劉 萍

(云南省普洱市人民醫(yī)院，云南普洱665000)

自身免疫性疾病是指機(jī)體自身對自身抗原發(fā)生免疫反應(yīng)，從而導(dǎo)致自身組織損害所引起的疾病。病人血清中可檢測出高滴度的自身抗體。ANA譜的檢測在判斷疾病的活動(dòng)過程、觀察治療效果，以及指導(dǎo)臨床用藥等方面有重要的臨床意義[1］。臨床常見的自身免疫性疾病有系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)、干燥綜合癥(SS)、硬皮病(PSS)、多發(fā)性肌炎和皮肌炎(Pm/Dm)及混合型結(jié)締組織病(MCTD)、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)、原發(fā)性膽汁肝硬化(PBC)等。

1 資料與方法

1.1 一般材料:選取2008年至2011年本院經(jīng)臨床確診為自身免疫性疾病患者110例，為A組，有SLE 30例;SS 40例;PSS 12例;RA 15例;Pm/Dm 7例;MCTD 3例;PBC 3例。本院健康體檢者110例為B組。

1.2 標(biāo)本采集:取空腹血3mL，離心分離血清，－20℃冰箱保存。

1.3 檢測方法與試劑:ANA譜檢測采用免疫印跡法，試劑由德國歐蒙(杭州)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷有限公司研制生產(chǎn)。待測血清用標(biāo)本緩沖液1:101稀釋，將稀釋血清與檢測膜條反應(yīng)溫育。如果樣本陽性，特異性的IgG(也包括IgA和IgM)與相應(yīng)抗原結(jié)合，為檢測已結(jié)合的抗體，加入酶標(biāo)抗人IgG(酶結(jié)合物)進(jìn)行第二次溫育。然后加入酶底物液，以產(chǎn)生可觀察的顏色反應(yīng)。待膜條用吸水紙小心吸取水分，風(fēng)干后采用EUROLineScan評判結(jié)果，將待分析膜條放置在相應(yīng)的工作紙上，進(jìn)入EUROLineScan軟件，Test的代碼是Ana3(ANA譜3，14 個(gè)抗原)，LIDE 掃描[2］。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理:采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，陽性率之間的比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

ANA譜檢測自身免疫性疾病，A組自身抗體陽性檢出88例，陽性率為88/110，即80%。各類自身免疫性疾病單項(xiàng)或多項(xiàng)自身抗體陽性率分布見表1。因考慮到成本費(fèi)用，B組先采用間接免疫熒光篩選(試劑用歐蒙)，110例健康體檢者有7例陽性，再將這7例用歐蒙ANA譜試劑膜條分析。該組自身抗體陽性檢出7例，陽性率為7/110，即6.2%。但這7例抗原帶著色均較淺或無色，掃描分析結(jié)果均為陰性。

表1 各類自身免疫性疾病單項(xiàng)或多項(xiàng)自身抗體陽性分布

健康體檢采用間接免疫熒光篩選(試劑用歐蒙)，110例健康者有7例陽性，考慮到成本費(fèi)用，將這7例再用歐蒙ANA譜試劑膜條分析。抗原帶著色較淺或無色，掃描分析均為陰性。分析表1可知，各種自身抗體在膜條上的陽性率以SS－A、Ro－52、SS－B為主，為39%(43/110);ds－DNA、核小體次之，為5.4%(6/110);再者是nRNP/Sm，為4%，Sm為1.8%。各種疾病如SLE出現(xiàn)nRNP/Sm、SS－A、Ro－52、SS－B、ds－DNA、核小體、HI、核糖體 P 蛋白、Sm 多種抗體，SS出現(xiàn)SS－A、SS－B抗體頻率較高。PSS抗URNA、抗Sct－70為75%(10/12)，RA抗URNP為26%(4/15)，Pm/Dm、Jo－1為 50%(1/2)，MCTD 抗 URNP為 33%(1/3)，PBC、AMA－M2為66%(2/3)。

3 討論

自身免疫性疾病是以多個(gè)臟器系統(tǒng)損傷為特點(diǎn)所引起的疾病?？傮w上可分為器官特異性和系統(tǒng)性自身免疫病兩類。器官特異性自身免疫病指組織器官的病理損害和功能障礙，僅限于抗體或致敏淋巴細(xì)胞所針對的某一器官，如PBC。系統(tǒng)性自身免疫病指由于抗原抗體復(fù)合物廣泛沉積于血管壁等原因?qū)е氯矶嗥鞴贀p害，習(xí)慣上又稱為膠原或結(jié)締組織病[3］，如SLE、SS等。自身免疫疾病一般病理較長，慢性疾病，發(fā)作與緩解反復(fù)交替出現(xiàn)，任何年齡、性別均可發(fā)病，女性大于男性，常累計(jì)多器官多系統(tǒng)。自身免疫性疾病主要是自身免疫抗體存在于患者體內(nèi)。檢測患者自身免疫抗體也成為診斷自身免疫疾病的重要依據(jù)。采用ANA譜檢測可查到自身抗體14種(IgG)，不同的疾病可出現(xiàn)不同程度的陽性[4］。

3.1 系統(tǒng)性紅斑狼瘡SLE，病人血清中可出現(xiàn)多種自身抗體?？筍m和抗ds－DNA一起出現(xiàn)可為特異性診斷指標(biāo)(90%)。ds－DNA滴度的變化可以作為檢測SLE病情變化的實(shí)驗(yàn)指標(biāo)。

3.2 原發(fā)性干燥綜合征SS，是一種累積外分泌腺體的慢性炎性反應(yīng)疾病。SS－A、Ro－52、SS－B對原發(fā)性干燥綜合癥診斷具有較高敏感性，二者抗體幾乎總是相伴出現(xiàn)，40例SS患者中單獨(dú)出SS－A+Ro－52的有23例，單獨(dú)出現(xiàn)SS－B的有16例。在診斷干燥綜合癥時(shí)，抗SS－B抗體比抗SSA抗體更特異，是干燥綜合癥血清中的特異抗體。同時(shí)在其他自身免疫性疾病中也有抗SS－A和SS－B抗體出現(xiàn)，如SLE、RA，但血清滴度水平遠(yuǎn)低于干燥綜合癥。

3.3 進(jìn)行性系統(tǒng)硬化癥PSS，在12例皮膚有彌漫型多發(fā)性系統(tǒng)性硬化癥患者血清中有抗Scl－70抗體有10例。

3.4 多肌炎:抗Jo－1、PM－Scl對多發(fā)性肌炎具有較強(qiáng)特異性，2例患者中出現(xiàn)1例，陽性率為50%。

3.5 混合型結(jié)締組織病MCDT，在MCDT病中抗U1－RNP抗體幾乎均為陽性，且有較高滴度的血清水平?？贵w滴度與疾病活動(dòng)相關(guān)，在SLE也可檢出U1－RNP抗體，但幾乎均伴有Sm抗體。在沒有其他抗體存在的情況下，一般認(rèn)為抗U1－RNP抗體是MCDT的診斷指標(biāo)。

3.6 原發(fā)性膽汁性肝硬化PBC，高滴度的AMA－M2抗體是PBC的診斷指標(biāo)。在其他肝病(慢性肝臟疾病30%和進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥7% ～20%)中可見出抗體AMA－M2抗體，但滴度較低。若在PSS中出現(xiàn)AMA－M2可能是重疊有原發(fā)性膽汁肝硬化疾病。

總之，自身免疫性疾病因其發(fā)病原因至今未明，臨床表現(xiàn)變化多樣，不易被早期診斷。自身抗體14項(xiàng)抗體的檢測對多種自身免疫性疾病的診斷和鑒別診斷具有重要意義，但是存在一定的假陽性(就如本文中的110例健康者也有7例陽性)，還需要和其他檢測方法(如FII、ELSE、斑點(diǎn)法)聯(lián)合檢查。臨床醫(yī)生在對實(shí)驗(yàn)結(jié)果做出正確判斷之前，還要結(jié)合臨床表現(xiàn)、病史等，不能孤立地看待每項(xiàng)結(jié)果。應(yīng)將疾病全面衡量，以免本末倒置，給予正確的診斷疾病。

[1]劉軍鋒，賈克鋼，劉遠(yuǎn)德.免疫印記法檢測在自身免疫性疾病ENA多肽抗核抗體譜及臨床意義[J］.國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2006，27(7):669 －670.

[2]歐蒙公司:ANA譜(IgG)檢測試劑盒(歐蒙印跡法)產(chǎn)品說明書第5頁.

[3]張德法，崔毓祥，陳子慶，等.8種自身抗體聯(lián)合檢測對自身免疫性疾病診斷的臨床意義[J］.江蘇醫(yī)藥，2010，36(10):1123.

[4]劉蘭，陳娟.抗核抗體與5種自身免疫性疾病應(yīng)用[J］.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2010，7(20):2263 －2264.