吳風(fēng)云 朱佳芹

湖北省黃石市二醫(yī)院燒傷皮膚病藥物開發(fā)研究所 435002

紅藥膏能否對(duì)健康和磨損皮膚引起急性毒性與皮膚刺激性？現(xiàn)將對(duì)大白兔的試驗(yàn)過(guò)程報(bào)告如下。

1 皮膚的急性毒性試驗(yàn)

1.1 材料

1.1.1 動(dòng)物：健康日本大耳兔15只，成年，雌雄不拘，體重（2.48±0.04）kg，由黃石衛(wèi)校動(dòng)物室和同濟(jì)醫(yī)大動(dòng)物室提供。

1.1.2 藥品：紅藥膏是本試驗(yàn)的主要研究對(duì)象，分為高銀紅藥膏（含SD－Ag 4%）和低銀紅藥膏（含SD－Ag 2%，與現(xiàn)用的紅藥膏相當(dāng)），都是由本院燒傷皮膚病藥物開發(fā)研究所配制和提供。賦形劑組（又稱對(duì)照組）為黃凡士林，是由國(guó)營(yíng)南昌揚(yáng)子洲制藥廠分裝等。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 分組：將15只大白兔隨機(jī)分為3組。1組：涂高銀紅藥膏，稱高銀組；2組：涂低銀紅藥膏，稱低銀組；3組：涂黃凡士林，稱賦形劑組（作為對(duì)照組）。每組都由5只大白兔組成。

1.2.2 試驗(yàn)經(jīng)過(guò)：試驗(yàn)時(shí)，常規(guī)對(duì)每只受試大白兔應(yīng)用10%硫化鈉溶液給大白兔右側(cè)背部皮膚脫毛約5×10cm2＝50cm2，相當(dāng)于體表面積10%，在脫毛區(qū)內(nèi)每天按組別種類涂藥2次，0.2g／次，涂藥后，應(yīng)用背心式包布［1］和無(wú)菌敷料妥當(dāng)包扎、固定和保護(hù)，防止受試區(qū)表面上的藥品被白兔所舔食，導(dǎo)致試驗(yàn)失敗。分籠單獨(dú)飼養(yǎng)，連續(xù)觀察受試大白兔1周。觀察內(nèi)容：活動(dòng)、皮毛光澤、飲食、體重、體溫和死亡數(shù)。如無(wú)毒性反應(yīng)，再在左側(cè)背部皮膚以10%硫化鈉脫毛50cm2，并應(yīng)用細(xì)砂紙（鉆石牌耐水砂紙380號(hào)），摩擦該處皮膚，直到有密集性出血點(diǎn)為止，立即在該處按上述組別涂藥0.2g／次，2次／d，觀察指標(biāo)同上，連續(xù)觀察1周，并與對(duì)照組比較。因此，每只受試大白兔前后共觀察14d（2周）。

1.3 結(jié)果 自高銀和低銀紅藥膏外用于大白兔的健康和磨損皮膚后，對(duì)其行動(dòng)、飲食、皮毛光澤、體溫和體重（見表1）連續(xù)測(cè)定和觀察14d。發(fā)現(xiàn)紅藥膏對(duì)健康和磨損皮膚均無(wú)刺激性和任何不良影響。受試動(dòng)物無(wú)1只死亡，也未出現(xiàn)任何不良反應(yīng)，體溫均在正常范圍內(nèi)（38.5～39.5℃），各方面均與對(duì)照組大白兔的表現(xiàn)無(wú)任何差別。本實(shí)驗(yàn)研究表明，高和低銀紅藥膏（即現(xiàn)用的紅藥膏）涂抹在大白兔的健康和磨損皮膚上，經(jīng)過(guò)14d觀察，對(duì)受試大白兔均未引起任何急性中毒反應(yīng)和皮膚刺激反應(yīng)。說(shuō)明現(xiàn)在已經(jīng)在臨床使用多年的紅藥膏（即2%低銀紅藥膏）對(duì)全身無(wú)吸收中毒，對(duì)創(chuàng)面和周圍皮膚也均無(wú)刺激性［2，3］。

表1 紅藥膏涂于完整和損傷兔皮對(duì)體重的影響（kg，，n＝5）

表1 紅藥膏涂于完整和損傷兔皮對(duì)體重的影響（kg，，n＝5）

注：△表示3組試驗(yàn)動(dòng)物涂藥后體重與涂藥前相比P＞0.05，其差別無(wú)顯著意義。

2 皮膚刺激試驗(yàn)

2.1 材料

2.1.1 動(dòng)物：日本大耳白兔6只，雌雄不拘，體重（2.46±0.45）kg，由黃石衛(wèi)校動(dòng)物室和同濟(jì)醫(yī)大動(dòng)物室分別提供。

2.1.2 藥品：供做試驗(yàn)的紅藥膏，分為高銀和低銀紅藥膏兩種，高銀紅藥膏含4%SD－Ag，低銀紅藥膏含2%SD－Ag（代表現(xiàn)用的紅藥膏）。二者均由本院燒傷皮膚病研究所提供，賦形劑為黃凡士林，由國(guó)營(yíng)南昌揚(yáng)子洲制藥廠分裝和提供等。

2.2 試驗(yàn)方法

2.2.1 試驗(yàn)動(dòng)物脫毛和分組：將6只大白兔的背部延伸到側(cè)腹壁皮膚，應(yīng)用10%硫化鈉溶液，對(duì)稱脫毛4塊，每塊為6×8.4cm2＝50cm2，脫毛時(shí)注意勿擦破皮膚，脫毛后第2天（24h后）在左側(cè)背部的1區(qū)和2區(qū)分別涂高銀和低銀紅藥膏各0.1g，前者歸納到本試驗(yàn)的高銀組，后者被歸納到本試驗(yàn)組的低銀組，右側(cè)背部2區(qū)涂賦形劑黃凡士林，被歸納入賦形劑組或?qū)φ战M。右側(cè)背部的4區(qū)皮膚留為空白對(duì)比區(qū)，專供觀察和對(duì)比時(shí)參考。

2.2.2 試驗(yàn)經(jīng)過(guò)。在每次涂藥完畢后2h內(nèi)，每隔30min觀察皮膚反應(yīng)1次，此后便立即予以背心式包扎［1］，妥為保護(hù)和固定。在涂藥24h后，去除全部包扎，并用溫水清洗藥物和賦形劑觀察各試區(qū)皮膚的變化，如發(fā)現(xiàn)局部無(wú)紅斑、發(fā)疹、水腫和疼痛等異常表現(xiàn)，便繼續(xù)每天涂藥1次。一共6d于第7天停藥，并去除包扎。觀察涂藥7d后皮膚反應(yīng)，若仍無(wú)紅斑、發(fā)疹、水腫和疼痛等異常表現(xiàn)，便進(jìn)一步在各試區(qū)用細(xì)砂紙（鉆石牌耐水砂紙38號(hào)），磨擦皮膚造成損傷，并以上述同樣方法涂藥和連續(xù)7d觀察各試區(qū)皮膚有否紅斑、發(fā)疹、水腫和疼痛等出現(xiàn)。

2.3 結(jié)果 經(jīng)過(guò)在各試區(qū)內(nèi)連續(xù)每天涂藥1次共7d，觀察各試區(qū)皮膚無(wú)水腫、發(fā)疹和紅斑。在停藥后24h和48h，局部仍無(wú)反應(yīng)。各試區(qū)皮膚在擦傷后連續(xù)涂藥7d，觀察24h和48h也均未發(fā)現(xiàn)局部有明顯的紅斑、發(fā)疹和水腫，因此，皮膚刺激反應(yīng)為0，均小于規(guī)定刺激指數(shù)（見表2、3），體溫也均在正常范圍（38.5～39.5℃）以內(nèi)。提示紅藥膏無(wú)皮膚刺激性合乎要求［2～4］。

表2 文獻(xiàn)中皮膚刺激反應(yīng)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

表3 紅藥膏對(duì)兔皮膚的刺激試驗(yàn)結(jié)果

［1］吳風(fēng)云，魯立新，丁冬琴.藥物實(shí)驗(yàn)中動(dòng)物創(chuàng)面包扎方法的改進(jìn)〔J〕.中華燒傷雜志，2004，20（2）：108.

［2］南京藥學(xué)院藥劑學(xué)教研組，編著.藥劑學(xué)〔M〕.第2版.北京：人民衛(wèi)生出版社，1985：853－857.

［3］陳奇，主編.中藥藥理研究方法學(xué)〔M〕.北京：人民衛(wèi)生出版社，1993：164－165.

［4］衛(wèi)生部藥政管理局，編.中藥新藥研究指南〔M〕.衛(wèi)生部藥政管理局，1994：230－235.