龔卉卉,汪 娟,孫 莉,陸 葉
(蘇州大學(xué)藥學(xué)院中藥鑒定研究室,江蘇蘇州 215123)
車(chē)前子為常用中藥材,來(lái)源為車(chē)前科植物車(chē)前(Plantago asiatica L.)或平車(chē)前(Plantago depressssa Wiltd.)的干燥成熟種子。具有清熱利尿通淋,滲濕止瀉,明目,祛痰的功效[1]。但是由于車(chē)前子細(xì)小色深,偽品多及摻偽現(xiàn)象嚴(yán)重[2]。并且車(chē)前子肉眼難辨真?zhèn)?。常?jiàn)的偽品有荊芥子[3]、炒葶藶子[4-5]、夏枯草子、青葙子、茺蔚子、菟絲子[6]等。近年來(lái)關(guān)于車(chē)前子的鑒別研究多從來(lái)源[7]角度、外觀研究其性狀特征[8]、顯微鑒別研究其內(nèi)部構(gòu)造的區(qū)別、粉末組織構(gòu)造以及從理化角度(顏色反應(yīng)、紫外吸收光譜、薄層層析)研究成分的區(qū)別等。
近年來(lái)隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,新設(shè)備、新技術(shù)的應(yīng)用,透射電鏡、掃描電鏡、X射線能譜分析等也都用在藥材的微觀鑒別上。其中應(yīng)用最多的是掃描電子顯微鏡。它能使物質(zhì)的圖像呈現(xiàn)顯著的表面立體結(jié)構(gòu)特征,放大倍數(shù)變化范圍大,樣品制備簡(jiǎn)單,不需超薄切片,有的粉末和某些新鮮材料可直接觀察。在中藥材鑒別方面,對(duì)于很難區(qū)別的同屬多種藥材的表面細(xì)微特征,如種皮和果皮的紋飾,莖、葉表皮組織及附屬的毛茸等結(jié)構(gòu),個(gè)別組織、細(xì)胞以及后含物中晶體等都有應(yīng)用[9-12]。尤其對(duì)于細(xì)小的果實(shí)、種子類(lèi)藥材,傳統(tǒng)的性狀鑒別、顯微鑒別難以區(qū)分真?zhèn)?、控制其質(zhì)量。因?yàn)楣麑?shí)、種子細(xì)小,性狀鑒別和內(nèi)部構(gòu)造的組織切片都有一定的困難,因而應(yīng)用掃描電子顯微鏡技術(shù)可以解決傳統(tǒng)方法難以準(zhǔn)確區(qū)分辨別的難題。本文分別通過(guò)掃描電鏡和體視顯微鏡來(lái)觀察這三種藥材的特征,三種藥材種皮表面特征以及大小可進(jìn)行區(qū)別,為保障車(chē)前子藥材的質(zhì)量提供鑒別依據(jù)。尤其藥材車(chē)前子與葶藶子、菟絲子三種藥材的功效差別很大。葶藶子具有瀉肺平喘,行水消腫的功效;菟絲子具有補(bǔ)益肝腎,固精縮尿,安胎,明目,止瀉的功效。一旦混用對(duì)治療疾病非常不利,還可能導(dǎo)致嚴(yán)重的副作用。
三種藥材分別購(gòu)自江蘇省內(nèi)一些藥店,具體時(shí)間地點(diǎn)見(jiàn)表一。以上種子標(biāo)本保存于本院中藥標(biāo)本室。
表1 3種藥材購(gòu)買(mǎi)或采集地點(diǎn)及時(shí)間
樣品經(jīng)50%乙醇超聲清洗2 min,依次經(jīng)60%、70%、85%、90%、100%乙醇逐級(jí)脫水,干燥后用雙面膠固定在樣品臺(tái)上,真空噴鍍金膜,用日本日立公司的S-4700型掃描電鏡觀察拍照。每種藥材隨機(jī)取三粒進(jìn)行觀察及測(cè)量長(zhǎng)短徑。
直接將藥材種子X(jué)TL-340體視顯微鏡(上海長(zhǎng)方光儀器有限公司)載物臺(tái)上,調(diào)整合適視野進(jìn)行觀察并拍照。
3.1.1 車(chē)前子 車(chē)前種子呈長(zhǎng)圓形稍扁,或類(lèi)三角形。邊緣較薄,表面棕黑色至棕色,略粗糙不平。體視顯微鏡鏡下可見(jiàn)背面微隆起,腹面略平坦,中央或一端有灰白色類(lèi)圓形凹陷的種臍。平車(chē)前種子呈扁的長(zhǎng)橢圓形,少數(shù)呈類(lèi)三角形,可見(jiàn)四邊形或五邊形。表面黑棕色或棕色,背面略隆起,腹面較平坦,中央有明顯的白色凹點(diǎn)狀種臍。(圖1AB)
3.1.2 葶藶子 南葶藶子呈長(zhǎng)圓形略扁,表面棕色或紅棕色,微有光澤,具縱溝2條,其中1條長(zhǎng)且較明顯。一端鈍圓,另端微凹或較平截,種臍類(lèi)白色,位于凹入端或平截處。北葶藶子呈扁卵形,一端鈍圓,另端尖而微凹,種臍位于凹入端。(圖1C)。
3.1.3 菟絲子 呈類(lèi)球形,有的可見(jiàn)種皮一側(cè)下延成鼻狀突起。表面灰棕色至棕褐色,粗糙,種臍線形或扁圓形微凹。(圖1D)。
圖1 3種藥材的體視顯微鏡觀察結(jié)果
3.2.1 車(chē)前子 車(chē)前子呈類(lèi)長(zhǎng)圓形,或類(lèi)三角形。種皮表面皺縮不平,呈波浪狀。長(zhǎng)1.05~2.31 mm,寬0.871~1.17 mm。平車(chē)前種子呈扁的長(zhǎng)橢圓形,少數(shù)呈類(lèi)三角形,可見(jiàn)四邊形或五邊形。種皮表面波浪狀明顯。長(zhǎng) 1.17 ~1.72 mm,寬0.732 ~1.11 mm。(圖2AB)
圖2 3種藥材掃描電鏡觀察結(jié)果
3.2.2 葶藶子 南葶藶子,長(zhǎng)橢圓形。長(zhǎng)約0.872~1.01 mm,寬 0.352 ~0.586 mm。種皮表面呈淺網(wǎng)眼狀,種臍在一側(cè)呈不規(guī)則凹陷。兩端網(wǎng)眼略深。北葶藶子,卵形。長(zhǎng)0.947 ~1.15 mm,寬0.512 ~0.623 mm。(圖2CD)
3.2.3 菟絲子 類(lèi)圓形,種皮表面呈深網(wǎng)眼狀。長(zhǎng)1.14 ~1.75 mm,寬0.884 ~1.425 mm(圖 3E)
掃描電鏡下直接測(cè)量三種藥材各三粒的長(zhǎng)徑、短徑。根據(jù)長(zhǎng)短徑及種皮表面特征鑒定藥材的來(lái)源,結(jié)果見(jiàn)表2。
表2 車(chē)前子及混偽品長(zhǎng)短徑測(cè)量及來(lái)源鑒定
通過(guò)掃描電鏡觀察,三種藥材可以完全根據(jù)種皮特征進(jìn)行區(qū)分。并且可以鑒定出具體的來(lái)源。這與1992年劉君哲[13]用掃描電鏡研究了車(chē)前屬植物種子的形態(tài),并認(rèn)為種子的形狀和種皮的紋飾可以作為分類(lèi)依據(jù)之一的觀點(diǎn)相同。我們的研究結(jié)果表明藥材菟絲子中有偽品。例如,如皋春天大藥房菟絲子中摻有土粒較多,鹽城市東方紅大藥房菟絲子中也有土粒,但較少。車(chē)前子有車(chē)前與平車(chē)前種子混在一起的現(xiàn)象,蘇州萬(wàn)春堂大藥房,鹽城健康之家大藥房的藥材車(chē)前子中兩種車(chē)前的來(lái)源都有。葶藶子也有南、北葶藶子混在一起的現(xiàn)象,鹽城市東方紅大藥房的兩種葶藶子也都有。
另外,也有文章報(bào)道可以通過(guò)菟絲子藥材種臍來(lái)區(qū)分[14],但是因?yàn)榘衍?chē)前子固定在樣品臺(tái)上后不一定能觀察到種臍,所以未能以此特征來(lái)鑒別。車(chē)前子及平車(chē)前子的種皮紋飾為波浪狀,也不能進(jìn)行定量鑒別。而葶藶子和菟絲子的網(wǎng)眼狀紋飾可以用單位面積的網(wǎng)眼數(shù)來(lái)定量區(qū)分。
而且,通過(guò)本文的研究基本對(duì)江蘇省部分藥店的車(chē)前子、葶藶子、菟絲子三種藥材的來(lái)源情況有了了解,可以指導(dǎo)省內(nèi)對(duì)這三種藥材的使用。
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