范子耀, 孟潤杰, 馬志強(qiáng), 韓秀英,張小風(fēng), 王文橋*, 劉穎超
(1.河北省農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)研究所,保定 071000;2.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院,保定 071000;3.河北省農(nóng)業(yè)有害生物綜合防治工程技術(shù)研究中心,保定 071000)
咯菌腈與苯醚甲環(huán)唑等三種藥劑復(fù)配對馬鈴薯早疫病菌(Alternariasolani)的聯(lián)合毒力
范子耀1,2,3, 孟潤杰1,3, 馬志強(qiáng)1,3, 韓秀英1,3,張小風(fēng)1,3, 王文橋1,3*, 劉穎超2
(1.河北省農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)研究所,保定 071000;2.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院,保定 071000;3.河北省農(nóng)業(yè)有害生物綜合防治工程技術(shù)研究中心,保定 071000)
采用菌絲生長速率法測定咯菌腈分別與丁香菌酯、吡唑醚菌酯或苯醚甲環(huán)唑3種藥劑復(fù)配對馬鈴薯早疫病菌(Alternariasolani)的聯(lián)合毒力,以Wadley公式評(píng)價(jià)咯菌腈與其他3種藥劑復(fù)配對抑制早疫病菌菌絲生長是否有增效作用。通過田間試驗(yàn)驗(yàn)證咯菌腈與其他藥劑有增效作用的桶混產(chǎn)品對馬鈴薯早疫病的防治效果。結(jié)果表明,咯菌腈與上述3種藥劑按9種配比混合均無拮抗作用(增效系數(shù)均大于0.5),咯菌腈與苯醚甲環(huán)唑以5∶1復(fù)配有明顯的增效作用(增效系數(shù)SR 2.02),與丁香菌酯或吡唑醚菌酯的9種配比混合物有加和作用(SR介于0.5與1.5之間)。在田間咯菌腈與苯醚甲環(huán)唑以5∶1桶混,并以105g/hm2的劑量施用,防效可達(dá)85%以上、增產(chǎn)率40%以上,顯著高于同濃度單劑的防效和增產(chǎn)率。
馬鈴薯早疫病菌; 咯菌腈; 殺菌劑復(fù)配; 增效作用; 防治效果
早疫病是馬鈴薯生產(chǎn)上的一種重要病害,主要危害葉片、莖和薯塊,引起植株早衰,對產(chǎn)量具有嚴(yán)重影響,發(fā)病嚴(yán)重地塊減產(chǎn)20%~30%[1-3]。目前生產(chǎn)中抗早疫病的馬鈴薯品種較少,主要依靠化學(xué)藥劑進(jìn)行防治[4],但由于早疫病菌具有潛育期短、再侵染頻繁和流行速度快的特點(diǎn),長期使用單一藥劑,易形成抗藥性群體,在多個(gè)國家已有早疫病菌對QoIs類殺菌劑產(chǎn)生抗藥性的報(bào)道[5-7]??┚媸且环N非內(nèi)吸性吡咯類殺菌劑,對擴(kuò)展青霉(Penicillium expansum)、灰葡萄孢(Botrytiscinerea)及鏈格孢(Alternariaspp.)的菌絲生長和分生孢子萌發(fā)具有較強(qiáng)的抑制作用[8-10]。丁香菌酯、吡唑醚菌酯和苯醚甲環(huán)唑等內(nèi)吸性殺菌劑作用位點(diǎn)單一,長期大量使用易引起病原菌產(chǎn)生抗藥性[11-12]。藥劑的合理復(fù)配不僅可以提高防效,擴(kuò)大防治譜,還可有效延緩抗藥性的產(chǎn)生,降低成本[13]。為此,作者進(jìn)行了咯菌腈與丁香菌酯、吡唑醚菌酯、苯醚甲環(huán)唑等藥劑的聯(lián)合毒力研究,旨在明確其增效配比組合,為生產(chǎn)上開發(fā)利用藥劑桶混技術(shù)及防治早疫病的新型復(fù)配制劑提供依據(jù),并將有利于提高咯菌腈對早疫病的防治效果,延緩早疫病菌抗藥性的產(chǎn)生,延長丁香菌酯、吡唑醚菌酯等內(nèi)吸性殺菌劑的使用壽命。
1.1.1 供試藥劑
95%咯菌腈原藥、99%吡唑醚菌酯原藥、96%丁香菌酯原藥由沈陽化工研究院提供;95%苯醚甲環(huán)唑原藥由安徽績溪農(nóng)華生物科技有限公司提供;50%咯菌腈可濕性粉劑、10%苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑由瑞士先正達(dá)作物保護(hù)有限公司提供。
1.1.2 供試菌種
供試馬鈴薯早疫病菌(Alternariasolani)于2009年采自河北省圍場縣克勒溝鎮(zhèn)小葦子溝村,按照范永玲等[14]的方法分離保存。
1.1.3 供試培養(yǎng)基
PDA培養(yǎng)基:1L無菌水、200g馬鈴薯、20g葡萄糖、15g瓊脂。
1.1.4 供試馬鈴薯品種
試驗(yàn)品種為‘費(fèi)烏瑞它’(感早疫?。?。
1.2.1 室內(nèi)聯(lián)合毒力測定
采用菌絲生長速率法[15]測定咯菌腈分別與丁香菌酯、吡唑醚菌酯、苯醚甲環(huán)唑復(fù)配對早疫病菌的聯(lián)合毒力。將咯菌腈分別與丁香菌酯、吡唑醚菌酯或苯醚甲環(huán)唑按1∶0、1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5、2∶1、3∶1、4∶1、5∶1、0∶1的質(zhì)量比混合后,制成含藥 PDA平板,空白對照加等量無菌水。將直徑5mm的菌餅正面朝下接種到含藥PDA平板上,每處理3次重復(fù),25℃黑暗培養(yǎng)6d后,采用十字交叉法測量各處理的菌落直徑,試驗(yàn)重復(fù)2次。以2次試驗(yàn)的平均值計(jì)算抑制率,并采用DPS v7.05版軟件進(jìn)行藥劑濃度對數(shù)值(x)與抑制率幾率值(y)之間的線性回歸分析,計(jì)算各混配藥劑組合的毒力回歸方程式(y=a+bx)及相關(guān)系數(shù)(R),進(jìn)而求出有效抑制中濃度(EC50),并根據(jù) Wadley公式[16]評(píng)價(jià)復(fù)配組合的聯(lián)合毒力,確定最佳配比。
1.2.2 田間藥效試驗(yàn)
于2010年和2011年在河北省圍場縣克勒溝鎮(zhèn)小葦子溝村進(jìn)行田間藥效試驗(yàn)。根據(jù)室內(nèi)毒力測定獲得的最佳配比,將咯菌腈與苯醚甲環(huán)唑以質(zhì)量比5∶1均勻混合,藥劑使用濃度及有效成分含量見表1,每處理4次重復(fù)。小區(qū)采用隨機(jī)區(qū)組排列,面積為80m2。采用“衛(wèi)士”牌背負(fù)式手動(dòng)噴霧器,在馬鈴薯封壟期早疫病發(fā)病前進(jìn)行葉面均勻噴施(2010年7月2日,2011年7月5日),用藥液量675L/hm2。施藥間隔期為7~10d,共施藥4次。末次用藥7d后調(diào)查病情。病害分級(jí)參照《農(nóng)藥田間藥效試驗(yàn)準(zhǔn)則》[17],計(jì)算各處理的病葉率、調(diào)查病情及防效,并采用DPS7.05版LSD法進(jìn)行數(shù)據(jù)顯著性差異分析。試驗(yàn)中觀察各處理對馬鈴薯植株有無藥害。
1.2.3 咯菌腈與不同殺菌劑混合施用對馬鈴薯產(chǎn)量的影響
分別于2010年9月16日和2011年9月20日收獲,評(píng)價(jià)不同試驗(yàn)小區(qū)馬鈴薯的品質(zhì)并測產(chǎn)。每小區(qū)5點(diǎn)取樣(每點(diǎn)種植6個(gè)芽塊),每點(diǎn)調(diào)查0.72m2,將所收獲的馬鈴薯按商品薯(150g及以上)和非商品薯(150g以下)2個(gè)級(jí)別分開,記錄各級(jí)別馬鈴薯個(gè)數(shù),計(jì)算商品薯率、產(chǎn)量及增產(chǎn)率。
用Wadley方法評(píng)價(jià)咯菌腈分別與丁香菌酯、吡唑醚菌酯或苯醚甲環(huán)唑復(fù)配對早疫病菌的聯(lián)合毒力。結(jié)果表明,咯菌腈分別與上述3種藥劑的9種配比混合物均無拮抗作用(增效系數(shù)均大于0.5)??┚媾c苯醚甲環(huán)唑以5∶1混合時(shí)具有明顯的增效作用(SR大于1.5)(表1),咯菌腈與丁香菌酯或吡唑醚菌酯9種配比復(fù)配物均表現(xiàn)為加和作用(SR介于0.5和1.5之間)(表2、表3)。
表1 咯菌腈與丁香菌酯復(fù)配對早疫病菌菌絲生長的聯(lián)合毒力
咯菌腈(F) - -0.041 5 -吡唑醚菌酯(P) - - 1.821 9 -F:P 1∶1 0.081 1 0.105 1 0.77 F:P 1∶2 0.119 0 0.162 7 0.73 F:P 1∶3 0.155 3 0.210 9 0.74 F:P 1∶4 0.190 0 0.226 5 0.84 F:P 1∶5 0.223 4 0.269 0 0.83 F:P 2∶1 0.061 5 0.076 5 0.80 F:P 3∶1 0.054 9 0.106 4 0.52 F:P 4∶1 0.051 5 0.084 4 0.61 F:P 5∶1 0.049 5 0.077 6 0.64
表3 咯菌腈與苯醚甲環(huán)唑復(fù)配對早疫病菌菌絲生長的聯(lián)合毒力
田間試驗(yàn)表明,2010年咯菌腈與苯醚甲環(huán)唑以有效成分質(zhì)量比5∶1復(fù)配的桶混液按照105g/hm2和120g/hm2噴施時(shí),對馬鈴薯早疫病的防效分別為87.2%和89.7%,顯著高于咯菌腈(105g/hm2)或苯醚甲環(huán)唑(105g/hm2)的防治效果,5∶1復(fù)配的桶混液按照有效劑量90g/hm2施藥時(shí),防效與兩個(gè)單劑(105g/hm2)的防效相當(dāng)。該結(jié)果與2011年的藥效試驗(yàn)結(jié)果一致(表4)。安全性觀察顯示,咯菌腈與苯醚甲環(huán)唑以有效成分質(zhì)量比5∶1復(fù)配的桶混液最高施藥濃度120g/hm2對馬鈴薯的生長發(fā)育狀況無不良影響。
田間試驗(yàn)表明,施用殺菌劑能夠促進(jìn)馬鈴薯產(chǎn)量的提高。2010年、2011年咯菌腈與苯醚甲環(huán)唑混合施用后,馬鈴薯產(chǎn)量分別達(dá)到(3.98~4.36)×104kg/hm2和(4.01~4.57)×104kg/hm2,增產(chǎn)率為37.9%~50.9%和27.3%~44.9%;咯菌腈和苯醚甲環(huán)唑單劑處理產(chǎn)量分別為4.17×104kg/hm2、4.15kg/hm2和4.04×104kg/hm2、4.24kg/hm2,增產(chǎn)率均高于30%,其中咯菌腈與苯醚甲環(huán)唑混合物施藥劑量為105g/hm2處理區(qū)的增產(chǎn)率顯著高于同濃度的兩單劑處理區(qū)(表5)。
本研究結(jié)果表明,咯菌腈與丁香菌酯或吡唑醚菌酯以1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5、2∶1、3∶1、4∶1、5∶1的質(zhì)量比復(fù)配對早疫病菌的毒力均表現(xiàn)為加和作用,而咯菌腈與苯醚甲環(huán)唑以質(zhì)量比5:1復(fù)配時(shí)對早疫病菌的毒力表現(xiàn)出明顯的增效作用,增效系數(shù)為2.02,通過2010年和2011年的田間藥效試驗(yàn)證明兩者以質(zhì)量比5∶1混合時(shí)對馬鈴薯早疫病的防治效果及對馬鈴薯產(chǎn)量的提高均優(yōu)于同濃度單劑,且兩者的混合物在設(shè)定濃度下對馬鈴薯植株安全。
表4 50%咯菌腈WP與10%苯醚甲環(huán)唑WDG桶混液對馬鈴薯早疫病的防治效果1)
表5 噴施50%咯菌腈WP與10%苯醚甲環(huán)唑WDG桶混液對馬鈴薯產(chǎn)量的影響1)
咯菌腈屬吡咯類殺菌劑,其作用機(jī)理獨(dú)特,在田間不易產(chǎn)生抗藥性[18],與苯醚甲環(huán)唑等3種藥劑合理混配可有效降低各有效成分用量,從而有效延緩早疫病菌抗藥性產(chǎn)生速度;其中咯菌腈與丁香菌酯或吡唑醚菌酯復(fù)配不僅對早疫病有較好的防治效果,而且對晚疫病也有較好的預(yù)防作用[19]。
農(nóng)藥混用包括混劑使用和農(nóng)藥現(xiàn)混現(xiàn)用(即桶混)兩種??筛鶕?jù)田間病蟲害發(fā)生的具體情況,選擇不同的藥劑現(xiàn)混現(xiàn)用,從而克服混劑可能帶來的浪費(fèi)某種有效成分的缺點(diǎn),減輕混劑對環(huán)境保護(hù)的壓力。藥劑現(xiàn)混現(xiàn)用比使用混劑方便和靈活,還可以減少混劑有效成分在長期的貯藏、運(yùn)輸過程中發(fā)生反應(yīng)而失效的可能性。但不合理的桶混可能造成農(nóng)藥間的不相容性而產(chǎn)生藥效下降,毒性增加等副作用,給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和生態(tài)環(huán)境帶來危害[20-21],因此,要深入研究咯菌腈與苯醚甲環(huán)唑、吡唑醚菌酯、丁香菌酯等藥劑的可混性,從而正確指導(dǎo)田間施藥和馬鈴薯早疫病的防治。
[1]Józefa K.Early blight(Alternariaspp.)in potato crops in Poland and results of chemical protection[J].Journal of Plant Protection Research,2004,44(3):231-238.
[2]Pscheidt J W,Stevenson W R.Comparison of forecasting methods for control of potato early blight in Wisconsin[J].Plant Disease,1986,70:915-920.
[3]Shtienberg D,Blachinsky D,Ben C,et al.Effects of growing season and fungicide type on the development ofAlternariasolaniand on potato yield[J].Plant Disease,1996,80:994-998.
[4]Andrew H,Trevor W,Kent D,et al.Effect of fungicide uses strategies on the control of early blight(Alternariasolani)and potato yield[J].Australasian Plant Pathology,2010,39:368-375.
[5]Pasche J S,Wharam C M,Gudmestad N C.Shift in sensitivity ofAlternariasolaniin response to QoI fungicides[J].Plant Disease,2004,88:181-187.
[6]Peters R D,Drake K A,Gudmestad N C.First report of re-duced sensitivity to a QoI fungicide in isolates ofAlternariasolanicausing early blight ofpotato in Canada[J].Plant Disease,2008,92(12):1707.
[7]Rosenzweig N,Olaya G,Atallah Z K,et al.Monitoring and tracking changes in sensitivity to azoxystrobin fungicide inAlternariasolaniin Wisconsin[J].Plant Disease,2008,92(4):555-560.
[8]Béatrice I V,HervéA,Nelly B S,et al.Invitrofungicide sensitivity ofAlternariaspecies pathogenic to crucifers and identification ofAlternariabrassicicolafield isolates highly resistant to both dicarboximides and phenylpyrroles[J].Crop Protection,2004,23(6):481-488.
[9]陳志芳,王文橋,韓秀英,等.新殺菌劑對番茄灰霉病的室內(nèi)毒力及田間防效[J].植物保護(hù),2011,37(5):193-195.
[10]Errampalli D.Effect of fludioxonil on germination and growth ofPenicilliumexpansumand decay in apple cvs.Empire and Gala[J].Crop Protection,2004,23(9):811-817.
[11]思彬彬,楊卓.甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑作用機(jī)理研究進(jìn)展[J].世界農(nóng)藥,2007,29(6):5-9.
[12]周子燕,李昌春,高同春,等.三唑類殺菌劑的研究進(jìn)展[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2008,36(27):11842-11844.
[13]閻早嬰,孫桂珍,寧岷波,等.國內(nèi)混配農(nóng)藥研究進(jìn)展[J].張家口農(nóng)專學(xué)報(bào),1998,14(2):39-44.
[14]范永玲,任璐,劉秀英,等.番茄早疫病菌對3種殺菌劑的抗藥性監(jiān)測[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2008,36(26):11431-11433.
[15]孫廣宇,宗兆峰,王建明,等.植物病理學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2002:142-143.
[16]韓麗娟,顧中言,王強(qiáng),等.農(nóng)藥復(fù)配與復(fù)配農(nóng)藥[M].南京:江蘇科學(xué)技術(shù)出版社,1994:44-45.
[17]農(nóng)藥田間藥效試驗(yàn)準(zhǔn)則(一):殺菌劑防治番茄早疫病和晚疫?。跾].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,2000.
[18]Avenot H,Simoneau P,lacomi-Vasilescu B,et al.Characterization of mutations in the two-component histidine kinase gene Ab-NIK1fromAlternariabrassicicolathat confer high dicarboximide and phenylpyrrole resistance[J].Current Genetics,2005,47(4):234-243.
[19]Stein J M,Kirk W W.Field optimization of dimethomorph for the control of potato late blightPhytophthorainfestans:application rate,interval,and mixtures[J].Crop Protection,2003,22(4):609-614.
[20]孟潤杰.新殺菌劑唑胺菌酯對黃瓜白粉菌生物活性及其抗藥性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估[D].保定:河北農(nóng)業(yè)大學(xué),2009.
[21]葉貴標(biāo).農(nóng)藥桶混相容性及其測定[J].農(nóng)藥科學(xué)與管理,1993(1):44.
Joint-toxicity of the mixtures of fludioxonil with coumoxystrobin,pyraclostrobin or difenoconazole againstAlternariasolani
Fan Ziyao1,2,3, Meng Runjie1,3, Ma Zhiqiang1,3, Han Xiuying1,3,Zhang Xiaofeng1,3, Wang Wenqiao1,3, Liu Yingchao2
(1.InstituteofPlantProtection,HebeiAcademyofAgriculturalandForestrySciences,Baoding071000,China;2.CollegeofPlantProtection,HebeiAgriculturalUniversity,Baoding071000,China;3.IPMCentreofHebeiProvince,Baoding071000,China)
The joint-toxicity of the mixtures of fludioxonil with coumoxystrobin,pyraclostrobin or difenoconazole againstAlternariasolaniwas determined by mycelial growth rate test.Wadley formula was used to evaluate whether the synergistic effects existed in the mixtures against the mycelial growth ofA.alternaria.The control efficacy of the synergistic tank-mixtures to potato early blight was validated through field trials.The results showed that the mixtures of fludioxonil with the other three fungicides at 9 mixing ratios exhibited no antagonistic effects(synergistic ration(SR)>0.5);the mixture of fludioxonil with difenoconazole at the ratio of 5∶1 had obviously synergistic effect(SR=2.02),but the mixtures of fludioxonil with coumoxystrobin or pyraclostrobin showed additive effects(SR=0.5-1.5).The tank-mixture of fludioxonil with difenoconazole(mixing ratio=5∶1),applied at 105 g a.i./hm2,resulted in a control efficacy of over 85%and yield increase ratio of over 40%,which was significantly higher than those of the control at the same rate of application.
Alternariasolani; fludioxonil; fungicide mixtures; synergistic effect; control efficacy
TQ 450.21
B
10.3969/j.issn.0529-1542.2012.05.040
2011-10-27
2012-01-04
國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系項(xiàng)目(nycytx-15)
* 通信作者Tel:0312-5915659;E-mail:wenqiaow@163.com