李在坡 (連云港市第一人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，江蘇 連云港 222002)

阿爾茨海默病(AD)患者的海馬體積(HVs)和腦脊液(CSF)中tau蛋白標(biāo)志物與神經(jīng)原纖維纏結(jié)沉積相關(guān)〔1，2〕，推測(cè)CSF tau蛋白或CSF tau高磷酸化蛋白(P－tau)與HVs可能相關(guān);但有文獻(xiàn)報(bào)道了與此推測(cè)沖突的神經(jīng)影像學(xué)研究結(jié)果〔3，4〕，也有研究結(jié)果證明AD患者體內(nèi)CSF標(biāo)志物與HVs并無(wú)相關(guān)性〔5〕。本文旨在分析CSF生物標(biāo)志物與大腦體積或HVs的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集我院2007年7月至2011年7月診治的AD患者36例，平均年齡(62.6±8.1)歲，采用美國(guó)國(guó)立神經(jīng)病語(yǔ)言障礙卒中研究所(NINCDS)和AD及相關(guān)疾病協(xié)會(huì)(ADRDA)建立的 NINCDS－ADRDA 新診斷標(biāo)準(zhǔn)〔6〕，入選標(biāo)準(zhǔn):(1)進(jìn)展期記憶障礙患者;(2)AD CSF得分＜1〔7〕;(3)臨床癡呆評(píng)定量表(CDR)得分＞0。排除標(biāo)準(zhǔn):(1)具有臨床或影像學(xué)證據(jù)局灶性病變的患者;(2)嚴(yán)重皮質(zhì)或皮下血管病變;(3)嚴(yán)重的抑郁癥。收集符合標(biāo)準(zhǔn)的潛伏期、輕度認(rèn)知能力受損和癡呆三個(gè)時(shí)期患者的全部臨床檢查、神經(jīng)心理學(xué)評(píng)估結(jié)果、腦部MRI、CSF 標(biāo)志物〔Aβ42，總 tau 蛋白(T－tau)和 P－tau〕檢測(cè)結(jié)果。

1.2 方法

1.2.1 CSF生物標(biāo)志物檢測(cè) 通過(guò)腰椎穿刺(LP)獲取患者CSF樣本，4℃ 1 500 r/min離心10 min分離細(xì)胞，取上清至0.4 ml EP管中，－80℃保存。采用雙抗夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA)(Innogenetics，Gent，Belgium)測(cè)定樣本的 CSF 生物標(biāo)志物含量。

1.2.2 核磁共振成像(MRI) 通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)三維序列法獲得T1加權(quán)核磁共振圖像。見(jiàn)表1。

1.2.3 自動(dòng)化HVs計(jì)算 采用SPM5分割軟件自動(dòng)化程序方法測(cè)量患者HVs、灰質(zhì)、白質(zhì)和全腦體積，并通過(guò)頭部大小均一化HVs。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)分布的正態(tài)性采用Shapiro－Wilk檢驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)分析采用參數(shù)化檢驗(yàn)，相關(guān)性研究采用Pearson相關(guān)系數(shù)檢驗(yàn)。

表1 核磁共振儀器參數(shù)統(tǒng)計(jì)表

2 結(jié)果

2.1 簡(jiǎn)易精神狀態(tài)評(píng)分(MMSE)、CSF T－tau、P－tau、HVs 水平 36例患者M(jìn)MSE評(píng)分為(19.2±6.3)分，臨床CDR分布:0.5分6例，1分10例，1.5分10例，2分10例。CSF中T－tau平均含量為(506.52±160.22)pg/ml(其中 23例 T－tau＞450 pg/ml)，P－tau平均含量為(82.42±19.59)pg/ml(其中32例P－tau＞60 pg/ml)。左右平均HVs無(wú)明顯不對(duì)稱(chēng)〔左HV為(2.22±0.49)cm3;右HVs為(2.21±0.50)cm3〕。平均全血黏度為(1 021±140.47)cm3。

2.2 CSF生物標(biāo)志物與神經(jīng)影像學(xué)變量相關(guān)性分析 Pearson相關(guān)系數(shù)檢驗(yàn)結(jié)果顯示，左側(cè)HVs與T－tau含量呈現(xiàn)顯著的負(fù)相關(guān)(R= －0.53，P＜0.001)，與 P－tau同樣呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)(R=－0.56)。左右腦HVs平均值與P－tau呈現(xiàn)顯著負(fù)相關(guān)(P=0.001;R=－0.52)，見(jiàn)圖1;但與 T－tau無(wú)顯著相關(guān)性，見(jiàn)圖2。HVs與Aβ42濃度無(wú)顯著相關(guān)性。歸一化全腦體積與Aβ42，T－tau，P－tau，T－tau/Aβ42，P－tau/Aβ42無(wú)相關(guān)性。見(jiàn)表 2。

圖2 歸一化平均海馬體積與Aβ42相關(guān)性分析

表2 CSF生物標(biāo)志物與神經(jīng)影像學(xué)變量相關(guān)性分析

3 討論

本研究通過(guò)對(duì)潛伏期、進(jìn)展期AD患者的CSF生物標(biāo)志物和HVs萎縮程度的相關(guān)性研究，以及短間隔進(jìn)行MRI和腰椎穿刺等方法，確定了CSF T－tau和P－tau含量水平，而非Aβ42與AD患者HVs具有顯著相關(guān)性，且與近期相關(guān)性研究部分相同。研究還表明，左側(cè)HVs與CSF T－tau和P－tau具有更好的相關(guān)性，這一結(jié)果與文獻(xiàn)〔2，8〕報(bào)道相同，但其原因目前并不清楚。

綜上所述，本研究結(jié)果對(duì)前期假設(shè)提供了佐證，在臨床AD患者中，CSF P－tau的高含量預(yù)示由于神經(jīng)元纖維纏結(jié)造成神經(jīng)元死亡過(guò)程的發(fā)生，CSF tau標(biāo)志物與神經(jīng)元萎縮具有顯著相關(guān)性。

1 Csernansky JG，Hamstra J，Wang L，et al.Correlations between antemortem hippocampal volume and postmortem neuropathology in AD subjects〔J〕.Alzheimer Dis Assoc Disord，2004;18(2):190－5.

2 Tapiola T，Alafuzoff I，Herukka，et al.Cerebrospinal fluid{beta}－amyloid 42and tau proteins as biomarkers of Alzheimer－type pathologic changes in the brain〔J〕.Arch Neurol，2009;66(4):382－9.

3 Apostolova LG，Hwang KS，Andrawis JP，et al.Alzheimer's disease neuroimaging initiative，3D PIB and CSF biomarker associations with hippocampal atrophy in ADNI subjects〔J〕.Neurobiol Aging，2010;31(110):1284－303.

4 Thomann PA，Kaiser E，Sch?nknecht P，et al.Association of total tau and phosphorylated tau 181protein levels in cerebrospinal fluid with cerebral atrophy in mild cognitive impairment and Alzheimer disease〔J〕.J Psychiatry Neurosci，2009;34(2):136－42.

5 Fagan AM，Head D，Shah AR，et al.Decreased cerebrospinal fluid Abeta(42)correlates with brain atrophy in cognitively normal elderly〔J〕.Ann Neurol，2009;65(2):176－83.

6 Dubois B，F(xiàn)eldman HH，Jacova C，et al.Research criteria for the diagnosis of Alzheimer's disease:revising the NINCDS－ADRDA criteria〔J〕.Lancet Neurol，2007;6:734－46.

7 Visser PJ，Verhey F，Knol DL，et al.Prevalence and prognostic value of CSF markers of Alzheimer's disease pathology in patients with subjective cognitive impairment or mild cognitive impairment in the DESCRIPA study:a prospective cohort study〔J〕.Lancet Neurol，2009;8(5):619－27.

8 Jack CR，Jr Dickson DW，Parisi JE，et al.Antemortem MRI findings correlate with hippocampal neuropathology in typical aging and dementia〔J〕.Neurology，2002;58(6):750－7.