李娜

【摘要】隨著科學(xué)技術(shù)的迅猛發(fā)展，轉(zhuǎn)基因食品大量出現(xiàn)，并且大量涌入市場。轉(zhuǎn)基因食品到底對人們的健康有沒有影響，至今還沒有一個定論，因此，對轉(zhuǎn)基因食品的檢測受到了世界各國衛(wèi)生組織機構(gòu)的廣泛關(guān)注。

【關(guān)鍵詞】轉(zhuǎn)基因食品；檢測技術(shù)；進展

隨著現(xiàn)代科技的快速發(fā)展，以基因工程為代表的現(xiàn)代生物技術(shù)也取得了令人注目的成績，特別是與人們生活密切相關(guān)的轉(zhuǎn)基因食品，更是得到受到世界范圍的廣泛關(guān)注。自1996年至2005年，全球范圍內(nèi)轉(zhuǎn)基因作物的種植面積在10年內(nèi)，均以2位數(shù)速度，逐年遞增。轉(zhuǎn)基因技術(shù)的快速發(fā)展，一方面推動了生產(chǎn)力的快速發(fā)展；另一方面就轉(zhuǎn)基因食品的安全問題，也一直存在著爭議。轉(zhuǎn)基因技術(shù)是否會對人體產(chǎn)生不良反應(yīng)，以及它對生態(tài)環(huán)境是否會產(chǎn)生負面影響，科學(xué)界一直都爭論不休。

一、外源蛋白質(zhì)檢測法

（1）蛋白質(zhì)印跡法。這種檢測法主要是依據(jù)抗體抗原的差異性與特異性，并且與檢測多樣化復(fù)雜樣品中某種蛋白的方法相結(jié)合的一種檢測方法。蛋白質(zhì)印跡法是將靶蛋白特異性的非標記性抗體與靶蛋白中的抗原決定簇結(jié)合，然后再將蛋白質(zhì)125I-蛋白A的免疫球蛋白抗體檢測已結(jié)合上去的抗體。但是蛋白質(zhì)印跡法并不適用于定量分析，因為考慮到成本問題，以及操作難度問題，也不適用于高通量篩選檢測。（2）ELISA。ELISA檢測是把抗體與抗原的反應(yīng)特異性與酶對底物的高效催化作用有機的結(jié)合在一起，依據(jù)酶作用于底物之后所產(chǎn)生的顯色反應(yīng)來對轉(zhuǎn)基因成分進行鑒別。這種檢測方法具有方便、快捷、成本低的特點，存在的問題有：一是所導(dǎo)入的蛋白質(zhì)并不是在植物的所有組織中均有表達；二是復(fù)雜基質(zhì)對檢測結(jié)果構(gòu)成干擾；三是轉(zhuǎn)基因食品在加工的過程中，部分蛋白質(zhì)可能會發(fā)生降解反應(yīng)，所以ELISA檢測，僅適用于沒有加工過的原材料。（3）免疫試紙條法。與蛋白質(zhì)印跡法的主要區(qū)別是，免疫試紙條法是以硝化纖維來代替聚苯乙烯反應(yīng)板為固相載體來進行的。檢測結(jié)果在較短的時間內(nèi)就能夠得出，通常只需要5～10分鐘，主要問題是檢測的靈敏度不高，且一種免疫試紙條僅能為一種目的蛋白質(zhì)提高檢測，不能對食品具體的轉(zhuǎn)基因品系加以區(qū)分。

二、核酸水平檢驗法

（1）核酸印記法。具體操作是將被檢測樣品的DNA固定在尼龍膜上，再用帶有標記的核酸探針進行雜交，最后通過對標記探針的信號進行檢驗來確定樣品中是否含有轉(zhuǎn)基因DNA片段，這種檢驗方法的靈敏度是比較低的。（2）PCR檢測法。這一檢測方法主要是對目標序列進行擴增，再采取特殊方法對擴增產(chǎn)物進行檢驗。常見的PCR檢測法有定性PCR、復(fù)合定性PCR、PCR-ELISA、競爭定量PCR。一是定性PCR。這種檢測方法主要是對特異的DNA片段實施PCR擴增，然后將得到的擴增產(chǎn)物用瓊脂糖凝膠電泳進行分離，再運用凝膠成像系統(tǒng)對分離狀況進行觀測，定性PCR的靈敏度非常高。二是復(fù)合定性PCR。把兩對及其以上的引物放入PCR檢測系統(tǒng)之中進行擴增。三是PCR-ELISA。將帶有地高辛、生物素標記的引物放入PCR反應(yīng)系統(tǒng)之中，對目標DNA的序列加以擴增，并且把PCR產(chǎn)生物與固相板上特異性探針相結(jié)合，同時放入抗地高辛，使底物產(chǎn)生變色反應(yīng)，利用酶標儀測出相應(yīng)的吸光值，再加入標樣，描繪出標準曲線，最后利用這一曲線進行半定量分析。四是競爭定量PCR。濃度未知的待測DNA與已知濃度的內(nèi)標DNA在同一個反應(yīng)管內(nèi)進行PCR擴增，并將產(chǎn)物進行瓊脂糖凝膠電泳分離，再對電泳所產(chǎn)生的分離產(chǎn)物中的待測DNA與內(nèi)標DNA的產(chǎn)物條帶密度進行相關(guān)的線性回歸分析，從而得出兩種DNA的濃度等值點，以此對待測的DNA濃度進行定量分析。

三、其他檢測方法

隨著國內(nèi)外對食品安全問題的持續(xù)關(guān)注，轉(zhuǎn)基因食品的檢測技術(shù)在持續(xù)不斷的更新與發(fā)展，檢測的水平也不斷提高。這里面的近紅外波譜技術(shù)原本是對谷物進行溫度、脂肪含量、淀粉含量以及蛋白質(zhì)含量進行分析的一種常規(guī)辦法，而近幾年來，這一技術(shù)主要應(yīng)用于對轉(zhuǎn)基因作物的檢測領(lǐng)域，它的優(yōu)勢在于檢測過程中，不需要對被檢測物進行處理，操作簡便快捷，且能夠?qū)崿F(xiàn)自動化處理，主要問題是不能夠?qū)κ称返幕旌衔镞M行檢測。食品企業(yè)更是為了使產(chǎn)品走出國門，打入國際市場，站在全球戰(zhàn)略的層面上進行考慮，必須加大檢測轉(zhuǎn)基因食品的投入與研究。除了要在檢測技術(shù)上不斷更新，不斷應(yīng)用之外，還必須逐步健全我國的轉(zhuǎn)基因食品安全監(jiān)督運行機制，完善相關(guān)的法律制度，才能保證轉(zhuǎn)基因食品檢測向著高靈敏度、高品質(zhì)、低成本的方向發(fā)展，進入一個良性環(huán)境的狀態(tài)。

參 考 文 獻

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