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白靈菇生理生化研究進(jìn)展

2012-04-13 08:37趙占軍肖晉川柴美清
山西農(nóng)業(yè)科學(xué) 2012年3期
關(guān)鍵詞:白靈菇胞外酶菌絲體

趙占軍 ,張 勇 ,李 毅 ,肖晉川 ,柴美清

(1.山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院試驗(yàn)研究中心,山西太原030006;2.山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所,山西太原030031)

白靈菇(Pleurotus nebrodensis),屬真菌門(Fungi door)擔(dān)子菌亞門(Basidiomycolina)真菌綱(Hymenomycetes)傘菌目(Agaricales)側(cè)耳科(Pleurotaceae)側(cè)耳屬(Pleurotus)。其子實(shí)體外形美觀,通體潔白,菇體肥大,蓋厚柄粗,質(zhì)地密實(shí),味鮮,質(zhì)脆,風(fēng)味極佳,久煮不爛。而且白靈菇營(yíng)養(yǎng)豐富,蛋白質(zhì)含量為14.7%,碳水化合物為43.2%,脂肪為4.31%,纖維素為 15.4%;富含18種氨基酸,其中,人體必需的賴氨酸、精氨酸等8種氨基酸占總氨基酸的35%。同時(shí),它又含有大量的磷、鐵、鈣等礦物元素。白靈菇內(nèi)的真菌多糖含量達(dá)到190 mg/g,對(duì)提高人體的非特異性免疫功能具有促進(jìn)作用,是一種珍稀的天然保健食品[1-2]。

近年來,對(duì)白靈菇的分析與研究,尤其對(duì)其生理生化方面的分析與研究取得了階段性突破,為今后進(jìn)一步深入研究和開發(fā)白靈菇這一名貴真菌提供了重要科學(xué)依據(jù)。

1 營(yíng)養(yǎng)成分含量的研究

1.1 菌蓋與菌柄氨基酸和多糖含量

白靈菇氨基酸含量豐富,含人體必需的8種氨基酸。其所含的真菌多糖能增強(qiáng)人體免疫功能,具有抗病毒、抗腫瘤作用,且能降低人體膽固醇含量、防止動(dòng)脈硬化。寧麗等[3]對(duì)白靈菇子實(shí)體菌蓋、菌柄中氨基酸及粗多糖含量進(jìn)行了測(cè)定,結(jié)果表明,白靈菇菌蓋所含氨基酸總量高于菌柄,菌蓋與菌柄氨基酸總量分別為13.67%,7.43%,必需氨基酸分別占氨基酸總量的36.87%(菌蓋)和37.42%(菌柄),符合WHO/FAO提出的蛋白質(zhì)參考模式,風(fēng)味氨基酸含量高,是具有很高營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和保健作用的天然綠色食品。白靈菇多糖含量也較高,其菌蓋與菌柄粗多糖含量分別達(dá)到45.5,46 mg/g,具有防癌、抗癌、增強(qiáng)人體免疫力等功能。多糖和黃酮類化合物具有抵御紫外線、抗菌免疫、抗氧化、抗艾滋病毒(HIV)、抗腫瘤等方面的生理和藥理作用。對(duì)白靈菇中多糖及總黃酮進(jìn)行提取和測(cè)定,為進(jìn)一步開發(fā)利用這一食、藥兩用真菌資源,發(fā)揮其潛在的經(jīng)濟(jì)價(jià)值和藥用價(jià)值都具有重要的意義。蘇雅勒琪琪格[4]研究結(jié)果表明,白靈菇水溶性多糖含量為6.76%,平均回收率為6.42%,RSD為0.67%。據(jù)報(bào)道,英國(guó)研究人員已從白靈菇新鮮子實(shí)體中首次分離、鑒定了1種新的溶血蛋白(nebrodeolysin),并發(fā)現(xiàn)該蛋白具有很強(qiáng)的細(xì)胞毒活性,能夠誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡和抗HIV-1等作用。

1.2 菌絲體與子實(shí)體的營(yíng)養(yǎng)成分

李正鵬等[5]采用原子吸收、紫外掃描以及氨基酸分析等方法對(duì)白靈菇菌絲體和子實(shí)體的營(yíng)養(yǎng)成分進(jìn)行了測(cè)定分析。研究結(jié)果表明,白靈菇菌絲體和子實(shí)體的可溶性物質(zhì)、可溶性蛋白、總糖、還原糖、氨基態(tài)氮含量相近。菌絲體和子實(shí)體氨基酸的組成一致,都含有人體必需的8種氨基酸,菌絲體和子實(shí)體中氨基酸總量分別為189.479,93.390 mg/g,必需氨基酸占總氨基酸的比例分別為50.833%和57.584%,菌絲體中氨基酸的含量明顯高于子實(shí)體,菌絲體的礦物元素含量也明顯高于子實(shí)體,二者均含有人體所需的大量元素鈣、鎂、銅、鋅等。

1.3 胺類化合物含量

李曉燕等[6]采用水蒸氣蒸餾法提取白靈菇風(fēng)味成分,然后利用氣象色譜—質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)進(jìn)行分析鑒定。結(jié)果表明,白靈菇風(fēng)味成分中含量最多的一類化合物為胺類化合物,相對(duì)含量為43.19%,胺類化合物(Z)-9-十八烯酰胺含量最高,相對(duì)含量為22.47%。

2 胞內(nèi)多糖和胞外多糖的研究

馬淑風(fēng)等[7]對(duì)白靈菇胞外多糖主要組成成分PNEP I-a的分離純化和結(jié)構(gòu)性質(zhì)進(jìn)行了研究,并采用化學(xué)發(fā)光法對(duì)白靈菇純多糖抗氧化功能進(jìn)行了探索性研究。結(jié)果表明,白靈菇胞外多糖PNEP I-a為一種水溶性非淀粉,不含還原糖、單糖、二糖、糖醛酸和蛋白質(zhì),而含有a-D葡萄糖、甘露糖等特征基團(tuán)的中性純多糖,其對(duì)-OH和O2-清除率分別為49.50%和47.24%,具有顯著的抗氧化活性。盛偉等[8]也報(bào)道,白靈菇菌絲體胞內(nèi)與胞外多糖提取物均具有較強(qiáng)的體外抗氧化性能,且隨著多糖濃度的增大,其抗氧化活性逐漸增強(qiáng)。對(duì)-OH的清除能力,胞內(nèi)多糖優(yōu)于胞外多糖;對(duì)O2-的清除能力,當(dāng)多糖質(zhì)量濃度低于55 μg/mL時(shí),胞內(nèi)多糖優(yōu)于胞外多糖,當(dāng)多糖質(zhì)量濃度高于55 μg/mL時(shí),胞外多糖優(yōu)于胞內(nèi)多糖;在還原力抑制方面,胞內(nèi)多糖優(yōu)于胞外多糖;在對(duì)NO2-清除方面,胞外多糖表現(xiàn)最強(qiáng)。

3 菌絲體生長(zhǎng)因子的研究

影響白靈菇菌絲體和子實(shí)體生長(zhǎng)發(fā)育的有溫度、濕度、酸堿度、空氣、光線等因子,菌絲的培養(yǎng)是獲得子實(shí)體高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的基礎(chǔ),而人們往往在實(shí)際培養(yǎng)過程中容易忽視菌絲體的培養(yǎng)環(huán)境。黃志龍[9]研究表明:(1)白靈菇菌絲在培養(yǎng)料含水量在50%~75%的范圍內(nèi)均可生長(zhǎng),但培養(yǎng)料含水量為65%~75%時(shí),菌絲生長(zhǎng)速度最快;(2)白靈菇菌絲生長(zhǎng)時(shí),對(duì)pH值有一定的選擇性,不同白靈菇菌株要求最適pH值有所不同,適合白靈菇菌絲生長(zhǎng)的pH值為6~8;(3)白靈菇在10~35℃的范圍內(nèi)均可生長(zhǎng),當(dāng)溫度達(dá)到40℃以上,菌絲不生長(zhǎng),最適合菌絲生長(zhǎng)的溫度為25~30℃,所以,應(yīng)設(shè)置2℃的間隔溫度,測(cè)定菌絲生長(zhǎng)的最適溫度和致死溫度。姚太梅等[10]認(rèn)為,白靈菇在17.5~30.0℃范圍內(nèi)菌絲均可生長(zhǎng),最適生長(zhǎng)溫度為25.0℃;菌絲在培養(yǎng)基pH值為4.5~8.0范圍內(nèi)均可生長(zhǎng),最適pH值為6.5。

4 生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)

影響白靈菇菌絲生長(zhǎng)的因素很多,其中,生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)是影響其生長(zhǎng)的重要因素之一。賈洛等[11]研究表明,維生素B1、赤霉素、三十烷醇、肌醇都對(duì)白靈菇菌絲生長(zhǎng)有不同的促進(jìn)作用,作用程度由大到小順序?yàn)榫S生素B1、肌醇、赤霉素、三十烷醇,其中,維生素B1對(duì)白靈菇菌絲生長(zhǎng)的促進(jìn)作用最為顯著,表現(xiàn)為菌絲生長(zhǎng)致密、粗壯潔白,最適添加維生素B1的質(zhì)量濃度為5 mg/L。

5 生長(zhǎng)發(fā)育過程中胞外酶活性

作為腐生異養(yǎng)真菌,白靈菇生長(zhǎng)發(fā)育主要依靠自身不斷分泌各種胞外酶來分解、吸收培養(yǎng)基中的碳氮營(yíng)養(yǎng),搞清胞外酶活性的變化規(guī)律,對(duì)深入研究其生長(zhǎng)發(fā)育規(guī)律具有很重要的指導(dǎo)作用。周長(zhǎng)青等[12]以天山2號(hào)菌株為試驗(yàn)材料,對(duì)白靈菇的胞外酶活性進(jìn)行了研究,結(jié)果表明,整個(gè)生育期的胞外酶活性變化具有明顯的階段性。濾紙酶、羧甲基纖維素酶和半纖維素酶活性在菌絲生長(zhǎng)階段較低,現(xiàn)蕾后活性急劇增強(qiáng)。酸性蛋白酶和中性蛋白酶活性在菌絲生長(zhǎng)階段比較穩(wěn)定,現(xiàn)蕾前相對(duì)較低,在子實(shí)體生長(zhǎng)階段這2種酶的活性又明顯增強(qiáng)。整個(gè)生長(zhǎng)階段酸性蛋白酶的活性明顯高于中性蛋白酶的活性。毛欣欣等[13]認(rèn)為,白靈菇在不同的生長(zhǎng)發(fā)育階段,所分泌的胞外酶的活性大小除受菌體基因控制外,還受栽培溫度和pH值等外界因素的影響,其深層發(fā)酵產(chǎn)生的濾紙酶在反應(yīng)時(shí)間為1 h,溫度為55℃,pH值為5.0時(shí)酶活性較高;纖維素酶在反應(yīng)時(shí)間為0.5 h,溫度為45℃,pH值為4.5時(shí)比較適宜。以上研究都為進(jìn)一步揭示白靈菇胞外酶的生化特性和遺傳育種提供了科學(xué)依據(jù)。

6 小結(jié)

白靈菇具有較高的食用價(jià)值和藥用價(jià)值,食用菌科技工作者對(duì)白靈菇的基礎(chǔ)研究和應(yīng)用研究越來深入和廣泛,包括分類學(xué)、基因?qū)W、細(xì)胞學(xué)、遺傳學(xué)、生理生化學(xué)等方面的研究已成為重點(diǎn)課題,并已取得了突破性的進(jìn)展。但有許多機(jī)制機(jī)理還沒有完全搞清楚。例如,白靈菇發(fā)酵菌絲體替代子實(shí)體用于醫(yī)藥和保健品的開發(fā)利用,還有待于作進(jìn)一步的毒理和藥理試驗(yàn),才能安全、有效地應(yīng)用于臨床;白靈菇多糖結(jié)構(gòu)與具體活性功能的確切關(guān)系;多糖抗氧化作用的機(jī)制;白靈菇生長(zhǎng)發(fā)育過程中的胞外酶活性的變化規(guī)律和調(diào)控機(jī)制等還有待進(jìn)一步研究。

[1]王耀榮,徐全飛,韓曉芳,等.白靈菇工廠化栽培培養(yǎng)料篩選及栽培工藝的研究[J].天津農(nóng)業(yè)科學(xué),2011,17(3):118-121.

[2]任思竹,陳青君,王亞軍.白靈菇冷房養(yǎng)菌及出菇管理方法[J].內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)科技,2011(5):132-134.

[3]寧麗,郭立忠.白靈菇子實(shí)體的氨基酸及多糖含量的測(cè)定[J].青島農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2007,24(2):94-96.

[4]蘇雅勒琪琪格.白靈菇水溶性多糖和總黃酮的提取及含量測(cè)定[J].食用菌,2008(5):62-63.

[5]李正鵬,吳萍.白靈菇菌絲體與子實(shí)體有效成分分析研究[J].中國(guó)林副特產(chǎn),2008(8):7-9.

[6]李曉燕,蘭蓉,吳志明,等.白靈菇風(fēng)味成分的GC-MS分析[J].中國(guó)食用菌,2009,28(2):36-38.

[7]馬淑風(fēng),陳利梅.白靈菇胞外多糖的分離純化及其抗氧化活性的研究[J].江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2010,26(1):157-162.

[8]盛偉,方曉陽(yáng),吳萍.白靈菇、杏鮑菇、阿魏菇多糖體外抗氧化性研究[J].食品工業(yè)科技,2008,29(5):103-109.

[9]黃志龍.白靈菇菌絲生長(zhǎng)因子的研究 [J].福建林業(yè)科技,2008(1):48-50.

[10]姚太梅,李明,李守勉,等.溫度和pH值對(duì)白靈菇菌絲生長(zhǎng)的影響[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2008,36(6):1414-1446.

[11]賈洛,張紅,王廣耀.不同生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑對(duì)白靈菇菌絲生長(zhǎng)的影響[J].北方園藝,2009(11):226-227.

[12]周長(zhǎng)青,王秀峰,李玉.白靈菇生長(zhǎng)發(fā)育過程中胞外酶活性的變化規(guī)律[J].食用菌學(xué)報(bào),2008,15(2):64-68.

[13]毛欣欣,范濤.白靈菇胞外纖維素酶適宜作用條件的研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2010,38(12):6205-6206.

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