥前（2012年5月31日）、第一次施藥后10 d（6月10日）、第二次施藥后10 d（6月25日），分別調(diào)查每個處理區(qū)表現(xiàn)病毒病癥狀的植株數(shù)量及嚴(yán)重度。

防治效果根據(jù)處理區(qū)與對照區(qū)的病害發(fā)生程度進(jìn)行比較分析。根據(jù)田間病毒病癥狀特點(diǎn)及葉片病害發(fā)生程度初步分為3級，即：0級，無病斑；1級，病斑明顯可見，但病斑較??；2級，病斑明顯可見，且較大。病情指數(shù)=[∑（病葉數(shù)×相應(yīng)級數(shù)）/（調(diào)查總?cè)~數(shù)×最高級數(shù)）]×100[6]；防治效果（%）=[（對照區(qū)病情指數(shù)-處理區(qū)病情指數(shù)）/對照區(qū)病情指數(shù)]× 100%。

2 結(jié)果與分析

2.1 芋病毒病田間調(diào)查結(jié)果

在進(jìn)行藥劑處理前，隨機(jī)調(diào)查了1 200株鄂芋一號芋頭植株，結(jié)果表明鄂芋一號大田植株病毒病發(fā)生比較普遍，癥狀表現(xiàn)主要分為羽狀花葉、葉片向上卷曲并伴有黃化或花葉、脈間黃化、明亮褪綠黃斑、褪綠斑點(diǎn)（斑駁）及葉片皺縮并沿葉緣褪綠（圖1），各種癥狀發(fā)病率分別為14.8%、15.8%、8.8%、24%、18.8%和11.2%。

2.2 田間芋頭中DsMV和TaBV的RT-PCR檢測

從田間隨機(jī)采集表現(xiàn)不同癥狀的鄂芋一號樣品，采用RT-PCR技術(shù)檢測結(jié)果顯示，32份芋樣品中22份帶有DsMV和TaBV，片段長度分別為 313 bp和 570 bp（圖2），其檢出率均為68.8%。從表1可以看出，癥狀表現(xiàn)為羽狀花葉、葉片向上卷曲、褪綠斑點(diǎn)的植株，感染DsMV和TaBV的比例較高；而癥狀表現(xiàn)為葉緣黃化的植株，感染DsMV和TaBV的比例最低。

2.3 毒氟磷對芋病毒病的田間防治效果

2012年5 ～6月田間小區(qū)藥效試驗(yàn)結(jié)果顯示，毒氟磷500倍液對芋病毒病的防治效果非常明顯。從表2可以看出，第一次施藥后10 d，毒氟磷500倍液的防治效果達(dá)到30.9%，顯著高于毒氟磷1 000倍液的防效；第二次施藥后，毒氟磷500倍液較毒氟磷1 000倍液的防效更加顯著。以上結(jié)果表明，試驗(yàn)藥劑毒氟磷可濕性粉劑500倍液對芋頭病毒病有良好的防效，可明顯減輕病毒病癥狀。

圖1 芋病毒病田間癥狀類型

圖2 RT-PCR檢測部分鄂芋一號樣品DsMV（A）和TaBV（B）結(jié)果

3 小結(jié)與討論

由于芋多采用球莖無性繁殖，在長期的無性繁殖過程中植株病毒含量不斷積累、種類增加，而導(dǎo)致病毒病為害逐年加重。本研究中，對從田間隨機(jī)采集的表現(xiàn)不同癥狀的植株葉片進(jìn)行了RT-PCR檢測，檢測結(jié)果顯示其樣品中攜帶DsMV和TaBV這2種病毒，檢出率均為68.8%。從癥狀表現(xiàn)方面進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，癥狀表現(xiàn)為羽狀花葉、葉片向上卷曲、褪綠斑點(diǎn)的植株，感染DsMV和TaBV的比例較高；而癥狀表現(xiàn)為葉緣黃化的植株，感染DsMV和TaBV的比例較低，推測葉緣黃化癥狀可能是由于植株生理因素而導(dǎo)致，而并非上述2種病毒所引起的，具體原因有待進(jìn)一步研究。

毒氟磷為含氟氨基磷酸酯類新型抗病毒藥劑，屬于低毒化合物，對煙草、黃瓜、番茄病毒病具有優(yōu)良的防治效果。本研究初步確定了毒氟磷對芋病毒病具有優(yōu)良的防治效果；使用可濕性粉劑500倍液均勻噴霧，對芋病毒病的防治效果在70%左右，在芋病毒病盛發(fā)時(shí)用藥一次，均勻噴霧，可以控制芋病毒病的擴(kuò)展為害。

從處理區(qū)與對照區(qū)比較可看出，毒氟磷對芋頭的長勢具有明顯的促進(jìn)作用（數(shù)據(jù)在整理中），具有較高的推廣應(yīng)用價(jià)值。本研究中僅對芋花葉病毒的田間防效進(jìn)行了試驗(yàn),而有關(guān)室內(nèi)的測試研究有待于進(jìn)一步開展。

表1 芋病毒病癥狀類型及兩種病毒檢測結(jié)果

表2 毒氟磷可濕性粉劑對芋花葉病毒的防治效果

[1]Binoy Babu,Vinayaka Hegde,Makeshkumar T,et al. Detection and identification ofDasheen mosaic virusinfectingColocasia esculentain India[J].Indian J Virol,2011,22(1): 59-62.

[2]He X L,Miyasaka S C,Maureen M M Fitch,et al. Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation of taro (Colocasia esculenta(L.)Schott)with a rice chitinase gene for improved tolerance to a fungal pathogenSclerotium rolfsii[J].Plant Cell Rep,2008,27:903-909.

[3]Kamal Sharma K,Ajay Kumar Mishra A K,Misra R S. Identification and characterization of differentially expressed genes in the resistance reaction in taro infected withPhytophthora colocasiae[J].Mol Biol Rep,2009,36:1 291-1 297.

[4]李永偉．天南星科植物病毒研究[D]．杭州：浙江大學(xué)，2002．

[5]Reyes G,Ramsell J N E,Nyman M,et al.Sequence characterization of Dasheen mosaic virus isolates from cocoyam in Nicaragua[J].Arch Virol,2009,154:159-162.

[6]楊連來.黃瓜白粉病菌對己唑醇的敏感基線及實(shí)驗(yàn)室抗性獲得[J].植物保護(hù)學(xué)報(bào)，2007，34（4）：431-435.

Field Investigation of Taro Virus Diseases and Efficiency Evaluation of Dufulin on Controlling Them

WANG Yanfen1,SYEDA Amber Kazmi1,QU Linning1,WANG Guoping1,2,LIU Yuping3,HONG Ni1,2(1.College of Plant Science and Technology,Key Lab of Crop Disease Monitoring and Safety Control in Hubei,Huazhong
Agricultural University,Wuhan 430070;2.National Key Lab of Agro-microbiology,Huazhong Agricultural University; 3.Wuhan Vegetable Research Institute)

In this paper,we surveyed virus and virus-like diseases on taro[Colocasia esculenta(L.)Schott]cultivar E'yu No.1,and the main symptoms on the leaves were as follows:feathery mottle,curled-up leaves with yellowing or mosaic, interveinal yellowing,bright yellowing spots,chlorotic mottle,leaf crinkle and margin yellowing.Totally,32 samples showing obvious symptoms were randomly collected and detected for both dasheen mosaic virus(DsMV)and taro bacilliform virus (TaBV)by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR)and PCR.The results showed that the infectious rates of the both viruses were 68.8%.The field efficacy test for taro virus diseases was carried out by using 500 and 1 000 times diluted solutions of 30%Dufulin wettable powder(WP),and their control efficiency were 30.9%and 24.9% respectively at 10 days after the first spraying,and increased to 72.8%and 59.4%at 15 days after the second spraying.The results showed that 500 times diluted solution of 30%Dufulin WP had higher controlling efficiency to taro virus diseases than that of 1 000 times diluted solution.Meanwhile,it was found that Dufulin could improve the growth of taro.

Colocasia esculenta(L.)Schott;Virus diseases;Dasheen mosaic virus;Control effect;Dufulin

10.3865/j.issn.1001-3547.2012.16.039

國家農(nóng)業(yè)行業(yè)專項(xiàng)計(jì)劃項(xiàng)目（nyhyzx200903017-08）

王彥芬（1987-），女，碩士，研究方向?yàn)橹参锊《緦W(xué)

洪霓，通信作者，教授，研究方向?yàn)橹参锊《緦W(xué)，電話：027-87283278，E-mail：whni@mail.hzau.edu.cn

2012-06-30