李 宏，盧 欣，李美珍，常艷玲，房志仲

（1.天津醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院藥劑科，天津300211；2.天津醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院藥劑學(xué)教研室，天津市臨床藥物關(guān)鍵技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津300070）

高血壓是常見病，并且患病年齡越來越小，它存在著患病率高、死亡率高、殘疾率高和知曉率低、治療率低、控制率低的特點(diǎn)。復(fù)方氫氯噻嗪片劑，是氫氯噻嗪和纈沙坦的復(fù)方制劑，商品名為復(fù)代文（CoDiovan），于2008年7月獲準(zhǔn)在國內(nèi)上市，用于治療單一藥物不能充分控制血壓的輕度-中度原發(fā)性高血壓，作為需要多種藥物治療以使血壓達(dá)標(biāo)的高血壓患者的一線用藥。兩種藥物聯(lián)合作用，達(dá)到更好的降壓效果，使患者服藥方便。本文旨在建立自制復(fù)方氫氯噻嗪片劑的溶出度考察方法，為評價(jià)藥品質(zhì)量提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器 RCZ-8A智能藥物溶出儀（天津市鑫州科技有限公司）；ALC-210.4型電子分析天平（北京賽多利斯系統(tǒng)儀器有限公司）；針頭式微孔濾膜過濾器（Φ=13mm，0.45μm）；KQ-100B型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；美國高效液相色譜儀 Spectra-Physics，檢測器 Spectra Focus100，輸液泵SP8810；Anastar色譜工作站；2DY-…-…IKVA型高精度單相交流穩(wěn)壓電源（國營啟動(dòng)電訊廠）；酸度計(jì)PHS-25（數(shù)顯）；pH計(jì)（上海精密科學(xué)儀器有限公司）。

1.2 試劑 復(fù)方氫氯噻嗪片（市售：復(fù)代文160/12.5mg/TAB，NOVARTIS，批號(hào)：S0334；自制樣品）；甲醇（天津市康科德科技有限公司，色譜純）；乙腈（天津市康科德科技有限公司，色譜純）；其它試劑均為市售分析純；重蒸水（自制）。

1.3 色譜條件 色譜柱Kromasil C18（Φ200 mm×4.6mm，5μm）；流動(dòng)相：乙腈-水-冰醋酸（500∶500∶1）；檢測波長：230 nm；流速：0.5mL/min；進(jìn)樣量：20 μL；柱溫：室溫。

1.4 溶出方法的建立[1-3]

1.4.1 溶出度測定方法的選擇 按《中國藥典》2010版（二部）附錄ⅩC溶出度測定方法[4]，分別采用轉(zhuǎn)籃法與槳法進(jìn)行對照制劑的溶出度測定，轉(zhuǎn)速為100 r/min。其他條件：以水為溶出介質(zhì)，1 000mL，溫度：37 ℃±0.5 ℃，分別于 5、10、15、20、25、30、45、60 min取樣10 mL，同時(shí)補(bǔ)加等量同溫介質(zhì)，用0.45μm微孔濾膜濾過，棄去初濾液，取續(xù)濾液在上述色譜條件下進(jìn)樣。計(jì)算累積釋放百分率。

1.4.2 轉(zhuǎn)速的選擇 測定當(dāng)轉(zhuǎn)速分別為50 r/min和100 r/min時(shí)本品的溶出度，考察轉(zhuǎn)速對本品的溶出度影響。其他條件為：槳法，以水為溶出介質(zhì)，1 000 mL，溫度：37 ℃±0.5 ℃，分別于 5、10、15、20、25、30、45、60min取樣10mL，同時(shí)補(bǔ)加等量同溫介質(zhì)，用0.45μm微孔濾膜濾過，棄去初濾液，取續(xù)濾液在上述色譜條件下進(jìn)樣。計(jì)算累積釋放百分率。

1.4.3 溶出介質(zhì)的選擇 測定對照制劑在0.1mol HCl、蒸餾水、磷酸鹽緩沖液（PBS）PBS 4.5 及 PBS 6.8中的溶出度。其他條件：槳法，50 r/min，溶出介質(zhì)：1 000mL，溫度：37 ℃±0.5 ℃，分別于 5、10、15、20、25、30、45、60min 取樣 10mL，同時(shí)補(bǔ)加等量同溫介質(zhì)，用0.45μm微孔濾膜濾過，棄去初濾液，取續(xù)濾液在上述色譜條件下進(jìn)樣。計(jì)算累積釋放百分率。

1.4.4 溶出曲線的繪制 按《中國藥典》2010年版（二部）附錄ⅩC第二法測定。取本品，溶出介質(zhì)：PBS 6.8，1 000mL，溫度：37℃±0.5℃，轉(zhuǎn)速 50 r/min進(jìn)行，于 5、10、15、20、25、30、45、60min 取樣 10mL，同時(shí)補(bǔ)加等量同溫介質(zhì)，用0.45μm微孔濾膜濾過，棄去初濾液，取續(xù)濾液在上述色譜條件下進(jìn)樣。計(jì)算累積釋放百分率。

1.5 相似因子法（the similarity factor,f2）[5-7]固體制劑的體外溶出度數(shù)據(jù)是評價(jià)一種藥物制劑不同品種、不同廠家、不同批次間質(zhì)量的重要數(shù)據(jù)。相似因子法（如公式1-1和1-2）是美國FDA推薦使用評價(jià)固體制劑體外溶出曲線是否相似的方法。f2的計(jì)算結(jié)果應(yīng)≤100。f2越趨近100，表明兩種制劑的體外溶出度曲線差異越小。若f2=100，則表示兩種制劑溶出度曲線完全吻合。美國FDA規(guī)定f2值在50～100之間可以認(rèn)為兩種處方制劑在同一釋藥條件中或同一處方制劑在不同釋藥條件中釋藥無差別。被廣泛應(yīng)用于比較溶出曲線、篩選處方、評價(jià)藥物穩(wěn)定性、優(yōu)化劑型、評價(jià)批間重現(xiàn)性等。

式中，Rt為t時(shí)間對照藥品的溶出度，Tt為t時(shí)間試驗(yàn)藥品的溶出度，W為適宜的權(quán)重因子（本試驗(yàn)中 W=1.0）。

相似因子 f2：f2=50×lg[(1+Q/n)-0.5×100]（1-2）

2 結(jié)果

2.1 溶出方法選擇的結(jié)果 兩藥在不同溶出方法下的溶出曲線如圖1～2。試驗(yàn)結(jié)果表明：兩種藥物溶出時(shí)采用槳法，達(dá)穩(wěn)的時(shí)間比采用轉(zhuǎn)籃法達(dá)穩(wěn)的時(shí)間早，并且根據(jù)USP32-NF27規(guī)定，選擇溶出第二法。

2.2 轉(zhuǎn)速選擇的結(jié)果 兩藥在不同轉(zhuǎn)速下的溶出曲線如圖3～4。試驗(yàn)結(jié)果表明：50 r/min達(dá)穩(wěn)的時(shí)間與100 r/min達(dá)穩(wěn)的時(shí)間相差不多，但最后60min時(shí)累積溶出百分率相近，并且根據(jù)USP32-NF27規(guī)定，轉(zhuǎn)速選用50 r/min。

2.3 溶出介質(zhì)選擇的結(jié)果 兩藥在不同溶出介質(zhì)的溶出曲線如圖5～6。試驗(yàn)結(jié)果表明：纈沙坦在PBS 6.8中的溶出結(jié)果最好，氫氯噻嗪在這幾種溶出介質(zhì)的溶出結(jié)果差異不大，兩種藥物在PBS 6.8中達(dá)穩(wěn)的時(shí)間比其他溶出介質(zhì)達(dá)穩(wěn)的時(shí)間早，為試驗(yàn)方便，減少使用多種溶出介質(zhì)之間的誤差，因此選擇一種溶出介質(zhì)。并且根據(jù)USP32-NF27規(guī)定，選用PBS 6.8為溶出介質(zhì)。

2.4 溶出曲線的繪制結(jié)果 最終確定本品的溶出條件為1 000mLPBS 6.8為溶出介質(zhì)、槳法轉(zhuǎn)速為50 r/min的溶出方法。在此方法下，繪制的溶出曲線如圖 7～8。

2.5 自制片劑與市售制劑的相似性比較 將自制樣品與市售制劑用已建立的溶出方法進(jìn)行溶出實(shí)驗(yàn)，計(jì)算f2因子，結(jié)果見圖9～10。在4種介質(zhì)中，纈沙坦與氫氯噻嗪f2因子結(jié)果見表1，自制樣品中兩藥與市售制劑溶出行為相似，均符合要求。

表1 在不同介質(zhì)中對照制劑與自制片中兩種藥物的f2值的比較Tab1 Sim ilarity analysisof two drugsof producer and control agents in the different media

2.6 溶出動(dòng)力學(xué)模擬 運(yùn)用一級釋藥模型、單指數(shù)釋藥模型及威布爾（Weibull）分布模型對復(fù)方氫氯噻嗪片劑和對照制劑的兩種主藥在PBS 6.8中的累積溶出度數(shù)據(jù)進(jìn)行擬合。釋藥動(dòng)力學(xué)參數(shù)見表2～4。公式分別為：

表2 自制片的溶出動(dòng)力學(xué)模擬Tab2 The dissolution dynam icssi mulation of the producer

表3 對照制劑的溶出動(dòng)力學(xué)模擬Tab3 Thedissolution dynam icssi mulation of the controlagents

表4 威布爾釋藥模型的參數(shù)表Tab4 W eibullparam etersof the drug delivery model table

根據(jù)表中r值所示，威布爾釋藥模型中r值最大，因此自制片和對照制劑中兩種藥物均符合威布爾釋藥模型。

3 討論

對于水難溶性藥物，若想使體外溶出試驗(yàn)盡可能反映其在體內(nèi)的釋放和吸收情況，選擇合適的、具有較強(qiáng)區(qū)分能力的溶出介質(zhì)非常重要。新鮮蒸餾水應(yīng)為首選；其次為類似胃腸液的基質(zhì)（如通過加入鹽酸和胃酸及不同pH的緩沖液來模擬人體胃內(nèi)酸性環(huán)境）。對于一些水溶性較差的藥物，可在溶出介質(zhì)中加入適量的表面活性劑。當(dāng)含有表面活性劑的溶液并不能有效地反映藥物在體內(nèi)的溶出和吸收時(shí)，可以加入乙醇、異丙醇等有機(jī)溶劑。但在溶出過程中，有機(jī)溶劑的揮發(fā)會(huì)使介質(zhì)組成發(fā)生變化，影響溶出結(jié)果，且有機(jī)溶劑的使用也可能影響含淀粉片劑的崩解，不推薦使用。

溶出度是固體制劑在規(guī)定溶劑中溶出的速度和程度，與體內(nèi)生物利用度密切相關(guān)，可用于評價(jià)藥物制劑的內(nèi)在質(zhì)量。本研究對復(fù)方氫氯噻嗪片的溶出度測定各項(xiàng)條件進(jìn)行比較，對溶出方法、溶出介質(zhì)以及轉(zhuǎn)速進(jìn)行了篩選考察，最終確立了以PBS6.8為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速50 r/min的槳法作為該制劑中藥物溶出度的測定方法。該法操作簡便、準(zhǔn)確，重復(fù)性良好，可為制定氫氯噻嗪片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。

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