魏 云 吳愛(ài)萍 楊世平

湖南醫(yī)藥工業(yè)研究所，湖南長(zhǎng)沙 410014

慢性盆腔炎（chronic pelvic inflammatory disease）是婦科常見疾病之一，主要表現(xiàn)為低熱、易疲乏、下腹墜痛、腰骶疼痛、白帶增多、盆腔包塊等癥，是造成慢性盆腔疼痛、異位妊娠和不孕的重要原因，其病情纏綿，易反復(fù)發(fā)作，嚴(yán)重影響婦女健康。婦炎康是由金剛藤、大血藤、丹參、地錦草、莪術(shù)、當(dāng)歸等中藥組成的復(fù)方制劑，清熱解毒、活血利濕、祛瘀散結(jié)，用于濕熱瘀結(jié)所致的帶下病、腹痛、癥瘕等癥；慢性盆腔炎、陰道炎和附件炎等婦科炎癥見上述癥狀者。為探討婦炎康治療慢性盆腔炎的作用及其機(jī)制，進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)研究。

1 材料與方法

1.1 所用藥物

婦炎康由湖南醫(yī)藥工業(yè)研究所提供，批號(hào)：090802。給藥前用蒸餾水配制成濃度為0.12 g生藥/mL，0.24 g生藥/mL，0.48 g生藥/mL。婦科千金片（Z43020027）由株洲千金藥業(yè)股份有限公司提供，批號(hào)：200904007。給藥前用蒸餾水配制成濃度為0.72 g生藥/mL。

1.2 所用動(dòng)物

SD大鼠，60只，雌性，體重200～220 g；由湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供，合格證號(hào)為：SCXK（湘）2009-0004。動(dòng)物使用許可證號(hào)為：SYXK（湘）2010-0002。

1.3 所用菌種

混合細(xì)菌懸液（大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、乙型溶血性鏈球菌以2∶1∶1的比例，濃度為3×109/mL的混合細(xì)菌懸液），由湖南中醫(yī)藥大學(xué)病原免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供。

1.4 儀器與試劑

SA-6000自動(dòng)血流變測(cè)試儀，北京賽科希德科技發(fā)展有限公司。AB1345-S分析天平，瑞士梅特勒公司產(chǎn)品。OLYMPUS光學(xué)顯微鏡。

1.5 實(shí)驗(yàn)方法

按文獻(xiàn)[1-5]方法，SD大鼠，60只，雌性，體重200～220 g，隨機(jī)分為6組，每組10只。（1）空白對(duì)照組（給予蒸餾水）；（2）損傷模型組（給予蒸餾水）；（3）婦科千金片組（7.20 g生藥/kg，相當(dāng)于人用等效劑量的2倍）；（4）～（6）婦炎康低、中、高劑量組（1.20、2.40、4.80 g生藥 /kg，相當(dāng)于人用等效劑量的 0.5、1、2倍）。大鼠腹腔注射10%烏拉坦10 mL/kg麻醉，待麻醉生效后，將大鼠固定于操縱臺(tái)上，用1 mL注射器套上10號(hào)針頭，（2）～（6）組抽取0.2 mL混合細(xì)菌懸液（大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、乙型溶血性鏈球菌以2∶1∶1的比例，濃度為3×109/mL的混合細(xì)菌懸液），從大鼠陰道口插入約2 cm，然后將菌液注入大鼠子宮左右兩側(cè)內(nèi)各0.1 mL，在注入菌液之前用注射器機(jī)械損傷子宮內(nèi)膜組織。（1）組空白對(duì)照組按上述步驟用1 mL注射器抽取0.2 mL蒸餾水，注入子宮雙側(cè)內(nèi)，以上各組注畢后用明膠海棉填塞陰道口，防止菌液或液體溢出。造模后動(dòng)物在溫度22～25 ℃，濕度50%～60%條件下正常飼養(yǎng)，次日開始灌胃給藥，灌胃體積均為10 mL/kg體重，連續(xù)20 d。各組大鼠于末次給藥12 h后（禁食、不禁水），腹主動(dòng)脈取血測(cè)定血液流變學(xué)各項(xiàng)指標(biāo)，包括全血黏度（低切、中切、高切）和血漿黏度。計(jì)算各組平均值及標(biāo)準(zhǔn)差，用t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，比較各組之間差異的顯著性。然后處死大鼠，取子宮置10%甲醛中固定，乙醇脫水，石蠟包埋，切片制成4～5 μm的組織薄片，HE染色，中性樹膠封片，光學(xué)顯微鏡下觀察組織病理變化。按照炎癥細(xì)胞的量及發(fā)生粘連的程度將炎癥情況分為正常、輕度、中度及重度 4 級(jí)，用 “- ”“+”“+ +”“++ +”來(lái)表示。其中，“-”基本無(wú)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)；“+”出現(xiàn)少量的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)；“++”表示出現(xiàn)大量的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，并有少量粘連；“+ + +”表示出現(xiàn)大量的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，并有大量粘連。用秩和檢驗(yàn)比較藥物組與模型對(duì)照組差異的顯著性。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)慢性盆腔炎模型大鼠子宮組織形態(tài)學(xué)的影響

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，空白對(duì)照組：子宮內(nèi)膜上皮排列正常，固有層內(nèi)腺體及組織未見改變，僅見極少量炎細(xì)胞（圖1）。損傷模型組：子宮內(nèi)膜上皮排列紊亂，細(xì)胞呈空泡樣變，固有層內(nèi)可見大量炎性細(xì)胞，子宮腔內(nèi)有分泌物（圖2）。婦科千金片組：子宮內(nèi)膜上皮基本正常，少量細(xì)胞有空泡樣變，固有層腺體正常，但可見較多炎性細(xì)胞浸潤(rùn)（圖3）。婦炎康低劑量組：子宮內(nèi)膜上皮基本正常，固有層可見較多的炎性細(xì)胞，腺體基本正常，子宮腔內(nèi)有少量分泌物（圖4）。婦炎康中劑量組：子宮內(nèi)膜上皮排列正常，固有層內(nèi)腺體及組織正常，僅見少量炎性細(xì)胞（圖5）。婦炎康高劑量組：子宮內(nèi)膜上皮基本正常，少部分細(xì)胞有空泡樣變，固有層組織正常，僅見極少量炎性細(xì)胞（圖6）。上述鏡檢結(jié)果顯示，以混合細(xì)菌懸液給大鼠子宮接種所致慢性盆腔炎模型成功。婦科千金片組（7.20 g生藥/kg）及婦炎康組（1.20～4.80 g生藥/kg）與損傷模型組比較，病變程度明顯減輕（P＜0.01）。見表1。

圖1 空白對(duì)照組：子宮內(nèi)膜上皮排列正常，固有層內(nèi)腺體及組織未見改變，僅見極少量炎性細(xì)胞。（HE染色，250×）

圖2 損傷模型組：子宮內(nèi)膜上皮排列紊亂，細(xì)胞呈空泡樣變，固有層內(nèi)可見大量炎性細(xì)胞，子宮腔內(nèi)有分泌物。（HE染色，250×）

圖3 婦科千金片組：子宮內(nèi)膜上皮基本正常，少量細(xì)胞有空泡樣變，固有層腺體正常，但可見較多炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。（HE染色，250×）

圖4 婦炎康低劑量組：子宮內(nèi)膜上皮基本正常，固有層可見較多的炎性細(xì)胞，腺體基本正常，子宮腔內(nèi)有少量分泌物。（HE染色，250×）

圖5 婦炎康中劑量組：子宮內(nèi)膜上皮排列正常，固有層內(nèi)腺體及組織正常，僅見少量炎性細(xì)胞。（HE染色，250×）

圖6 婦炎康高劑量組：子宮內(nèi)膜上皮基本正常，少部分細(xì)胞有空泡樣變，固有層組織正常，僅見極少量炎性細(xì)胞。（HE染色，250×）

表1 對(duì)慢性盆腔炎模型大鼠子宮病變程度的影響（n=10，± s）

表1 對(duì)慢性盆腔炎模型大鼠子宮病變程度的影響（n=10，± s）

注：與損傷模型組比較，a：P＜0.01；與婦科千金片組比較，b：P＞0.05

組別 劑量 子宮病變程度- + ++ +++ P值空白對(duì)照組 10 mL/kg 10 0 0 0 a損傷模型組 10 mL/kg 0 2 6 2婦科千金片 7.20 g生藥/kg 1 6 3 0 a婦炎康 1.20 g生藥/kg 0 6 4 0 ab婦炎康 2.40 g生藥/kg 1 6 3 0 ab婦炎康 4.80 g生藥/kg 2 6 2 0 ab

2.2 對(duì)慢性盆腔炎模型大鼠血液流變性的影響

損傷模型組與正常對(duì)照組比較，全血黏度及血漿黏度升高，提示動(dòng)物血液黏度增加。婦炎康（1.20 g生藥/kg）與損傷模型組比較，全血黏度降低（P＜0.05），婦炎康（2.40～4.80 g生藥/kg）與損傷模型組比較，全血黏度及血漿黏度均降低（P＜0.05或P＜0.01），婦科千金片（7.20 g生藥/kg）與損傷模型組比較，全血黏度及血漿黏度降低（P＜0.05），提示婦炎康具有活血化瘀的作用。見表2。

表2 對(duì)大鼠慢性盆腔炎血液流變性的影響（n=10，± s）

表2 對(duì)大鼠慢性盆腔炎血液流變性的影響（n=10，± s）

注：與損傷模型組比較，a：P＞0.05，b：P＜0.05，c：P＜0.01；與婦科千金片組比較，d：P＞0.05

組別 劑量 全血黏度（mPa·s） 血漿黏度（mPa·s）低切 中切 高切空白對(duì)照組 10 mL/kg 14.94±1.14c 7.00±0.39b 6.51±0.48b 2.30±0.30a損傷模型組 10 mL/kg 16.62±0.98 7.66±0.79 7.15±0.71 2.52±0.24婦科千金片 7.20 g生藥/kg 15.07±1.66b 6.81±0.85b 6.42±0.82b 2.28±0.25b婦炎康 1.20 g生藥/kg 15.58±1.16bd 6.76±0.54bd 6.37±0.50bd 2.48±0.30ad婦炎康 2.40 g生藥/kg 14.57±1.95cd 6.39±0.69cd 6.00±0.66cd 2.25±0.22bd婦炎康 4.80 g生藥/kg 14.54±2.11cd 6.37±1.25bd 5.79±1.05cd 2.24±0.23bd

3 結(jié)論

盆腔炎是指女性生殖器官、周圍結(jié)締組織及盆腔腹膜所發(fā)生的炎癥，為婦科較常見的疑難病，病情較復(fù)雜，致病的病原體不一。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，血瘀是盆腔炎的主要病機(jī)，屬于“熱入血室”“帶下病”“婦科瘤痕”等范疇?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為，此癥為細(xì)菌感染所致，常見病原體為大腸桿菌、葡萄球菌及鏈球菌等。所以筆者選擇了3種臨床常見致病菌作為致炎劑制作盆腔炎模型。用血液流變學(xué)指標(biāo)及組織病理學(xué)檢查指標(biāo)考察了本組方對(duì)大鼠子宮內(nèi)膜病變的影響及血液流變學(xué)的影響。結(jié)果表明，以混合細(xì)菌懸液致大鼠慢性盆腔炎模型制作成功。對(duì)此模型動(dòng)物給予婦炎康，能明顯減輕子宮內(nèi)膜組織病變程度，并能降低全血黏度、血漿黏度，具有活血化瘀的作用，并且婦炎康各劑量組與婦科千金片組比較，差異無(wú)顯著性。

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