程園園，劉健，馮云霞，劉磊，萬磊

(1.安徽中醫(yī)學(xué)院，合肥230038;2安徽中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院;3.湖北中醫(yī)藥大學(xué))

骨關(guān)節(jié)炎(OA)，又稱骨關(guān)節(jié)病、退行性關(guān)節(jié)病和增生性關(guān)節(jié)炎等，是一種常見的慢性、進(jìn)展性關(guān)節(jié)疾病。其主要病理改變?yōu)殛P(guān)節(jié)軟骨變性、破壞、軟骨下骨硬化，關(guān)節(jié)邊緣和軟骨下骨反應(yīng)增生、骨贅形成等。但對導(dǎo)致OA發(fā)生的確切病因尚缺乏真正了解，一般認(rèn)為OA與衰老、創(chuàng)傷、肥胖、代謝障礙和遺傳、免疫等因素有關(guān)。有研究表明［1］，自由基與細(xì)胞因子相互作用，參與了OA的病理過程，與OA的發(fā)生發(fā)展有密切關(guān)系。本研究通過分析血清超氧化物歧化酶(SOD)在膝骨關(guān)節(jié)炎KOA患者中的變化及相關(guān)影響因素，為SOD作為膝骨關(guān)節(jié)炎病情活動性指標(biāo)及探索新的治療思路提供臨床依據(jù)?，F(xiàn)將62例KOA患者超氧化物歧化酶(SOD)變化及其相關(guān)性分析報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 所選62例膝骨關(guān)節(jié)炎患者均來自2011年10月至2012年3月安徽中醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院風(fēng)濕免疫科住院患者，女47例，男15例;年齡32～80歲，平均(61.4 ±13.7)歲;病程 3個月 ～30年，平均(9.4±5.4)年。所選病例均符合2003年中華醫(yī)學(xué)會風(fēng)濕病學(xué)分會起草的《骨關(guān)節(jié)炎診療指南(草案)》診斷標(biāo)準(zhǔn)［2］。

1.2 排除標(biāo)準(zhǔn) ①不符合上述KOA疾病診斷標(biāo)準(zhǔn)的患者;②合并心血管、呼吸系統(tǒng)、肝、腎和造血系統(tǒng)等嚴(yán)重原發(fā)性疾病及其他風(fēng)濕免疫類疾病;③年齡在18歲以下，70歲以上的患者;④孕婦或哺乳期女性的患者;⑤精神病患者;⑥未按規(guī)定用藥，無法判斷療效或資料不全等影響療效或安全性判斷者。⑦研究者判斷不宜進(jìn)行此項(xiàng)臨床試驗(yàn)的受試者。

1.3 研究方法

1.3.1 實(shí)驗(yàn)室指標(biāo) SOD、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、補(bǔ)體C3、C4:采用日立7060型全自動生化分析儀進(jìn)行測定。ESR(魏氏法);hs-CRP(日立HITACHI7060全自帶生化分析儀檢測)。白細(xì)胞(WBC)、紅細(xì)胞(RBC)、血紅蛋白(HGB)、血小板(PLT)(日本 SysmexXT-2000i全自動血細(xì)胞分析儀檢測)。

1.3.2 膝骨關(guān)節(jié)炎嚴(yán)重程度指數(shù)(Lequesne MG)［3］根據(jù)Lequesne MG評分原則將62例KOA患者分輕中重3組(輕度組11例、中度組36例、重度組15例)，并以年齡為界限把62例KOA患者分為＜50歲組(16例)、51～65歲組(17例)、＞66歲組(29例)，以5年為界限把62例KOA患者分為＜5年組(27例)、≥5年組(35例)。

1.3.3 中醫(yī)證侯分級量化表［4］包括10個條目，每條根據(jù)癥狀輕重程度分為無、輕、中、重四級，分別記作0、3、6、9 分。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS17.0軟件包對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，計量資料采用±s表示，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，多組間比較采用方差分析，正態(tài)性檢驗(yàn)不符合條件資料采用秩和檢驗(yàn)，指標(biāo)間相關(guān)性采用Spearman分析。

2 結(jié)果

2.1 KOA患者SOD值 與血清SOD正常參考值(129～216 u/ml)比較，KOA組SOD水平低于正常值占36例(58%)。KOA患者中，按LequesneMG分級，輕度組與中度組、輕度組與重度組、中度組與重度組比較顯示重度組血清 SOD水平［(118.27±22.55)u/ml］顯著低于輕度組［(146.27 ±24.14)u/ml］及中度組［(125.28 ± 21.30)u/ml］，(P＜0.05)，中度組血清SOD水平顯著低于輕度組(P＜0.05)。

2.2 按照臨床因素分組比較各組SOD的變化 與病程＜5 年組［(135.93 ±29.43)u/ml］比較，病程≥5 年組［(121.29 ±16.49)u/ml］血清 SOD 水平顯著降低(P＜0.05)。而年齡、性別因素對KOA患者血清SOD水平影響不大(均P＞0.05)。

2.3 KOA患者血清SOD水平與年齡、中醫(yī)癥候積分、LequesneMG、病程、ESR、CRP、IGM、C3、C4 相關(guān)性分析 相關(guān)性分析示SOD與LequesneMG、中醫(yī)癥候積分、病程、ESR、CRP、IGM 呈負(fù)相關(guān)，與 C3、C4呈正相關(guān)(P＜0.05)。與其他實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)無相關(guān)性，見表1。

3 討論

本研究結(jié)果顯示，62例KOA患者血清SOD水平低于正常參考值者36例(58%)，且表現(xiàn)出隨著膝關(guān)節(jié)嚴(yán)重程度指數(shù)由輕到中重度變化及病程的延長，SOD值呈下降趨勢，而性別對血清SOD水平影響不大。隨著患者年齡的增長，其SOD值有下降的趨勢，但在各年齡組之間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。說明年齡并非是影響SOD降低的主要原因。相關(guān)性分析還顯示SOD水平與關(guān)節(jié)嚴(yán)重程度指數(shù)、中醫(yī)癥候積分、病程、紅細(xì)胞沉降率、超敏C反應(yīng)蛋白、IGM、C3、C4呈負(fù)相關(guān)。而與年齡、WBC、RBC、HGB、PLT、IGG、IGA 無相關(guān)性。說明骨關(guān)節(jié)炎患者出現(xiàn)SOD降低可能跟疾病病程增加，炎癥的進(jìn)一步刺激，關(guān)節(jié)病變程度加重，以及由此導(dǎo)致的補(bǔ)體調(diào)節(jié)紊亂、氧化應(yīng)激效應(yīng)相關(guān)。同時，SOD的降低亦可加重骨關(guān)節(jié)炎的進(jìn)一步發(fā)展。

表1 KOA患者血清SOD水平與其他指標(biāo)相關(guān)性分析(n=62)

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為KOA是由多種因素引起的，以關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞、基質(zhì)和軟骨下骨合成和分解代謝異常為病理表現(xiàn)的風(fēng)濕性疾病，其癥狀的產(chǎn)生與關(guān)節(jié)的高壓及骨高壓，靜脈瘀滯關(guān)系密切，軟骨損傷是KOA的病變基礎(chǔ)。盡管KOA的病因十分復(fù)雜，發(fā)病機(jī)制未明，但是自由基對關(guān)節(jié)軟骨的損傷作用已開始為人們所認(rèn)識。病理情況下，過量自由基抑制軟骨細(xì)胞增殖引起軟骨細(xì)胞死亡，抑制軟骨基質(zhì)蛋白多糖和膠原的合成，加速軟骨基質(zhì)的降解，從而降低軟骨的彈性和強(qiáng)度［5］。自由基還可抑制軟骨細(xì)胞DNA的合成，破壞蛋白多糖和膠原分解合成代謝，從而降低軟骨細(xì)胞的合成能力，引起軟骨細(xì)胞損傷［6］，加速軟骨代謝，進(jìn)而導(dǎo)致骨關(guān)節(jié)炎此類退行性疾病的發(fā)生，從而引起機(jī)體組織功能的喪失，出現(xiàn)病理狀態(tài)如關(guān)節(jié)活動受限和疼痛的產(chǎn)生。自由基代謝中與KOA關(guān)系最密切的是活性氧(ROS)的代謝。已證明在OA關(guān)節(jié)液中氧自由基含量升高［7］。

已經(jīng)有研究證實(shí)，OA的發(fā)病過程中存在著自由基清除劑SOD的損傷。本研究發(fā)現(xiàn)KOA患者血清SOD水平有一半以上者低于正常參考值，并隨著關(guān)節(jié)嚴(yán)重程度指數(shù)由輕到中重度變化及病程的延長，呈下降趨勢。這種結(jié)果提示SOD可以反應(yīng)膝骨關(guān)節(jié)炎的嚴(yán)重程度。目前，KOA尚缺乏明確實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)反應(yīng)病情活動度及嚴(yán)重程度，如確能證實(shí)SOD水平與KOA患者病情進(jìn)展程度的關(guān)系，其意義不僅在于SOD可用于評估KOA病情嚴(yán)重程度，還在于為治療KOA提供新的治療思路及療效評價指標(biāo)。

一般認(rèn)為SOD是反映衰老的一個重要指標(biāo)，與年齡呈明顯相關(guān)。最近隨著KOA發(fā)病機(jī)制的深入研究發(fā)現(xiàn)，炎性反應(yīng)在KOA的發(fā)病中起著重要作用。而高水平的氧自由基主要來源于免疫和炎癥過程中，如中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、炎性滑膜等均可產(chǎn)生過量氧自由基［8］，從而加速KOA的發(fā)生發(fā)展。故而，疾病本身對SOD水平的影響占有主導(dǎo)作用，而年齡因素的影響則相對較小，結(jié)合年齡與SOD相關(guān)性分析，提示年齡因素亦對SOD水平變化起著作用，只是這種作用在疾病過程中則不如在正常人中那么明顯，因此3個年齡組無明顯差異。相關(guān)性分析還顯示SOD水平與關(guān)節(jié)嚴(yán)重程度指數(shù)、病程、中醫(yī)癥候積分、紅細(xì)胞沉降率、超敏C-反應(yīng)蛋白、IGM、C3、C4 呈負(fù)相關(guān)。而與 WBC、RBC、HGB、PLT、IGG、IGA無相關(guān)性。紅細(xì)胞沉降率、超敏C-反應(yīng)蛋白、IGM、C3、C4在多數(shù)疾病中都可用來作為疾病活動性指標(biāo)，指標(biāo)越高，疾病活動度越強(qiáng)?，F(xiàn)代研究已證實(shí)在KOA的發(fā)病過程中存在細(xì)胞因子、免疫學(xué)機(jī)制的參與。KOA病理過程中，大量中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞被活化，聚集于關(guān)節(jié)、滑膜、滑液中，可釋放大量自由基，當(dāng)其表面受到免疫復(fù)合物、補(bǔ)體成分等攻擊，可加劇這個反應(yīng)。由此，SOD水平的降低程度可以從側(cè)面反映KOA的炎癥嚴(yán)重程度。這亦說明了SOD可以作為評價KOA病情活動度的重要指標(biāo)之一［9-10］。

綜上可見，KOA患者存在SOD水平的下降，并與患者的病程、LequesneMG積分、中醫(yī)癥狀積分、ESR、CRP、IGM、C3、C4 有相關(guān)性，說明 SOD 的表達(dá)失調(diào)參與了KOA的發(fā)病過程，其機(jī)制可能與炎癥、氧化應(yīng)激、免疫失調(diào)等相關(guān)，提示SOD可以作為評價KOA病情活動度的重要指標(biāo)之一，反應(yīng)疾病發(fā)生發(fā)展情況，故而應(yīng)早期治療KOA患者，并在治療時注意提高患者的SOD的水平，從而延緩或抑制病情發(fā)展。

［1］ Clancy RM，Amin AR，Abramson SB.The role of nitric oxide in inflammation and immunity［J］.Arthritis Rheum，1998，41(7):1141-1151.

［2］ 中華醫(yī)學(xué)會風(fēng)濕病學(xué)分會.骨關(guān)節(jié)炎診治指南［J］.中華風(fēng)濕病學(xué)雜志，2003，7(11):702.

［3］ Lequesne MG，Samsons S.Indices of severity in osteoarthritis of weight bearing joints［J］.J Rheum，1991，18(suppl 27):16-18.

［4］ 鄭筱萸.中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則［M］.北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2002:123.

［5］ 陳瑞蓮.超氧化物歧化酶在骨關(guān)節(jié)炎中的研究意義探討［J］.中醫(yī)藥臨床雜志，2011，23(6):475-477.

［6］ 康一凡，逄育.氧自由基與膝骨關(guān)節(jié)炎關(guān)系的實(shí)驗(yàn)及臨床研究［J］.第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報，2001，22(10):945-948.

［7］ Drewar CL，Harth M.Superoxide production from cytokine-treated adherent rheumatoid neutrophils［J］.Clin Invest Med，1994，17(1):52-60.

［8］ Taraza C，Mohora M，Vargolici B，et al.Importance of reactive oxygen species in rheumatoid arthritis［J］.Rom J Intern Med，1997，35(1-4):89-98.

［9］ 王桂珍，張金山.膝骨關(guān)節(jié)炎患者超氧化物歧化酶變化及相關(guān)性分析［J］.中醫(yī)藥臨床雜志，2011，23(6):530-531.

［10］吳蠡蓀.自由基與臨床醫(yī)學(xué)(下)［J］.微循環(huán)學(xué)雜志，1998，8(4):24-26.