段 秀，張玉鋒，莊永亮

（昆明理工大學化學工程學院食品科學研究中心，云南昆明650500）

食源性血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制肽研究進展

段 秀，張玉鋒，莊永亮*

（昆明理工大學化學工程學院食品科學研究中心，云南昆明650500）

腎素-血管緊張素系統(tǒng)（RAS）和激肽釋放酶-激肽系統(tǒng)（KKS）在血壓調(diào)節(jié)方面是一對相互拮抗的體系，其平衡失調(diào)被認為是高血壓發(fā)病的一個重要因素，而血管緊張素轉(zhuǎn)化酶（ACE）是影響兩體系的關(guān)鍵。食物來源的ACE抑制肽因具有安全性好、成本低、易吸收、降壓明顯等優(yōu)點，越來越受到人們的關(guān)注。本文詳盡闡述了ACE抑制肽的降壓機制、來源、生物利用率、結(jié)構(gòu)與活性關(guān)系、分離純化方法、活性測定與功能評價及其應(yīng)用前景。

高血壓，ACE，ACE抑制肽

Abstract：Renin-angiotensin system（RAS） and kallikrein kinin system（KKS） is a pair of mutually antagonistic system in blood pressure regulation，dissonance of which is considered to be an important factor in the pathogenesis of hypertension，and angiotensin converting enzyme（ACE） is a critical factor affecting the systems.More and more attentions have been paid to the food-derived ACE inhibitory peptides，because of their higher activity of inhibiting ACE，good security，low cost，easy to absorb and obvious antihypertension.In this review，the antihypertensive mechanism，sources，bioavailability，structure-activity relationships，separation and purification methods，activity measurement，functional assessment of ACE inhibitory peptides，and its application prospects were introduced.

Key words：hypertension；ACE；ACE inhibitory peptide

高血壓是一種以動脈收縮壓或舒張壓升高為特征的臨床綜合癥，是威脅人類健康的主要疾病之一。因其與腦中風、心力衰竭和冠心病等一系列心腦血管疾病高度關(guān)聯(lián)而引起人們高度關(guān)注[1]。隨著人們生活水平大幅提高，無論在發(fā)達國家還是發(fā)展中國家，高血壓疾病發(fā)生率都很高。資料表明，高血壓平均發(fā)病率為10%～20%，全球每年因高血壓死亡人數(shù)達1200萬[2]；在我國高血壓患者也已超過1.6億[3]。目前用于臨床治療高血壓和心臟衰竭的合成ACE抑制劑已有許多，如卡托普利、依那普利、賴諾普利和雷米普利。但是，這些藥物可能產(chǎn)生低血壓、鉀水平上升、腎功能降低、咳嗽、味覺異常等副作用。食物蛋白來源的ACE抑制肽通常由蛋白酶在溫和條件下水解蛋白質(zhì)而獲得，食用安全性高，無毒副作用，對高血壓患者可以起到降壓作用而對血壓正常者無降壓作用，同時還具有免疫調(diào)節(jié)、減肥和易消化吸收等功能，有著合成化學藥物不可比擬的優(yōu)越性[1]。本文綜述了ACE抑制肽的來源、分離純化方法及ACE抑制肽的結(jié)構(gòu)與活性的關(guān)系，旨在為其開發(fā)利用提供參考。

1 ACE抑制肽的作用機制

國內(nèi)外研究表明，ACE抑制肽的作用機制如圖1所示。從圖1中可看出，腎素-血管緊張素系統(tǒng)（RAS）開始于無活性的先導物血管緊張素原，腎素可使血管緊張素原釋放出血管緊張素Ⅰ，在血管緊張素轉(zhuǎn)換（ACE）作用下，血管緊張素-Ⅰ失去C-端二肽形成血管緊張素Ⅱ。血管緊張素Ⅱ是一種血管收縮劑，增加周圍血管阻力，且刺激醛固酮的合成和釋放，醛固酮促進遠曲小管和集合管對Na、水的重吸收使血壓增加，兩者共同作用導致血壓上升[4]。ACE是一個多功能的酶也涉及KKS，激肽釋放酶催化激肽原形成緩激肽，緩激肽通過增加前列腺素和NO，使血管擴張，降低周圍血管阻力，從而使血壓下降[5]，ACE能去除具有擴血管作用的緩激肽C-末端的二肽，導致形成無效片段[6]。

圖1 腎素-血管緊張素系統(tǒng)和激肽釋放酶-激肽系統(tǒng)Fig.1 Renin-angiotensin and Kallikenin-kinin system

2 不同食物來源的ACE抑制肽

從食物來源上來看，ACE抑制肽主要來源于乳蛋白，動、植物蛋白和發(fā)酵食品[7]。大豆、乳品和水產(chǎn)品是公認的優(yōu)質(zhì)蛋白源，且資源豐富，可作為提取ACE抑制肽原料，目前采用最多的是從牛奶蛋白中提取ACE抑制肽[8]。

2.1 乳蛋白來源的ACE抑制肽

乳蛋白主要包括酪蛋白和乳清蛋白，而牛奶蛋白由80%酪蛋白和20%的乳清蛋白組成，是優(yōu)質(zhì)的乳蛋白來源。在牛奶中發(fā)現(xiàn)的主要酪蛋白組分是αS1-，αS2-，β-和κ-酪蛋白（分別為45.0%、12.0%、35.0%和8.0%），主要的乳清蛋白包括β-乳球蛋白、α-乳白蛋白、牛血清白蛋白、免疫球蛋白和阮-胨[1]。Jiang等[9]從牛乳酪蛋白的酶解物中分離出兩種ACE抑制肽RYPSYG（κ-酪蛋白酶；f25～30）和DERF（κ-酪蛋白酶；f15～18），IC50值分別為65.71、37.08μmol/L，并且能顯著降低原發(fā)性高血壓大鼠（spontaneously hypertensive rats，SHR）的血管收縮壓。Pan等[10]從乳清蛋白酶解物中分離出一種新的ACE抑制肽，RLSFNP（β-乳球蛋白（f148～153）），該肽的IC50值為177.39μmol/L。此外，他們還用胰蛋白酶水解濃縮乳清蛋白（WPC-80），從中分離出ACE抑制肽LL，并且用分子對接計算研究了LL/ACE的相互作用[11]。Bidasolo等[12]從驢奶的復(fù)合酶解物中分離出ACE抑制肽VAPFPQPVVP[β-酪蛋白f（176-185）]，該肽的IC50值為48.8μmol/L，這是第一次報道從驢奶中獲得的活性肽。

2.2 魚蛋白來源的ACE抑制肽

魚蛋白質(zhì)是僅次于牛奶蛋白的第二大ACE抑制肽來源，很多研究均表明從魚肉、蝦、蟹等水產(chǎn)動物蛋白中制得的酶解降血壓肽其降壓活性要優(yōu)于其他食物性蛋白來源[13]。Chen等[14]從草魚蛋白酶解物中分離出一個高ACE抑制活性的三肽VAP，該肽為競爭性抑制劑，且對消化酶穩(wěn)定，這是第一次報道食源性的VAP。F HASAN等[15]研究了合成肽肽A（PNRIKYGD）和肽B（HERDPTHIKWGD）在腸道環(huán)境下的消化過程，并且發(fā)現(xiàn)IK＋芳香族氨基酸可能是某些ACE抑制肽重要的功能部分。另外，對酶解魚類的加工副產(chǎn)物（如魚皮，魚骨）中的ACE抑制肽的研究也有很多，如Lee等[16]用胃蛋白酶水解金槍魚骨，從中分離出一個含21個氨基酸的ACE抑制肽IC50為11.28μmol/L，進一步研究發(fā)現(xiàn)口服該肽可以顯著降低SHR的收縮壓。Lee等[17]用多種蛋白酶水解鰩魚皮，發(fā)現(xiàn)α-糜蛋白酶水解物具有最高的ACE抑制活性，并從中分離出兩種ACE抑制肽：PGPLGLTGP和QLGFLGPR，它們的IC50值分別為95μmol/L和148μmol/L。

表1 魚蛋白來源的ACE抑制肽舉例Table 1 Examples of ACE inhibitory peptides derived from fish protein

表2 植物蛋白來源的ACE抑制肽舉例Table 2 Examples of ACE inhibitory peptides derived from plant protein

2.3 植物蛋白來源的ACE抑制肽

植物蛋白來源的ACE抑制肽其成本低，提取和純化較方便，用常規(guī)分離純化法即可獲得高純度的肽。目前植物蛋白肽來源的研究主要集中在大豆、玉米、花生、油菜籽等農(nóng)作物[20]。M Kuba等[21]從β-伴大豆球蛋白和大豆球蛋白的酶解物得到LAI PVNKP、LPHF、SPYP和WL四種降血壓肽，IC50值分別為70、670、850、65μmol/L，體外消化后發(fā)現(xiàn)SPYP和WL的活性得到保留，且SPYP的活性顯著增強。Lin等[22]酶解玉米加工副產(chǎn)物，分離純化得到降血壓肽AY，并且發(fā)現(xiàn)低分子量玉米肽喂食SHR，降血壓效果好。Jimsheena等[23]發(fā)現(xiàn)花生球蛋白的胃蛋白酶解物的水解度最高，且ACE抑制作用最強。Yuko Yamada等[24]用酶水解油菜籽，從中分離出降血壓肽RIY，命名為rapakinin，在原發(fā)性高血壓大鼠（SHR）腸系膜動脈以血管內(nèi)皮細胞依賴性形式表現(xiàn)出舒張活性（EC50=5.1μmol/L），并且發(fā)現(xiàn)濃度為10mol/L的rapakinin通過PGI2-IP受體，其次是CCK-CCK1受體途徑舒緩腸系膜動脈。SHR口服15mg/kg劑量的rapakinin后，抗高血壓活性也被CCK1和IP拮抗劑阻斷，認為rapakinin的抗高血壓活性主要由CCK1和IP受體依賴性的血管舒張誘導。

2.4 發(fā)酵食品來源的ACE抑制肽

發(fā)酵食品主要是發(fā)酵乳制品和傳統(tǒng)發(fā)酵食品，發(fā)酵乳制品主要是利用乳酸菌發(fā)酵。Anne Pihlanto等[25]研究了25種乳酸桿菌發(fā)酵牛奶的體外ACE抑制活性，其中Lactobacillus jensenii發(fā)酵的牛奶對SHR有短暫的降血壓作用。1995年，Nakamura以Lactobacillus Helveticus和Saccharomyces Cerovisiae菌株作為乳發(fā)酵劑制成Calpis酸乳，并且通過四步HLPC從Calpis酸乳中純化了VPP和IPP兩種ACE抑制肽[26]。

傳統(tǒng)發(fā)酵食品也是ACE抑制肽的一個研究方向，如Okamoto等對11種發(fā)酵食品（魚醬、日本醬油、日本清酒、日本豆醬、醋、奶酪、干魚、日本味噌、納豆、豆腐乳和丹貝），結(jié)果發(fā)現(xiàn)日本豆醬、魚醬、納豆、豆腐乳及一些奶酪有比較強的ACE抑制活性，而日本醬油（一般釀造方式釀造）、蘋果醋、鄉(xiāng)村奶酪和大米味噌沒有或幾乎沒有抑制活性[7]。戴軍等[27]利用基體輔助激光解吸電離-飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜分析和液相色譜-電噴霧電離四極桿-飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用分析鑒定出黃酒中4種ACE活性抑制肽的氨基酸序列為：VEDGGV、PST、NT和LY。

3 ACE抑制肽的生物利用率

ACE抑制肽必須完整地進入循環(huán)系統(tǒng)才能在人體內(nèi)發(fā)揮功能，但通常肽會被消化道酶，黏膜、細胞質(zhì)或血清相關(guān)肽酶水解。目前多應(yīng)用人結(jié)腸腺癌細胞（the humancolon adenocarcinoma cell lines，Caco-2細胞）模型研究記錄體外ACE抑制肽的腸道吸收，因為人們普遍承認，這種細胞是用來預(yù)測藥品的腸上皮細胞滲透的合理模型[1，28]。Foltz M等[29]對牛奶ACE抑制肽IPP和VPP進行體外滲透性研究，發(fā)現(xiàn)兩種肽很容易通過腸道上皮細胞運輸，并且IPP可避免腸胃消化而完整地進入人體循環(huán)系統(tǒng)。研究口服富含IPP和VPP的食物，已經(jīng)證明這樣的食物對高血壓患者表現(xiàn)出降血壓的作用[28]。這清楚地表明，某些ACE抑制肽被人體吸收充分能有效地降低高血壓患者的血壓?，F(xiàn)在，研究人員所面臨的挑戰(zhàn)是如何使在體外具有生物活性的肽能夠完整地進入循環(huán)系統(tǒng)，并且在它們的催化位點仍然具有活性。

4 ACE抑制肽結(jié)構(gòu)與活性關(guān)系

4.1 ACE的分子結(jié)構(gòu)

人體內(nèi)ACE有三種異構(gòu)體，它們是同一個基因的不同剪接產(chǎn)物。異構(gòu)體1在各種組織中普遍存在，稱為體細胞ACE（somaticACE，sACE），含有1306個氨基酸殘基。異構(gòu)體2和異構(gòu)體3在睪丸組織和成熟的精子細胞中表達，稱為睪丸ACE（testic ACE，tACE），分別含有732個氨基酸殘基和739個氨基酸殘基。sACE分子量為149.723ku，由N端信號肽（第l～30個氨基酸）、兩個同源的催化活性中心（N-催化結(jié)構(gòu)域和C-催化結(jié)構(gòu)域）、親脂跨膜區(qū)（第1257～1276個氨基酸）和細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域組成。膜外側(cè)第1232個氨基酸殘基處存在一個金屬分泌酶的酶切位點，酶切后失去C末端的ACE分泌進人血漿，成為可溶狀態(tài)，稱為血漿型ACE。與sACE不同的是，tACE只含有單個催化活性中心，其中異構(gòu)體2分子量為80.073ku，N端信號肽為（1～31氨基酸），除了信號肽與N端稍有差異，從第68個氨基酸殘基開始，其氨基酸序列與sACE完全相同。異構(gòu)體3分子量為83.989ku，N端序列與異構(gòu)體2完全相同，但從第657個氨基酸開始由于移碼突變使得C端有差異[30]。

4.2 ACE抑制肽的構(gòu)效關(guān)系

ACE抑制肽常含有2～20個氨基酸，但是也已鑒定出＞20個氨基酸的活性肽[28]。ACE抑制肽活性與其氨基酸組成和氨基酸序列具有重要關(guān)系；但關(guān)于ACE抑制肽構(gòu)效關(guān)系至今尚未完全清楚。國內(nèi)外學者普遍認為，ACE抑制肽活性與其自身特性有關(guān)[1，28]。sACE的C端催化部位包括三個子催化位點：S’、S1’和S2’，這三個位點分別與血管緊張素ⅠC-末端的三個疏水性殘基Phe-His-Leu相對應(yīng)[31]。研究發(fā)現(xiàn)C端氨基酸與ACE抑制肽的抑制活性有重要關(guān)系，C端為芳香族氨基酸和脯氨酸時其抑制活性較高。據(jù)報道，在倒數(shù)第二的位置，脂肪族（V，I，A），堿性（R）和芳香族（Y和F）氨基酸殘基是首選，而芳香族（W，Y和F）、脯氨酸（P）和脂肪族（A，L和M）殘基在肽C-末端的最終位置倍受青睞[28]。而且，C端殘基上帶正電荷的氨基酸，如賴氨酸（ε-氨基）和精氨酸（胍基），可以顯著提高降壓肽的抑制活性[1，28]，ACE抑制肽的另一個共同特點是N-末端疏水性[32]，對于大于3個氨基酸長度的多肽，已認為羥脯氨酸（Hyp）的存在是肽與ACE催化位點結(jié)合的關(guān)鍵[33]。此外，肽的整體疏水性很重要，親水性肽具有弱的或沒有ACE抑制活性，因為親水性肽與ACE的活性部位是不相容的。事實上，ACE抑制作用是通過疏水性多肽與ACE子催化位點的高親和力來實現(xiàn)的[28]。

ACE抑制肽的作用不僅僅與C端三個氨基酸殘基有關(guān)，切割位點的N端殘基可能與ACE的關(guān)鍵子催化點相互作用[34]。如Kohmura等[35]發(fā)現(xiàn)N-端延伸可以增加抑制效力，他發(fā)現(xiàn)N端添加氨基酸后IC50值下降，[IC50值：IYP （61μmol），LIYP（10μmol），PLIYP（4.4μmol）；HLPLP（41μmol），LHLPLP（2.9μmol）]。肽的立體結(jié)構(gòu)對其活性也有影響。C-末端殘基為脯氨酸時（該氨基酸具剛性環(huán)狀結(jié)構(gòu)），它可能將羧基構(gòu)象鎖定，有利于酶活性位點的正電荷殘基相互作用[36]。研究表明，含有trans-Pro構(gòu)象的肽，與含cis-Pro的肽相比是更好的ACE底物[37]。Gomez-Ruiz等[38]發(fā)現(xiàn)在含trans-Pro構(gòu)象的β-酪蛋白f（47-51）肽DKIHP有較高的ACE抑制劑活性。抑制肽結(jié)構(gòu)及其與活性中心的相互作用可導致活性的差異，trans-Pro到cis-Pro的改變會導致抑制肽的羰基換位到肽鏈的相反面，使肽失去了其原有的與酶相連的氫鍵，損失了與活性位點的相互作用，并反過來使結(jié)合酶的能力和抑制活性的下降。

4.3 分子對接技術(shù)的應(yīng)用

目前已有用分子對接的方法來研究降血壓肽與ACE的結(jié)合作用。分子對接方法（Molecular Docking Method）已成為藥物設(shè)計方法中比較成熟的直接藥物設(shè)計方法。從已知結(jié)構(gòu)的受體（靶蛋白或活性位點）和配體出發(fā)，通過化學計量學方法模擬分子的幾何結(jié)構(gòu)和分子間作用力來進行分子間相互作用識別并預(yù)測受體與配體復(fù)合物結(jié)構(gòu)的方法稱為分子對接。分子對接的常用軟件有：DOCK，AUTODOCK，SYBYL，Program Sievgene，Arguslab等。目前分子對接技術(shù)已被廣泛應(yīng)用于研究ACE抑制肽與ACE的結(jié)合作用[11]，WANG等[39]用分子對接技術(shù)獲得了肽鏈（KVLILA）與ACE結(jié)合的合理的結(jié)構(gòu)模型。Pan等[11]認為肽與ACE最佳結(jié)合形式的牢固性與肽結(jié)合ACE殘基的氫鍵、疏水相互作用、親水性及靜電相互作用有關(guān)。

5 ACE抑制肽的分離純化

由于ACE抑制肽的氨基酸組成和結(jié)構(gòu)差別很大，且食品蛋白酶解的產(chǎn)物成分相當復(fù)雜，大大增加了分離純化的難度。目前分離提取肽的方法主要有超濾法、凝膠電泳法、毛細管電泳法、凝膠層析法、離子交換層析法、反相高效液相色譜法等[40]。Jang等[41]用超濾、Sephadex G-25柱層析和反相高效液相色譜聯(lián)用，從姬蘑的水提取物中分離純化得到兩種ACE抑制肽，IC50值分別為0.46、1.14mg/mL。Hasan等[15]從模擬人工胃液消化鰹魚肉的樣品中分離活性肽，先用反相PC-IACE親和柱分離，洗脫得到的組分再經(jīng)COSMOSIL 5C18-MS-II制備色譜柱，洗脫峰在215nm用光電二極管陣列檢測器（SPD-6AV）檢測。

6 ACE抑制肽活性測定與功能評價

ACE抑制肽活性檢測方法主要有體內(nèi)和體外兩種。很多研究發(fā)現(xiàn)降血壓肽的體內(nèi)外活性存在較大的差異[1，28]，認為體內(nèi)分析對于驗證肽的生理活性影響是必不可少的。此外，理論上的蛋白酶的特異性和體外消化實驗不能用于安全預(yù)測生物活性肽在胃腸消化中的情況，因為水解度可能會由于肽鏈長度、肽的性質(zhì)以及介質(zhì)中的其他肽的種類不同而有所不同。短鏈多肽在腸胃過程可得到保留，而長鏈活性多肽當以口服方式在機體發(fā)揮其生理效應(yīng)時，需要避免胃腸道酶的水解[1]。

6.1 體外檢測方法

目前體外檢測方法主要有三種：a.紫外分光光度法：Cushman和Cheung[42]建立了紫外分光光度法測定ACE抑制劑的活性。該方法是利用ACE在37℃，pH8.3條件下催化分解馬尿酰組氨酰亮氨酸（HHL）產(chǎn)生馬尿酸，通過測定有無抑制劑時，生成的馬尿酸在228nm處的紫外吸收差值得到其抑制活性，用IC50值表示。后續(xù)雖然也有學者對此方法進行了修改[43]，但該方法操作步驟較繁瑣，分析時間較長，對實驗操作要求甚高，易產(chǎn)生誤差。b.高效液相色譜法（HPLC）：徐蓉蓉等[44]采用HPLC建立一套新的快速測定方法，使HHL與生成的馬尿酸得到良好的分離，同時采用雙波長（228nm和215nm）檢測法以防止其他物質(zhì)如酶提取物中的小肽、雜質(zhì)等干擾馬尿酸的測定。該方法免去了改良Cushman和Cheung法[43]的繁瑣步驟，簡便、快速，具有良好的重復(fù)性。c.可見分光光度法：該方法的原理為。

FAPGG為淡黃色復(fù)合物，在345nm處有一吸收峰，與ACE作用后水解生成無色的FAP，使得在345nm吸收光度下降，通過光吸收減弱程度評價ACE抑制肽活性[8，45]。此外，高丹丹等[46]根據(jù)Gaffney紙層析法顯色原理提出了改進的分光光度計法，其依據(jù)是馬尿酸在乙酸酐中能與含對二甲氨基苯甲醛的吡啶溶液發(fā)生顯色反應(yīng)，生成桔黃色化合物。在一定濃度范圍內(nèi)，其顏色深淺與馬尿酸含量成正比，可以通過計算馬尿酸的生成量來計算ACE的抑制率。與傳統(tǒng)測定方法相比，該方法更加靈敏準確且重復(fù)性好。

6.2 體內(nèi)檢測方法

一般使用原發(fā)性高血壓大白鼠（Spontaneously Hypertensive Rat，SHR）來評價降血壓肽的生物學效應(yīng)，通過測量大白鼠攝入ACE抑制劑前后動脈收縮壓變化情況來判斷抑制功效的好壞。也可對大白鼠靜脈注射六甲銨（降壓藥），以除去與腎素-血管緊張素無關(guān)的調(diào)節(jié)系統(tǒng)的影響，再依次靜脈注射ACE抑制劑和AngI，大鼠血壓變化量的大小體現(xiàn)了ACE抑制肽的活性大小[8，47]。但是，由于體內(nèi)實驗費用昂貴、操作復(fù)雜、實驗周期長等缺點，其應(yīng)用受到一定的限制，在篩選ACE抑制肽的過程中可以先采用體外檢測法選出活性強的組分，再進行體內(nèi)檢測來確定其功效。

7 ACE抑制肽研究進展及趨勢

目前國內(nèi)外對食源性ACE抑制肽的研究已經(jīng)有很多，特別是乳源蛋白和魚蛋白來源的ACE抑制肽，但對其產(chǎn)量方面關(guān)注較少。近幾年來，工業(yè)化生產(chǎn)方面也僅僅是開發(fā)其作為保健食品或其添加物使用，如日本衛(wèi)生福利部批準的特定保健用食品——鰹魚干的嗜熱菌蛋白酶酶解物（稱為“katsuobushi oligopeptide”）[4]，以及乳制品Calpis?（日本）和Evolus?芬蘭）[28]，而真正作為藥物生產(chǎn)的很少見。因此加強對ACE抑制肽構(gòu)效關(guān)系的深入研究及臨床實驗，為降血壓肽藥物的生產(chǎn)提供依據(jù)是迫在眉睫要解決的問題。

[1]Phelan M，Kerins D.The potential role of milk-derived peptides in cardiovascular disease[J].Food and Function，2011，2（3-4）：153-167.

[2]Kearney P M，Whelton M，Reynolds K，et al.Global burden of hypertension：analysis of worldwide data[J].The Lancet，2005，9455：217-223.

[3]中華人民共和國衛(wèi)生部，中華人民共和國科學技術(shù)部，中華人民共和國國家統(tǒng)計局.中國居民營養(yǎng)與健康狀況[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2005：15-16.

[4]Li Guanhong，Le Guowei，Shi Yonghui，et al.Angiotensin I-converting enzyme inhibitory peptides derived from food proteins and their physiological and pharmacological effects[J].Nutrition Research，2004，24（7）：469-486.

[5]Colin I J.Renin-Angiotensin system：a dual tissue and hormonal system for cardiovascular control[J].Journal of Hypertension，1992，10（S1）：13-26.

[6]Edward W，Petrillo Jr，Miguel A O.Angiotensin-converting enzyme inhibitors：Medicinal chemistry and biological actions[J].Medicinal Research Reviews，1982，2（1）：1-41.

[7]梁漢縈，劉成梅，劉偉.食源性ACE抑制肽的研究進展[J].食品研究與開發(fā)，2007，28（8）：156-158.

[8]趙延華，龔吉軍，李振華，等.ACE抑制肽研究進展[J].糧食與油脂，2011（6）：42-46.

[9]Zhan Meijiang，Bo Tian，Brodkorb A，et al.Production，analysis and in vivo evaluation of novel angiotensin-I-converting enzyme inhibitory peptides from bovine casein[J].Food Chemistry，2010，123（3）：779-786.

[10]Pan Daodong，Guo Yuxing.Optimization of sour milk fermentation for the production of ACE-inhibitory peptides and purification of a novel peptide from whey protein hydrolysate[J].International Dairy Journal，2010，20（7）：472-479.

[11]Pan Daodong，Cao Jinxuan，Guo Huiqing.Studies on purification and the molecular mechanism of a novel ACE inhibitory peptide from whey protein hydrolysate[J].Food Chemistry，2012，130（1）：121-126.

[12]Bidasolo I B，Ramos M，Gomez-Ruiz J A.In vitro simulated gastrointestinal digestion of donkeys’ milk.Peptide characterization by high performance liquid chromatographtandem and mass spectrometry[J].International Dairy Journal，2012，24（2）：146-152.

[13]Nagatani Y.Antihypertensive function of Katwo.Bushio ligopeptide and utilization of Katwo-Bushi oligopeptide in food[J].Food processing，1996，31（8）：50-52.

[14]Cheng Jiwang，Wang Yimei，Zhong Qixin.Purification and characterization of a novel angiotensin-I converting enzyme（ACE）inhibitory peptide derived from enzymatic hydrolysate of grass carp protein[J].Peptides，2012，33（1）：52-58.

[15]Hasan F，Kumada Y，Hashimoto N，et al.Fragmention of angiotensin-I converting enzyme inhibitory peptides from bonito meat under intestinal digestion conditions and their characterization[J].Food and Bioproducts Processing，2006，84（2）：135-138.

[16]Lee S H，Qian Z J，Kim S K.A novel angiotensin I converting enzyme inhibitory peptide from tuna frame protein hydrolysate and its antihypertensive effect in spontaneously hypertensive rats[J].Food Chemistry，2010，118（1）：96-102.

[17]Lee J K，Jeon J K，Byun H G.Effect of angiotensin I converting enzyme inhibitory peptide purified from skate skin hydrolysate[J].Food Chemistry，2011，125（2）：495-499.

[18]Gu Ruizeng，Li Chenyue，Liu Wenying，et al.Angiotensin I-converting enzyme inhibitory activity of low-molecular-weight peptides from Atlantic salmon（Salmo salar L.） skin[J].Food Research International，2011，44（5）：1536-1540.

[19]Ngoa D H，Ryua B M，Vo T S，et al.Free radical scavenging and angiotensin-I converting enzyme inhibitory peptides from Pacific cod（Gadus macrocephalus） skin gelatin[J].International Journal of Biological Macromolecules，2011，49：1110-1116.

[20]江利華，王璋，許時瓔，等.花生ACE抑制肽的分離純化-結(jié)構(gòu)鑒定及體內(nèi)降血壓功能研究[J].食品工業(yè)科技，2009，30（10）：94-97.

[21]Kuba M，Tana C，Tawata S，et al.Production of angiotensin I-converting enzyme inhibitory peptides from soybean protein with Monascus purpureus acid proteinase[J].Process Biochemistry，2005，40（6）：2191-2196.

[22]Lin Feng，Chen Liang，Liang Rui，et al.Pilot-scale production of low molecular weight peptides from corn wet milling byproducts and the antihypertensive effects in vivo and in vitro[J].Food Chemistry，2011，124（3）：801-807.

[23]Jimsheena V K，Gowda L R.Angiotensin I-converting enzyme（ACE） inhibitory peptides derived from arachin by simulated gastric digestion[J].Food Chemistry，2011，125（2）：561-569.

[24]Yamadaa Y，Iwasaki M，Usui H，et al.Rapakinin，an antihypertensive peptide derived from rapeseed protein，dilates mesenteric artery of spontaneously hypertensive rats via the prostaglandin IP receptor followed by CCK1 receptor[J].Peptides，2010，31（5）：909-914.

[25]Pihlanto A，Virtanen T，Korhonen H.Angiotensin I converting enzyme（ACE） inhibitory activity and antihypertensive effect of fermented milk[J].International Dairy Journal，2010，20（1）：3-10.

[26]吳煒亮，吳國杰，梁道雙，等.ACE抑制肽的生理功能和研究進展[J].現(xiàn)代食品技術(shù)，2006，22（3）：251-254.

[27]戴軍，陳尚衛(wèi)，謝廣發(fā)，等.紹興黃酒中ACE活性抑制肽的分離分析[J].分析測試學報，2006，25（4）：74-77.

[28]Ryan J T，Ross R P，Bolton D，et al.Bioactive Peptides from Muscle Sources：Meat and Fish[J].Nutrients，2011，3（9）：765-791.

[29]Foltz M，Cerstiaens A，Meensel A，et al.The angiotensin converting enzyme inhibitory tripeptides Ile-Pro-Pro and Val-Pro-Pro show increasing permeabilities with increasing physiological relevance of absorption models[J].Peptides，2008，29（8）：1312-1320.

[30]趙任嵐，許傳蓮.血管緊張素轉(zhuǎn)換酶的結(jié)構(gòu)功能及相關(guān)抑制劑[J].生物工程學報，2008，24（2）：171-176.

[31]Coates D.The angiotensive converting enzyme（ACE）[J].The International Journal of Biochemistry&Cell Biology，2003，35（6）：769-773.

[32]Otte J，Shalaby S M，Zakora M，et al.Angiotensin-converting enzyme inhibitory activity of milk protein hydrolysates：Effect of substrate，enzyme and time of hydrolysis[J].International Dairy Journal，2007，17（7）：488-503.

[33]Kohmura M，Nio N，Kubo K，et al.Inhibition of angiotensinconverting enzyme by synthetic peptides of human β-casein[J].Agricultural and Biological Chemistry，1989，53（8）：2107-2114.

[34]Rho S J，Lee J S，Chung Y I，et al.Purification and identification of an angiotensin I-converting enzyme inhibitory peptide from fermented soybean extract[J].Process Biochemistry，2009，44（4）：490-493.

[35]Saiga A，Okumura T，Makihara T，et al.Angiotensin I-converting enzyme inhibitory peptides in a hydrolyzed chicken breastmuscle extract[J].JournalofAgriculture and Food Chemistry，2003，51（6）：1741-1745.

[36]Cushman D W，Cheung H S，Sabo E F，et al.Design of Potent Competitive Inhibition of Angiotensin Converting Enzyme[J].Biochemistry，1977，16（4）：5484-5488．

[37]Merker M P，Audi S H，Brantmeier B M，et al.Proline in vasoactive peptides：consequences for peptide hydrolysis in the lung[J].American Journal of Physiology，1999，276（2）：L341-L350.

[38]Fahmy A，Wagner G.TreeDock：A Tool for Protein Docking Based on Minimizing van der Waals Energies[J].Journal of American Chemical Society，2002，124（7）：1241-1250.

[39]Wang Zhanli，Zhang Saisai，Wang Wei，et al.A Novel Angiotensin I Converting Enzyme Inhibitory Peptide from the Milk Casein：Virtual Screening and Docking Studies[J].Agricultural Sciences in China，2011，10（3）：463-467.

[40]倪莉，陶冠軍，戴軍，等.血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑-絲素肽的分離、純化和結(jié)構(gòu)鑒定[J].色譜，2001，19（3）：222-225.

[41]Jang J H，Jeong S C，Kim J H，et al.Characterisation of a new antihypertensive angiotensin I-converting enzyme inhibitory peptide from Pleurotus cornucopiae[J].Peptides，2004，25（4）：621-627.

[42]Cushman D W，Cheung H S.Spectrophotometric assay and properties of the angiotensin-I-converting enzyme of rabbit lung[J].Biochem Pharmacol，1971，20：1637-1648.

[43]Yamamoto S，Toida I，lwaiK．Re-examination of spectrophotometric assay forserum angiotensin-converting enzyme[J].Nihon Kyobu Shikkann Shi，1980，18：297-302.

[44]徐榕榕，陶冠軍，李進偉，等.高效液相色譜測定血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制肽的活性[J].河南工業(yè)大學學報，2005，26（4）：18-21.

[45]孟向紅，黃君富，劉倩予.血漿ACE活性檢測新法[J].中華高血壓雜志，2000，8（3）：248.

[46]高丹丹，曹郁生，麥曦.改進的分光光度計法測定食源性多肽血管緊張素轉(zhuǎn)化酶的抑制活性[J].浙江大學學報，2011，37（2）：219-223.

[47]孫勤，陳季旺，夏文水，等.食品蛋白源ACE抑制肽的生理和生化性質(zhì)[J].武漢工業(yè)學院學報，2009，28（1）：27-31.

Research progress in food-derived angiotensin converting enzyme inhibitory peptides

DUAN Xiu，ZHANG Yu-feng，ZHUANG Yong-liang*
（Research Centre of Food Engineering，College of Chemistry and Engineering，Kunming University of Science and Technology，Kunming 650500，China）

TS201.1

A

1002-0306（2012）20-0388-06

2012－05－22 *通訊聯(lián)系人

段秀（1990-），女，碩士研究生，研究方向：功能食品。

國家自然科學基金項目（31101392）。