山東省 青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院普外二科（青島266003）劉廣偉 盧 云

原發(fā)性肝癌（PHC）作為世界范圍內(nèi)常見的惡性腫瘤之一，病死率高且預(yù)后較差。血型因具有獨(dú)特且穩(wěn)定的遺傳標(biāo)記，可闡明疾病發(fā)生發(fā)展的相關(guān)機(jī)制。而淋巴細(xì)胞亞群作為衡量細(xì)胞免疫功能的重要指標(biāo)，在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。本實(shí)驗(yàn)通過研究ABO血型與原發(fā)性肝癌關(guān)系及其對(duì)淋巴細(xì)胞亞群的影響，以揭示ABO血型在原發(fā)性肝癌中的遺傳特性及不同血型的肝癌患者免疫功能的變化規(guī)律，為探索原發(fā)性肝癌的遺傳傾向提供臨床依據(jù)。

資料與方法

1 一般資料 病例組為2007～2010年，于本院行肝切除術(shù)并經(jīng)病理證實(shí)為原發(fā)性肝細(xì)胞肝癌（HCC）的患者140例，男124例，女16例，年齡40～69歲，平均55.48歲。均為漢族，且均有乙肝病史。術(shù)前測(cè)定ABO血型及T細(xì)胞亞群分型。對(duì)照組取自同期做健康體檢者340例，與我國(guó)漢族已調(diào)查的正常人群血型分布［1］相比無明顯差異（P＞0.05）。

2 檢查方法及試劑 兩組均采集晨起空腹血。ABO血型采用美國(guó)伽利略全自動(dòng)血型分析儀進(jìn)行鑒定。T淋巴細(xì)胞亞群檢測(cè)：取全血100μl，加入EDTAK抗凝，分別加入鼠抗人單克隆抗體CD3－FITC/CD4＋－PE；CD3－FITC/CD8＋－PE（美國(guó) Beckman Coulter公司生產(chǎn)）20μl，避光、室溫孵育30min，QPRET儀（美國(guó)Coulter公司）裂解紅細(xì)胞，采用美國(guó)Beckman Coulter公司生產(chǎn)的Epics－XL型流式細(xì)胞儀，氬離子激光488nm激發(fā)光源進(jìn)行檢測(cè)。應(yīng)用Expo 32ADC進(jìn)行免疫熒光數(shù)據(jù)分析。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS17.0分析相關(guān)數(shù)據(jù)。應(yīng)用logistic單因素回歸分析ABO血型與原發(fā)性肝癌的相關(guān)性及其相對(duì)危險(xiǎn)度，并計(jì)算其95%可信區(qū)間（CI）。相對(duì)危險(xiǎn)度：OR＝ad/bc，并采用卡方檢驗(yàn)驗(yàn)證其P值。采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)比較病例組與對(duì)照組各血型的免疫指標(biāo)變化，數(shù)據(jù)用±s表示，并計(jì)算其P值。

結(jié) 果

1 原發(fā)性肝癌血型分布 見表1。本地區(qū)健康人群血型分布呈A＞O＞B＞AB，病例組呈B＞O＞A＞AB。病例組中B型血患者居多（42.8%），與對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），A型血患者較對(duì)照組相比比例明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。O、AB型血無顯著差異（P＞0.05）。

表1 病例組與對(duì)照組ABO血型分布［例（%）］

2 ABO血型與原發(fā)性肝癌相關(guān)性及相對(duì)危險(xiǎn)度分析 見表2。肝癌與A型血、B型血有顯著相關(guān)性（P＜0.05），而O型血、AB型血與原發(fā)性肝癌相關(guān)性表現(xiàn)不明顯（P＞0.05）。B型血者發(fā)生原發(fā)性肝癌的相對(duì)危險(xiǎn)度OR＝2.14，且P＜0.01，表明B型血可能為原發(fā)性肝癌的危險(xiǎn)因素。A型血OR＝0.49，且P＜0.05，則表明A型血可能為原發(fā)性肝癌的保護(hù)性因素。

表2 肝癌與ABO血型相關(guān)性分析

3 不同ABO血型原發(fā)性肝癌患者T細(xì)胞亞群變化 見表3。與對(duì)照組相比，病例組B型血患者T細(xì)胞亞群變化有顯著性差異。CD4、CD8、CD4/CD8三項(xiàng)指標(biāo)較對(duì)照組的差異有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，CD4T細(xì)胞比例明顯降低，CD8T細(xì)胞比例明顯升高，CD4/CD8比值顯著下降。應(yīng)用方差分析，分別對(duì)病例組不同ABO血型的CD4、CD8、CD4/CD8三項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行分析，三項(xiàng)指標(biāo)均P＞0.05，說明不同血型間的CD4、CD8、CD4/CD8的差異不明顯，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。另外O型血患者的CD4較對(duì)照組呈顯著升高（P＜0.001）、AB型患者的CD8則明顯降低（P＜0.001），其余各組各指標(biāo)無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表3 病例組與對(duì)照組不同ABO血型T淋巴細(xì)胞亞群分布

討 論

自1900年Landsteine首次發(fā)現(xiàn)ABO血型以來，因其具有獨(dú)特且穩(wěn)定的遺傳特性，一直是本世紀(jì)研究的熱點(diǎn)。除紅細(xì)胞表面存在ABH血型物質(zhì)外，人體各種組織器官及體液（唾液、尿液及精液）中均可見其大量表達(dá)，正是由于血型物質(zhì)在基本結(jié)構(gòu)等方面所表現(xiàn)出的差異性，決定了人體組織器官及體液在化學(xué)結(jié)構(gòu)及功能上的差異。相關(guān)研究表明，在環(huán)境等其他因素介導(dǎo)下，人類表現(xiàn)出明顯的ABO血型系統(tǒng)多態(tài)性且ABO血型系統(tǒng)與某些疾病間存在必然的相關(guān)性［2－3］。通過研究英國(guó)胃癌的血型分布，Aird等［4］發(fā)現(xiàn)A型血與胃癌的發(fā)生高度相關(guān)。現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)，ABO血型與食管癌、胃癌、結(jié)腸癌［5］、胰腺癌［6］等多種消化道腫瘤存在普遍的相關(guān)性，但對(duì)于肝癌與血型的相關(guān)性研究較少。本實(shí)驗(yàn)通過回顧性分析本地區(qū)原發(fā)性肝癌患者的血型分布，并與正常人群血型分布情況做對(duì)比后發(fā)現(xiàn)肝癌在ABO血型方面的遺傳特性。本研究結(jié)果顯示：肝癌患者血型比例呈B＞O＞A＞AB分布，其中B型血患者比例為42.8%且與正常人群相比，比例明顯升高，OR＝2.14（P＜0.01），提示B型血可能為肝癌的危險(xiǎn)因素。而與正常人群相比A型血患者比例明顯下降（20%），OR＝0.49（P＜0.05），提示 A 型血在肝癌的發(fā)生中可能起保護(hù)性作用，這與國(guó)內(nèi)外研究［7－8］相一致，但同時(shí)也與當(dāng)前某些研究結(jié)果有異，對(duì)于安德森等［9］以ABH血型物質(zhì)解釋血型與腫瘤關(guān)系的理論本研究暫不支持。由于人體各種組織存在顯著的差異性，以安德森的理論來解釋全部消化道腫瘤與血型之間的關(guān)系，此理論是否適用于解釋原發(fā)性肝癌的合理性有待驗(yàn)證。同時(shí)受地區(qū)和民族之間差異影響，也可能會(huì)出現(xiàn)各種腫瘤在不同地區(qū)分布的差異。對(duì)于本研究結(jié)果，B型血人群對(duì)肝癌易感。由于B型血人群肝臟中有大量B型物質(zhì)存在，B型物質(zhì)分子中所特有的D－半乳糖是否可以促進(jìn)肝癌基因的激活，以致正常肝細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化調(diào)節(jié)失控，從而導(dǎo)致肝細(xì)胞癌變；同樣，A型血人群不易感，A型物質(zhì)中的N－乙酰－D－半乳糖胺結(jié)構(gòu)對(duì)正常肝細(xì)胞的癌變是否有抑制作用有待進(jìn)一步探討。國(guó)內(nèi)外研究顯示［10］B型血人群易發(fā)生HBV攜帶的乙型肝炎。由于乙型肝炎具有病程長(zhǎng)且不易根除的特點(diǎn)，病人常產(chǎn)生疲憊、厭倦、意志消沉等負(fù)性情緒，也可能是B型血促進(jìn)原發(fā)性肝癌發(fā)生的重要促進(jìn)因素之一。

細(xì)胞免疫功能的紊亂在肝癌的發(fā)生發(fā)展過程中起到極其重要的作用［11］，肝臟作為人體最大的免疫器官，使其成為腫瘤細(xì)胞的重要攻擊對(duì)象。本研究結(jié)果顯示，較其他血型相比，B型血肝癌患者更易出現(xiàn)免疫功能的紊亂，CD4、CD8、CD4/CD8三項(xiàng)指標(biāo)均有明顯改變。T淋巴細(xì)胞可分為Th細(xì)胞（CD4＋T細(xì)胞）和Ts細(xì)胞（CD8＋T細(xì)胞），T淋巴細(xì)胞亞群的檢測(cè)作為評(píng)價(jià)細(xì)胞免疫功能的重要指標(biāo)，可間接反映腫瘤患者細(xì)胞免疫功能的變化。Ts淋巴細(xì)胞通過釋放穿孔素和顆粒酶或者促使細(xì)胞凋亡等多種方式發(fā)揮抗腫瘤作用［12］。本研究中B型血患者較正常對(duì)照組CD8＋T細(xì)胞比例明顯降低，CD4＋T細(xì)胞比例明顯增加，CD4/CD8明顯降低。其可能原因?yàn)椋焊伟┌l(fā)生后，抗腫瘤的CD8＋T細(xì)胞明顯減少，功能降低，使輔助性的CD4＋T細(xì)胞功能亢進(jìn)，促進(jìn)IgE合成，刺激肝臟釋放組胺等血管活性物質(zhì)，使局部血流分布發(fā)生明顯變化，從而造成持續(xù)的肝損害以致肝癌的進(jìn)一步發(fā)展。同時(shí)，本研究還提示，O型血患者CD4＋T細(xì)胞明顯升高，而AB型血患者CD8＋T細(xì)胞明顯降低。綜合B型血患者結(jié)果分析，CD4＋T細(xì)胞的升高與A抗原或者A型物質(zhì)的缺乏是否相關(guān)，CD8＋T細(xì)胞的降低和B抗原或者B型物質(zhì)的存在是否有一定的相關(guān)性還需進(jìn)一步探討。

探討血型因素與肝癌的相關(guān)性，對(duì)于臨床的診斷、預(yù)防與治療有一定的指導(dǎo)意義。對(duì)于存在肝癌家族史、HBV感染等高危因素的B型血者，更應(yīng)重視對(duì)環(huán)境、飲食及社會(huì)心理方面的控制，從而降低發(fā)病的危險(xiǎn)。同時(shí)，免疫功能的變化在肝癌的發(fā)生發(fā)展中起到極其重要的作用，由于不同血型間免疫功能存在明顯的差異性，是否可以通過研究某些針對(duì)A、B、H血型物質(zhì)的藥物或者針對(duì)ABO血型基因的進(jìn)行干預(yù)，從而改善患者的免疫功能，從而達(dá)到抑制腫瘤發(fā)生發(fā)展的效果有待進(jìn)一步的深入研究。

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