宋 婷，艾應(yīng)偉，郭培俊，李傳人，潘丹丹

(四川大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院生物資源與生態(tài)環(huán)境教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川成都 610064)

鐵路運(yùn)輸是我國(guó)國(guó)民經(jīng)濟(jì)、社會(huì)生活的重要組成部分，已成為主導(dǎo)地區(qū)經(jīng)濟(jì)發(fā)展的重要因素。隨著鐵路線路的增加、車(chē)次的增多，因鐵路修建而產(chǎn)生的大量巖石邊坡對(duì)鐵路沿線環(huán)境的負(fù)面影響不容忽視。這些巖石邊坡植被遭破壞，創(chuàng)面直接承受雨水沖刷、太陽(yáng)暴曬，植被生長(zhǎng)所需的表層土和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)嚴(yán)重匱乏，穩(wěn)定性極差［1］。土壤的健康狀況可直接反映邊坡生態(tài)情況，因此對(duì)土壤質(zhì)量的評(píng)價(jià)和預(yù)測(cè)越來(lái)越重要。隨著相關(guān)研究的深入，傳統(tǒng)的土壤理化指標(biāo)已難以滿(mǎn)足土壤質(zhì)量研究的需要。土壤酶是一類(lèi)具有特殊催化能力的蛋白質(zhì)，主要來(lái)源于植物根系和微生物的活動(dòng)。土壤酶參與土壤的許多重要生物化學(xué)過(guò)程和物質(zhì)循環(huán)，包括枯落物的分解、腐殖質(zhì)及各種有機(jī)化合物的分解與合成、土壤養(yǎng)分的固定與釋放以及各種氧化還原反應(yīng)，并直接參與土壤營(yíng)養(yǎng)元素的有效化過(guò)程，可以客觀地反映土壤肥力狀況［2－4］。從20世紀(jì)50年代起，歐洲和前蘇聯(lián)的科學(xué)家已把土壤酶作為土壤肥力的評(píng)價(jià)指標(biāo)。在我國(guó)，土壤酶活性也被廣泛用于評(píng)價(jià)農(nóng)田和森林土壤健康狀況［5－6］，但是卻鮮有研究將其應(yīng)用于鐵路邊坡土壤污染及恢復(fù)的評(píng)價(jià)。以川中丘陵區(qū)3條運(yùn)營(yíng)時(shí)間較長(zhǎng)的成昆鐵路、成渝鐵路和達(dá)成鐵路沿線的土壤為研究對(duì)象，對(duì)成昆鐵路的吳場(chǎng)段、成渝鐵路的五鳳段和達(dá)成鐵路的白云段3個(gè)典型路段鐵路沿線邊坡土壤脲酶、蔗糖酶、蛋白酶、過(guò)氧化氫酶和多酚氧化酶活性及其空間分布特征進(jìn)行研究。

1 材料與方法

1.1 研究區(qū)概況

研究區(qū)海拔450～750 m，屬亞熱帶濕潤(rùn)季風(fēng)氣候區(qū)，氣候溫和，無(wú)霜期長(zhǎng)，雨熱同季，雨量充沛，四季分明，年平均氣溫17.2℃，年均降水量在1 000 mm以上。

各典型路段的具體情況:①吳場(chǎng)段。該路段位于四川省夾江縣吳場(chǎng)鎮(zhèn)(E103°37'，N29°51')，屬成昆鐵路，于 1958 年開(kāi)始使用，遠(yuǎn)離城市，周邊無(wú)其他污染源。土壤類(lèi)型為由河流沖積物母質(zhì)發(fā)育而成的黃壤土，土地利用方式主要為菜地和茶園，植被覆蓋率79.2%。②五鳳段。該路段位于四川省金堂縣的五鳳鎮(zhèn)(E104°29'，N 30°36')，屬成渝鐵路，于 1952 年開(kāi)始使用，遠(yuǎn)離城市，周邊無(wú)其他污染源。土壤類(lèi)型為由紫色砂頁(yè)巖發(fā)育而成的紫色土，土地利用方式主要為菜地和農(nóng)田，植被覆蓋率90.0%。③白云段。該路段位于四川省南充市白云廟鎮(zhèn)(E104°37'，N30°44')，屬達(dá)成鐵路，于 1997 年開(kāi)始使用，遠(yuǎn)離城市，周邊無(wú)其他污染源。土壤類(lèi)型為由紫色砂頁(yè)巖發(fā)育而成的紫色土，土地利用方式為菜地和農(nóng)田，植被覆蓋率87.2%。

1.2 土壤樣品的采集與分析

為研究鐵路沿線土壤酶含量和分布特征，在吳場(chǎng)段、五鳳段和白云段3個(gè)典型路段內(nèi)，選取相同類(lèi)型鐵路邊坡設(shè)置采樣斷面，采樣斷面垂直穿越鐵軌。每種邊坡設(shè)3個(gè)重復(fù)，各采樣點(diǎn)用不銹鋼鏟取0—10 cm表層土樣，多點(diǎn)樣品混合成約500 g的混合樣品。每個(gè)重復(fù)在距鐵軌10、25、50、100、150 m處采樣。樣品用聚乙烯自封袋裝封并帶回試驗(yàn)室處理，經(jīng)自然風(fēng)干后，撿去礫石、動(dòng)植物殘?bào)w，用瑪瑙棒碾碎，過(guò)20目和100目尼龍篩后供試驗(yàn)分析用。土壤理化性質(zhì)按常規(guī)方法分析測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表1。土壤脲酶活性采用苯酚鈉比色法測(cè)定;蔗糖酶活性采用3，5－二硝基水楊酸比色法測(cè)定;蛋白酶活性采用改良茚三酮比色法測(cè)定;過(guò)氧化氫酶采用高錳酸鉀滴定法測(cè)定;多酚氧化酶采用碘滴定法測(cè)定。

表1 供試土壤樣品的基本化學(xué)性質(zhì)

1.3 數(shù)據(jù)處理

所有數(shù)據(jù)采用Excel 2007和SPSS Statistics 17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。顯著水平設(shè)為0.05。

2 結(jié)果與討論

2.1 土壤脲酶活性的空間分布

土壤脲酶是一種酰胺酶，能促進(jìn)有機(jī)質(zhì)分子中肽鍵的水解，其活性與土壤的微生物數(shù)量、有機(jī)質(zhì)含量、全氮和速效磷呈正相關(guān)關(guān)系，同時(shí)與土壤類(lèi)型有關(guān)。因此，土壤脲酶活性可反映土壤的氮素狀況［7］。如表2所示，3個(gè)路段土壤脲酶活性的空間分布呈現(xiàn)相似的變化趨勢(shì)，在距鐵軌5—10 m范圍內(nèi)活性較高，10—50 m逐漸降低，50—100 m有一定的上升，100—150 m又降低;各路段土壤脲酶活性均在距鐵軌10 m處達(dá)最高值，在距鐵軌50 m處最低;土壤脲酶活性的最大值出現(xiàn)在五鳳段距鐵軌10 m處，最小值出現(xiàn)在吳場(chǎng)段距鐵軌50 m處。在距鐵軌不同距離處不同路段土壤脲酶活性有一定差異:距鐵軌10 m處土壤脲酶活性表現(xiàn)為五鳳段＞白云段＞吳場(chǎng)段(P＜0.01);距鐵軌50、100、150 m處五鳳段與白云段土壤脲酶活性無(wú)顯著差異，二者均顯著高于吳場(chǎng)段(P＜0.05);在距鐵軌5、25 m處3個(gè)路段土壤脲酶活性均無(wú)顯著差異。

表2 距鐵軌不同距離處土壤脲酶的含量 μg/(g·h)

靠近鐵路處(距鐵軌5—10 m)土壤脲酶活性較高，可能是由于邊坡對(duì)雨水和塵土的物理阻擋作用使碳氮等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在緊鄰鐵路處的土壤中發(fā)生沉降和富集，這與焦曉光等的研究結(jié)果相似［8］。3個(gè)路段土壤脲酶活性隨距鐵軌距離的變化均較為顯著，表明土壤脲酶對(duì)鐵路運(yùn)營(yíng)帶來(lái)的環(huán)境脅迫較為敏感。吳場(chǎng)段鐵路由于運(yùn)營(yíng)時(shí)間較長(zhǎng)，且成昆鐵路客貨運(yùn)流量較大，鐵路邊坡受到鐵路運(yùn)輸影響較大，土壤受到較為嚴(yán)重的各類(lèi)污染，抑制了土壤微生物的生長(zhǎng)繁殖，造成其脲酶活性相對(duì)較低。

2.2 土壤蔗糖酶活性的空間分布

土壤蔗糖酶作為一種水解酶，能把高分子化合物分解成能被植物和土壤微生物利用的葡萄糖和果糖，對(duì)土壤中有機(jī)質(zhì)形態(tài)的轉(zhuǎn)化有重要作用。因此，土壤蔗糖酶活性作為評(píng)價(jià)土壤熟化程度和土壤肥力的一個(gè)重要指標(biāo)，其活性越強(qiáng)，土壤肥力越高［9］。由表3可知，3個(gè)路段土壤蔗糖酶活性的空間分布有一定差異:吳場(chǎng)段表現(xiàn)為距鐵軌5—25 m范圍內(nèi)逐漸上升，25—150 m范圍內(nèi)逐漸下降，且整個(gè)變化過(guò)程較為平緩;五鳳段表現(xiàn)為距鐵軌5—50 m范圍內(nèi)逐漸上升，50—150 m范圍內(nèi)基本不再變化;白云段表現(xiàn)為5—25 m范圍內(nèi)平緩上升，到50 m處有較大下降，50—150 m范圍內(nèi)又緩慢上升，最大值出現(xiàn)在距鐵軌25 m處。在距鐵軌不同距離處不同路段的土壤蔗糖酶活性差異極顯著(P＜0.01)，距鐵軌5、10、25 m處均表現(xiàn)為白云段＞五鳳段＞吳場(chǎng)段，距鐵軌50、100、150 m處均表現(xiàn)為五鳳段＞白云段＞吳場(chǎng)段。

表3 距鐵軌不同距離處土壤蔗糖酶的含量 mg/(g·h)

從土壤蔗糖酶活性隨距鐵軌距離的變化趨勢(shì)來(lái)看，吳場(chǎng)段和白云段鐵路的運(yùn)營(yíng)對(duì)土壤蔗糖酶活性影響較小;五鳳段表現(xiàn)出距鐵軌越遠(yuǎn)土壤蔗糖酶活性越高的趨勢(shì)，50 m以后趨于穩(wěn)定，可見(jiàn)鐵路運(yùn)營(yíng)對(duì)其影響較顯著。3個(gè)路段土壤蔗糖酶活性隨距鐵軌距離的變化均較為平緩，說(shuō)明其對(duì)鐵路運(yùn)營(yíng)污染表現(xiàn)出較強(qiáng)的耐受性。有研究表明，土壤蔗糖酶活性與土壤有機(jī)質(zhì)、氮、磷、鉀等的含量均表現(xiàn)出顯著的正相關(guān)關(guān)系［10］，由表1可知，五鳳段和白云段各項(xiàng)化學(xué)指標(biāo)均顯著高于吳場(chǎng)段，吳場(chǎng)段各個(gè)距離處土壤蔗糖酶活性均為顯著的最低水平。

2.3 土壤蛋白酶的空間分布

土壤蛋白酶參與土壤中氨基酸、蛋白質(zhì)、無(wú)機(jī)氮之間的轉(zhuǎn)換，能促進(jìn)蛋白質(zhì)中肽鍵的水解，其水解產(chǎn)物是高等植物的氮源之一。由表4可知，各路段土壤蛋白酶隨距鐵軌距離的變化有一定差異:吳場(chǎng)段表現(xiàn)為5—10 m范圍內(nèi)急劇下降，25—150 m范圍內(nèi)趨于平緩，沒(méi)有顯著變化;五鳳段表現(xiàn)為整體穩(wěn)定，只在距鐵軌10 m處活性略低;白云段有較大的起伏，最大值出現(xiàn)在距鐵軌100 m處，最小值出現(xiàn)在距鐵軌150 m處。不同距離處3個(gè)路段間土壤蛋白酶活性差異顯著，具體表現(xiàn)為:距鐵軌5 m處五鳳段和白云段間無(wú)顯著差異，兩者均顯著高于吳場(chǎng)段;距鐵軌10、25、50、100 m處均為五鳳段＞白云段＞吳場(chǎng)段;距鐵軌150 m處白云段和吳場(chǎng)段間無(wú)顯著差異，二者均顯著低于五鳳段。

吳場(chǎng)段和五鳳段土壤蛋白酶活性隨距鐵軌距離變化并無(wú)明顯的改變，說(shuō)明鐵路運(yùn)營(yíng)帶來(lái)的各種污染對(duì)土壤蛋白酶的影響不顯著。白云段土壤蛋白酶活性在不同距離處無(wú)規(guī)律急劇變化可能是水分等其他干擾因素作用的結(jié)果，有研究表明，土壤水分對(duì)土壤蛋白酶活性有較大影響［11］，土壤蛋白酶活性與土壤碳氮的轉(zhuǎn)化密切相關(guān)［12］。表1中土壤有機(jī)質(zhì)、全氮和有效氮含量均表現(xiàn)為五鳳段最高，白云段次之，吳場(chǎng)段最低，3個(gè)路段間土壤蛋白酶活性的差異與這一趨勢(shì)相一致。

表4 距鐵軌不同距離處土壤蛋白酶的含量 mg/(g·h)

2.4 土壤過(guò)氧化氫酶的空間分布

土壤過(guò)氧化氫酶是表征土壤氧化還原能力的一種酶，能促進(jìn)過(guò)氧化氫分解成分子氧和水，與土壤呼吸強(qiáng)度和土壤微生物活動(dòng)有關(guān)，在一定程度上反映了土壤微生物學(xué)過(guò)程的強(qiáng)度［13］。從表5可知，不同路段土壤過(guò)氧化氫酶活性隨距鐵軌距離的不同有所變化，表現(xiàn)為:吳場(chǎng)段5—10 m有一定上升，10—25 m有所下降，25—150 m逐漸上升，最小值出現(xiàn)在距鐵軌25 m處;五鳳段5—10 m有一定上升，10—25 m沒(méi)有變化，25—100 m緩慢下降，100—150 m趨于平穩(wěn);白云段5—25 m基本沒(méi)有變化，25—50 m緩慢上升并達(dá)到最大值，之后出現(xiàn)較大幅度的下降，在150 m處降至最小值。不同距離處3個(gè)路段間土壤過(guò)氧化氫酶活性差異顯著:距鐵軌5、10、25、50 m處五鳳段與白云段無(wú)顯著差異，二者均顯著高于吳場(chǎng)段;距鐵軌100 m處表現(xiàn)為白云段＞五鳳段＞吳場(chǎng)段;距鐵軌150 m處表現(xiàn)為五鳳段＞白云段＞吳場(chǎng)段。

整體看來(lái)，隨著距鐵軌距離的增加，吳場(chǎng)段土壤過(guò)氧化氫酶活性逐漸上升，而五鳳段和白云段則呈先上升后下降趨勢(shì)。吳場(chǎng)段土壤類(lèi)型是黃壤土，五鳳段和白云段土壤類(lèi)型是紫色土，不同的土壤類(lèi)型造成土壤物理結(jié)構(gòu)如緊密程度、孔隙分布等的不同，影響土壤微生物的活動(dòng)和分布［14］，這可能是造成土壤過(guò)氧化氫酶活性隨距鐵軌距離變化分布差異的原因。吳場(chǎng)段土壤過(guò)氧化氫酶活性在各個(gè)距離處均顯著低于五鳳段和白云段，說(shuō)明其受鐵路運(yùn)營(yíng)的影響最為嚴(yán)重。唐海濱等的研究也觀察到土壤過(guò)氧化氫酶活性與土壤中全氮、全磷、速效磷以及速效鉀含量之間的密切聯(lián)系［15］。

表5 距鐵軌不同距離處土壤過(guò)氧化氫酶的含量 mL/(g·h)

2.5 土壤多酚氧化酶的空間分布

土壤多酚氧化酶是一種復(fù)合酶，能把土壤中芳香族化合物合成醌，完成土壤的芳香族化合物循環(huán)，是高速率氧化過(guò)程的指標(biāo)，在芳香族有機(jī)化合物轉(zhuǎn)化為腐殖質(zhì)的過(guò)程中起著重要的作用。從表6可以看出，五鳳段和白云段土壤多酚氧化酶活性隨距鐵軌距離變化具有相同的趨勢(shì)，表現(xiàn)為5—25 m范圍內(nèi)有較大上升，均在25 m處達(dá)到最大值，25—100 m范圍內(nèi)有較大程度的下降，100—150 m范圍內(nèi)趨于平緩;吳場(chǎng)段表現(xiàn)為5—10 m范圍內(nèi)有一定的下降，在10 m處降到最小值，10—150 m范圍內(nèi)平緩上升。距鐵軌不同距離處3個(gè)路段間土壤多酚氧化酶活性差異顯著:5、10、25 m處均表現(xiàn)為五鳳段＞白云段＞吳場(chǎng)段;50、100、150 m處五鳳段和白云段無(wú)顯著差異，二者均顯著高于吳場(chǎng)段。

土壤多酚氧化酶活性可以反映土壤的腐殖化程度［16］。五鳳段和白云段土壤均為紫色土，而吳場(chǎng)段為黃壤土，不同土壤類(lèi)型其有機(jī)質(zhì)貯存形態(tài)和分布比例有很大的差異，與鐵路運(yùn)營(yíng)造成的污染物如重金屬等之間的相互作用方式和強(qiáng)度各異，可能是造成五鳳段和白云段多酚氧化酶隨距鐵路距離分布模式相似而與吳場(chǎng)段不同的原因。吳場(chǎng)段相對(duì)較低的土壤有機(jī)質(zhì)含量造成其土壤多酚氧化酶活性最低，與其他研究中顯示的山地生態(tài)系統(tǒng)中土壤多酚氧化酶活性和土壤碳流失呈正相關(guān)的結(jié)論相似［17］。

表6 距鐵軌不同距離處土壤多酚氧化酶的含量 mL/(g·h)

3 結(jié)語(yǔ)

從鐵路工程開(kāi)工建設(shè)到運(yùn)營(yíng)，沿線邊坡長(zhǎng)期遭受著不可避免的人為擾動(dòng)和水土流失的威脅。對(duì)于處于動(dòng)態(tài)變化并且沒(méi)有完全恢復(fù)的邊坡土壤來(lái)說(shuō)，土壤酶活性對(duì)土壤狀況的反映需要對(duì)多種酶進(jìn)行綜合分析后才能明確。在成昆鐵路吳場(chǎng)段、成渝鐵路五鳳段、達(dá)成鐵路白云段3個(gè)典型鐵路路段，5種土壤酶活性隨距鐵路距離的變化有不同的分布特征。成昆鐵路吳場(chǎng)段承擔(dān)著大量煤炭、鋼材等的運(yùn)輸任務(wù)，沿線生態(tài)系統(tǒng)受到長(zhǎng)期、持續(xù)的干擾，坡面土壤微生物活動(dòng)受到較為嚴(yán)重的環(huán)境脅迫，可能是其土壤酶活性最低的重要原因。鐵路運(yùn)營(yíng)時(shí)間的長(zhǎng)短、坡面土壤類(lèi)型的不同以及不同種類(lèi)的酶對(duì)特定環(huán)境脅迫因素敏感程度的差異，共同影響著鐵路周邊坡面土壤微生物及土壤酶的活性，進(jìn)而作用于坡面土壤的理化性質(zhì)。

土壤酶作為評(píng)價(jià)土壤健康狀況的重要指標(biāo)，可以很好地反映土壤肥力狀況和結(jié)構(gòu)特征。同時(shí)，在鐵路工程建設(shè)及運(yùn)營(yíng)中，為了更好地預(yù)防邊坡土壤退化、水土流失及由此帶來(lái)的各種安全隱患，將鐵路運(yùn)營(yíng)對(duì)周邊生態(tài)環(huán)境的影響降至最低，在今后的研究中應(yīng)綜合考慮局部小氣候、植被狀況、土壤結(jié)構(gòu)和性質(zhì)以及重金屬污染等多種影響因素對(duì)土壤酶作進(jìn)一步研究。

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