常 蘭， 張鵬飛， 陳付菊， 格日力

(1青海大學(xué)農(nóng)牧學(xué)院，青海 西寧 810016; 2青海大學(xué)醫(yī)學(xué)院高原醫(yī)學(xué)研究中心，青海 西寧 810001)

1000-4718(2012)09-1658-07

2011-11-29

2012-06-29

國家973計劃項目(No.2012CB518200)；國家自然科學(xué)基金資助項目(No. 31161861)；青海省重點科技攻關(guān)項目(No.2003-N-120)；教育部春暉計劃項目(No.Z2010062)

△通訊作者 Tel 0971-6142063; Email:gerili@hotmail.com

藏羚羊和藏綿羊小腸黏膜結(jié)構(gòu)和黏膜免疫相關(guān)細(xì)胞的比較*

常 蘭1， 張鵬飛1， 陳付菊1， 格日力2△

(1青海大學(xué)農(nóng)牧學(xué)院，青海 西寧 810016;2青海大學(xué)醫(yī)學(xué)院高原醫(yī)學(xué)研究中心，青海 西寧 810001)

目的比較藏羚羊和藏綿羊小腸黏膜結(jié)構(gòu)和黏膜免疫相關(guān)細(xì)胞的特征。方法采用組織學(xué)、組織化學(xué)方法和圖像分析法在光鏡和電鏡水平對5只藏羚羊和5只藏綿羊小腸不同腸段的黏膜結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀測，并對上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞、杯狀細(xì)胞和肥大細(xì)胞的數(shù)量進(jìn)行統(tǒng)計分析。結(jié)果藏羚羊小腸各段絨毛長度和絨毛長度與隱窩深度比值(villus length/crypt depth，V/C)均顯著高于藏綿羊(P<0.05)，其中藏羚羊十二指腸、空腸和回腸的絨毛長度分別比藏綿羊高77.25%(P<0.05)、63.61%(P<0.05)和35.38%(P<0.05)，而V/C值分別比藏綿羊高65.63%(P<0.05)、20.08%(P<0.05)和35.68%(P<0.05)，藏羚羊小腸黏膜的厚度顯著大于藏綿羊(P<0.05)，而藏羚羊和藏綿羊小腸肌層厚度差異不顯著(P>0.05)；藏羚羊小腸各段上皮內(nèi)杯狀細(xì)胞和肥大細(xì)胞數(shù)量顯著多于藏綿羊(P<0.05)，其中藏羚羊十二指腸、空腸和回腸中的上皮內(nèi)杯狀細(xì)胞數(shù)量分別比藏綿羊的多12.84%(P<0.05)、49.88%(P<0.05)和5.58%(P>0.05)，藏羚羊十二指腸、空腸和回腸中的肥大細(xì)胞的數(shù)量比藏綿羊的分別多0.22%(P>0.05)、6.04%(P>0.05)和160.80%(P<0.05)，而藏羚羊小腸各段上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞數(shù)量顯著低于藏綿羊(P<0.05)，其中藏羚羊十二指腸、空腸和回腸的上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞數(shù)量分別比藏綿羊的少35.04%(P<0.05)、52.85%(P<0.05)和52.82%(P<0.05)。結(jié)論藏羚羊小腸消化吸收功能強于藏綿羊，藏羚羊的小腸黏膜免疫屏障功能也強于藏綿羊，且在藏羚羊小腸杯狀細(xì)胞和肥大細(xì)胞起重要的黏膜防御功能，而在藏綿羊小腸中上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞起重要的黏膜免疫屏障功能。

藏羚羊； 藏綿羊； 小腸； 黏膜結(jié)構(gòu)； 黏膜免疫相關(guān)細(xì)胞

藏羚羊(Pantholopshodgsonii) 為青藏高原特有物種, 也是世界上最為珍稀的物種之一，主要棲息于海拔3 500～5 500 m的高寒低氧地區(qū), 現(xiàn)已被列入《瀕危野生動植物種國際貿(mào)易公約》和國家一級保護(hù)動物。藏羚羊種群是構(gòu)成青藏高原特有自然生態(tài)系統(tǒng)中極為重要的組成部分。在長期的適應(yīng)與進(jìn)化過程中，藏羚羊在呼吸、心血管、內(nèi)分泌及基因等多方面形成了獨特的適應(yīng)高寒低氧環(huán)境的機制[1-3]。而在消化功能方面，曹俊虎等[4]對藏羚羊冷季干物質(zhì)的消化效率研究發(fā)現(xiàn)，在嚴(yán)酷的生活環(huán)境下對牧草干物質(zhì)的消化率較高。那么，藏羚羊在高寒低氧、食物匱乏的環(huán)境中能夠生存并且對細(xì)菌、病毒、寄生蟲等疾病表現(xiàn)出強的抵抗能力，其消化系統(tǒng)尤其是小腸有何特征？為此，本研究運用組織學(xué)、組織化學(xué)方法和圖像分析法在光鏡和電鏡水平對生活在同一海拔地區(qū)的藏羚羊和藏綿羊小腸黏膜結(jié)構(gòu)和黏膜免疫相關(guān)細(xì)胞進(jìn)行了比較研究。

材 料 和 方 法

1動物和樣品的處理

經(jīng)國家林業(yè)局批準(zhǔn)(林護(hù)許準(zhǔn)[2009]46號),于2009年4月在青海省可可西里國家級自然保護(hù)區(qū)(海拔4 300 m)捕捉雄性藏羚羊和藏綿羊各5只(據(jù)齒齡所捕獲藏羚羊和藏綿羊的年齡均在2～3歲左右)，頸總動脈放血處死,迅速取十二指腸、空腸和回腸中段各2 cm左右快速分別置入4%多聚甲醛磷酸緩沖液(0.1 mol/L,pH 7.4)、Carnoy固定液，搖勻，固定48 h，運回西寧。按常規(guī)石蠟切片包埋，制作橫斷面切片，厚3 μm，每隔10張取1張，進(jìn)行HE染色、高碘酸-Schiff(periodic acid-Schiff,PAS)染色和改良甲苯胺藍(lán)(modified toluidine blue,MTB)染色。

藏羚羊和藏綿羊十二指腸、空腸和回腸中段經(jīng)2.5%戊二醛固定后送往蘭州大學(xué)醫(yī)學(xué)部進(jìn)行掃描電鏡制樣。

2檢測指標(biāo)和方法

經(jīng)HE染色后，光鏡下觀察藏羚羊和藏綿羊小腸壁的結(jié)構(gòu)。每只羊各段小腸取5張切片，每張切片選5個視野，數(shù)碼拍照，應(yīng)用Scion Image圖像處理軟件在每張照片中測量5根最長的絨毛長度(以腸腺絨毛連接處到絨毛頂端為準(zhǔn))、最深的隱窩深度(以腸腺絨毛連接處到腸腺基部為準(zhǔn))和最厚的黏膜厚度以及肌層厚度。

光鏡下觀察上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞、杯狀細(xì)胞及肥大細(xì)胞的形態(tài)分布。每只羊各段小腸取5張切片，每張切片中選取5根柱狀細(xì)胞排列整齊且最長的腸絨毛，統(tǒng)計每100個柱狀細(xì)胞中分布的上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞和杯狀細(xì)胞數(shù)量。肥大細(xì)胞的計數(shù)是每只動物各段小腸分別統(tǒng)計5張切片橫斷面全層的肥大細(xì)胞數(shù)，并用Moditec照相處理軟件，計算單位面積內(nèi)的肥大細(xì)胞數(shù)。

掃描電鏡下觀察藏羚羊和藏綿羊小腸絨毛的形態(tài)結(jié)構(gòu)。

3統(tǒng)計學(xué)處理

結(jié) 果

1藏羚羊和藏綿羊小腸黏膜形態(tài)結(jié)構(gòu)的觀測

1.1藏羚羊和藏綿羊小腸黏膜形態(tài)結(jié)構(gòu)的觀察 光鏡下觀察，小腸從內(nèi)到外分為黏膜、黏膜下層、肌層和漿膜，藏羚羊小腸黏膜厚，絨毛細(xì)而高，見圖1A；藏綿羊小腸黏膜明顯薄，絨毛短而寬，呈指狀，見圖1B。掃描電鏡結(jié)果顯示，藏羚羊十二指腸絨毛呈薄片狀，排列密集，腸絨毛表面隆突較多，見圖2A、C，空腸絨毛呈板狀、指狀，回腸絨毛呈指狀；藏綿羊十二指腸絨毛呈板狀，排列也密集，腸絨毛表面隆突相對較少，見圖2B、D，空腸和回腸絨毛均呈指狀。

Figure 1. The mucosal structure of duodenum in Tibetan antelopes (A) and Tibetan sheep (B)(HE staining, ×100).☆:villus;★: intestinal gland.

圖1藏羚羊和藏綿羊十二指腸黏膜結(jié)構(gòu)

Figure 2. The villus ultrastructure scanning electron images of duodenum in Tibetan antelopes(A,C) and Tibetan sheep (B,D).

圖2藏羚羊和藏綿羊十二指腸絨毛掃描電鏡圖

1.2藏羚羊和藏綿羊小腸絨毛長度 由表1可以看出，藏羚羊小腸各段腸管絨毛長度顯著長于藏綿羊(P<0.05)，其中十二指腸、空腸和回腸的絨毛比藏綿羊的長77.25%(P<0.05)、63.61%(P<0.05)和35.38%(P<0.05)；比較同種動物小腸不同腸段,藏羚羊以十二指腸最高，回腸次之，空腸最低。其中藏羚羊十二指腸絨毛比空腸和回腸的分別高69.31%(P<0.05)和61.12% (P<0.05)，而空腸與回腸間差異不顯著(P>0.05)；藏綿羊十二指腸絨毛比空腸和回腸的分別高56.30%(P<0.05)和23.06% (P<0.05)，回腸比空腸的高27.01%(P<0.05)。

表1 藏羚羊和藏綿羊小腸絨毛的長度

*P<0.05vsTibetan sheep;△P<0.05vsileum;▲P<0.05vsjejunum.

1.3藏羚羊和藏綿羊小腸絨毛長度與隱窩深度比值(V/C值) 從表2可知，藏羚羊小腸各腸段V/C值均顯著高于藏綿羊(P<0.05)。其中藏羚羊十二指腸、空腸和回腸的V/C值分別比藏綿羊的高65.63%(P<0.05)、20.08%(P<0.05)和35.68%(P<0.05)；比較同種動物小腸不同腸段, 藏羚羊和藏綿羊的V/C值差異均顯著(P<0.05)，其中藏羚羊的V/C值以十二指腸最大，空腸次之，回腸最小；而藏綿羊的V/C值以空腸的最大，十二指腸次之，回腸也是最小。

表2 藏羚羊和藏綿羊小腸絨毛長度與隱窩深度比值

*P<0.05vsTibetan sheep;△P<0.05vsileum;▲P<0.05vsjejunum.

1.4藏羚羊和藏綿羊小腸黏膜厚度 從表3看出，藏羚羊小腸黏膜的厚度顯著大于藏綿羊(P<0.05)。其中藏羚羊十二指腸、空腸和回腸黏膜分別比藏綿羊的厚44.45% (P<0.05)、 9.74%(P<0.05)和15.96%(P<0.05)；比較同種動物小腸不同腸段的黏膜厚度，藏羚羊和藏綿羊均以十二指腸最厚，空腸次之，回腸最薄。其中藏羚羊十二指腸黏膜顯著厚于空腸和回腸(P<0.05)，但空腸和回腸之間差異不顯著(P>0.05)；藏綿羊十二指腸和空腸黏膜厚度均顯著厚于回腸(P<0.05)，但十二指腸和空腸之間差異不顯著(P>0.05)。

表3 藏羚羊和藏綿羊小腸黏膜厚度

*P<0.05vsTibetan sheep;△P<0.05vsileum;▲P<0.05vsjejunum.

1.5藏羚羊和藏綿羊小腸肌層厚度 從表4看出，藏羚羊和藏綿羊小腸肌層厚度差異不顯著(P>0.05)，其中藏羚羊十二指腸和回腸的肌層分別比藏綿羊的薄16.30%(P<0.05)和12.80%(P<0.05)，而空腸比藏綿羊的厚4.35%(P>0.05)；比較同種動物小腸不同腸段的肌層厚度，藏羚羊以空腸最厚，十二指腸次之；藏綿羊以十二指腸最厚，空腸次之。

表4 藏羚羊和藏綿羊小腸肌層厚度

*P<0.05vsTibetan sheep;△P<0.05vsileum;▲P<0.05vsjejunum

2藏羚羊和藏綿羊小腸黏膜免疫相關(guān)細(xì)胞的研究

2.1小腸黏膜免疫相關(guān)細(xì)胞的形態(tài)觀察 經(jīng)HE染色后，在光鏡下觀察, 上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞散在分布于腸絨毛柱狀上皮細(xì)胞之間，細(xì)胞核大而圓,深染,胞漿較少，在小腸各段均有分布，見圖3A、B；杯狀細(xì)胞經(jīng)PAS染色后呈紅色，呈高腳杯狀，散布于柱狀細(xì)胞之間。藏羚羊的杯狀細(xì)胞較多，頂部胞質(zhì)由大量糖原顆粒充滿，藏綿羊杯狀細(xì)胞纖細(xì)，并且數(shù)量較少，見圖3C、D；肥大細(xì)胞經(jīng)甲苯胺藍(lán)染色后,呈紫紅色, 形態(tài)有圓形、橢圓形、梭形和不規(guī)則形，藏羚羊和藏綿羊的十二指腸和空腸肥大細(xì)胞分布在腸絨毛、腸腺之間的固有膜和肌層，并且在腸腺之間的固有層中相對較多，平滑肌層也有零星分布，而在漿膜極少見，藏羚羊的回腸肥大細(xì)胞則密集分布于固有層, 平滑肌層中也較多，藏綿羊的回腸肥大細(xì)胞散布于腸絨毛、腸腺之間的固有膜、肌層，數(shù)量較少，見圖3E、F。

2.2小腸上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞的數(shù)量 由表5可知，藏羚羊小腸上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞數(shù)量顯著低于藏綿羊(P<0.05)，其中藏羚羊十二指腸、空腸和回腸上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞數(shù)量分別比藏綿羊的少35.04%(P<0.05)、52.85%(P<0.05)和52.82%(P<0.05)；比較同種動物小腸不同腸段，藏羚羊和藏綿羊上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞的數(shù)量均以回腸數(shù)量最多，空腸次之，十二指腸最少，其中藏羚羊回腸上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞數(shù)量比十二指腸和空腸分別多87.21%(P<0.05)和28.51%(P<0.05)。藏綿羊回腸上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞數(shù)量比十二指腸和空腸分別多157.75%(P<0.05)和 28.41%(P<0.05)。

2.3小腸杯狀細(xì)胞的數(shù)量 從表6可以看出，藏羚羊小腸內(nèi)杯狀細(xì)胞數(shù)量顯著多于藏綿羊(P<0.05)。其中十二指腸、空腸和回腸中的杯狀細(xì)胞數(shù)量分別比藏綿羊的多12.84%(P<0.05)、49.88%(P<0.05)和5.58%(P>0.05)；比較小腸不同腸段的杯狀細(xì)胞數(shù)量，藏羚羊在空腸最多，分別比十二指腸、回腸多16.20%(P<0.05)和35.39 %(P<0.05)，十二指腸與回腸之間差異顯著；而藏綿羊則以十二指腸為最多，分別比空腸和回腸段多14.30%(P<0.05)和9.02 %(P<0.05)，但空腸與回腸之間差異不顯著。

Figure 3. The intraepithelial lymphocytes, goblet cells and mast cells in duodenum of Tibetan antelopes and Tibetan sheep (×400). A,B:intraepithelial lymphocytes (HE staining, arrows); C,D: goblet cells (PAS staining,arrows); E, F: mast cells(MTB staining, arrows); A,C,E: Tibetan antelopes; B,D,F: Tibetan sheep.

圖3藏羚羊和藏綿羊十二指腸上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞、杯狀細(xì)胞和回腸肥大細(xì)胞

表5藏羚羊和藏綿羊小腸上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞的數(shù)量

GroupSmallintestineDuodenumJejunumIleumTibetanantelope19．52±0．61?13．53±0．50?△▲19．71±0．92?△25．33±1．15?Tibetansheep38．78±1．1220．83±0．85△▲41．81±1．11△53．69±1．39

*P<0.05vsTibetan sheep;△P<0.05vsileum;▲P<0.05vsjejunum.

表6 藏羚羊和藏綿羊小腸內(nèi)杯狀細(xì)胞的數(shù)量

*P<0.05vsTibetan sheep;△P<0.05vsileum;▲P<0.05vsjejunum.

2.4小腸肥大細(xì)胞的數(shù)量 由表7可知，藏羚羊小腸肥大細(xì)胞數(shù)量顯著多于藏綿羊(P<0.05)。其中藏羚羊的十二指腸和空腸肥大細(xì)胞數(shù)量比藏綿羊的分別多0.22%(P>0.05)和6.04%(P>0.05)，藏羚羊的回腸肥大細(xì)胞數(shù)量比藏綿羊的多160.79% (P<0.05)；比較同種動物小腸各腸段的肥大細(xì)胞數(shù)量，藏羚羊和藏綿羊的差異均顯著(P<0.05)。其中藏羚羊以回腸為最多，十二指腸次之；藏綿羊小腸從前向后肥大細(xì)胞數(shù)量逐漸減少。

表7 藏羚羊和藏綿羊小腸肥大細(xì)胞的數(shù)量

*P<0.05vsTibetan sheep;△P<0.05vsIleum;▲P<0.05vsjejunum.

討 論

小腸的正常組織結(jié)構(gòu)是營養(yǎng)物質(zhì)被充分消化和吸收的基本結(jié)構(gòu)保證，尤其是小腸的絨毛長度、絨毛表面積、隱窩深度、V/C值、黏膜厚度及肌層厚度是衡量小腸消化吸收功能的重要指標(biāo)。小腸絨毛長度、粗細(xì)以及黏膜厚度的增加可直接使小腸表面積擴大，有利于營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，同時小腸黏膜表面積擴大也有利于消化酶等物質(zhì)的分泌進(jìn)入腸道，益于對攝入物質(zhì)的消化[5-6]。腸隱窩(腸腺)是絨毛基部上皮下陷至固有膜內(nèi)形成的管狀結(jié)構(gòu)，其開口在相鄰的腸絨毛之間，可分泌含有多種消化酶的小腸液，對各種營養(yǎng)成分最終分解為可吸收的產(chǎn)物發(fā)揮重要作用，而且大量的小腸液可以稀釋消化產(chǎn)物使其滲透壓下降，更有利于吸收[7]。V/C值綜合反映小腸的功能狀況，比值較低，消化吸收功能就較低，比值較高，消化吸收功能較強。

藏羚羊主要棲息于海拔4 000 m以上的高原低氧環(huán)境中，具有耐高寒、抗缺氧、對食物的要求單一。例如在長達(dá)7個月左右的牧草枯草期，尤其冬季草原經(jīng)常被大雪覆蓋，導(dǎo)致藏羚羊所能獲取的食物極為有限，但其生存能力極強，其原因可能與它的消化能力有關(guān)。據(jù)曹俊虎等[4]對藏羚羊冷季干物質(zhì)的消化效率研究表明，藏羚羊在枯草期對禾本科牧草上部(含種子)、禾本科莖桿及禾本科牧草、混合牧草干物質(zhì)的消化率分別為72.56%、65.60%和70.86%,發(fā)現(xiàn)藏羚羊冬季對牧草的消化率比野生藏綿羊、高山草原放牧綿羊、公山羊、哺乳期的母山羊以及高山山羊等反芻動物的干物質(zhì)的消化率(40%～64%)高, 雖然部分動物干物質(zhì)消化率的數(shù)據(jù)取自夏季生長牧場, 但所測得消化率值依然顯著低于所測藏羚羊?qū)Ω晌镔|(zhì)的消化率。這表明在嚴(yán)酷的生活環(huán)境下,藏羚羊通過對牧草干物質(zhì)較高的消化率為其生存提供了一定的條件。本研究結(jié)果表明藏羚羊腸絨毛細(xì)而高，尤其十二指腸絨毛呈薄片狀，排列密集，絨毛表面隆突較多,而藏綿羊腸絨毛寬而低，其十二指腸絨毛呈板狀，腸絨毛表面隆突相對較藏羚羊的少，藏羚羊黏膜厚度也顯著大于藏綿羊，說明藏羚羊腸黏膜與腸內(nèi)容物的接觸面積比藏綿羊的大，有利于更好地吸收；藏羚羊小腸的V/C值顯著高于藏綿羊，說明藏羚羊小腸的消化吸收功能比藏綿羊的強，這為揭示藏羚羊小腸在食物極為有限的生境中對高海拔低氧環(huán)境的適應(yīng)提供部分形態(tài)學(xué)依據(jù)。

腸道不僅是動物體內(nèi)最大的消化吸收器官同時也是最大的免疫器官，腸黏膜是機體抵抗外源物質(zhì)及微生物的重要免疫屏障[8]。腸道免疫學(xué)屏障主要由腸相關(guān)淋巴組織和腸道相關(guān)黏膜免疫細(xì)胞共同構(gòu)成,后者包括淋巴細(xì)胞、肥大細(xì)胞和杯狀細(xì)胞等。腸道中有2種不同表型的淋巴細(xì)胞存在,即分散在上皮細(xì)胞層中的腸上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞(intestinal intraepithelial lymphocyte，IEL)和位于疏松結(jié)締組織中的固有膜淋巴細(xì)胞，IEL作為腸道相關(guān)淋巴組織中的一個特殊組分,是機體免疫系統(tǒng)中與外來抗原以及微生物最先接觸的免疫細(xì)胞,同時也是最先發(fā)生免疫反應(yīng)的細(xì)胞, IEL識別上皮細(xì)胞是否受細(xì)菌、病毒的感染, 并分泌細(xì)胞因子以發(fā)揮抗細(xì)菌、抗病毒、抗感染的作用,分散在上皮內(nèi)的淋巴細(xì)胞越多，防御病原微生物入侵的能力就越強[9]。通過消化道接種微生物，可使分散在上皮內(nèi)的淋巴細(xì)胞增多，黏膜免疫能力增強，從而反證了分散在上皮內(nèi)的淋巴細(xì)胞數(shù)量的變化與微生物之間的關(guān)系。本研究結(jié)果顯示藏羚羊小腸上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞數(shù)量顯著低于藏綿羊，推測可能是藏羚羊所采食物純天然，常年受太陽強輻射、干燥、寒冷的直接影響，尤其是藏羚羊活動范圍很廣，完全自由式采食，在同一草場重復(fù)采食的幾率較低，相應(yīng)的其所采食區(qū)域污染較少，這樣所采食物中病原微生物種類數(shù)量可能較少或病原微生物的致病能力可能不強，而生活在同一海拔的藏綿羊一般白天放牧，且在固定草場輪牧，而夜間歸圈，草場被糞便、尿液等污染的機會大，小腸黏膜受抗原刺激的可能性較大，這樣藏羚羊小腸少量的上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞能夠完全滿足執(zhí)行相應(yīng)的免疫功能的需要。

杯狀細(xì)胞是一種典型的糖蛋白分泌細(xì)胞，其分泌的黏蛋白釋入管腔內(nèi)成為潤滑性黏液涂布于上皮表面，在一定程度上通過黏附阻擋病原生物和有害物質(zhì)的正面破壞，阻止毒素與上皮細(xì)胞接觸，對上皮具有保護(hù)作用[10]。小腸上皮內(nèi)杯狀細(xì)胞在抗感染、調(diào)節(jié)上皮細(xì)胞的完整性和外來抗原的免疫應(yīng)答等方面起重要作用，其數(shù)量的變化可以在一定程度上反映消化道的局部免疫狀況[11]。本研究結(jié)果顯示藏羚羊小腸杯狀細(xì)胞數(shù)量顯著高于藏綿羊，藏羚羊小腸上皮內(nèi)較多的杯狀細(xì)胞能夠使藏羚羊小腸黏膜得到更好的保護(hù)，這也為藏羚羊小腸適應(yīng)高原食物極度匱乏的生境提供了一定的形態(tài)學(xué)依據(jù)。

肥大細(xì)胞是天然免疫的效應(yīng)細(xì)胞之一，又是能分泌多種介質(zhì)的重要免疫細(xì)胞，腸道中的肥大細(xì)胞對腸道疾病有一定的防御作用,腸道黏膜上皮首先對入侵的細(xì)菌發(fā)生反應(yīng),從而激活鄰近的肥大細(xì)胞產(chǎn)生放大效應(yīng)[12],本研究結(jié)果顯示,藏羚羊小腸肥大細(xì)胞數(shù)量顯著多于藏綿羊，提示肥大細(xì)胞在藏羚羊小腸黏膜免疫中發(fā)揮著重要作用，而且藏羚羊小腸肥大細(xì)胞以回腸為最多，并且明顯多于藏綿羊回腸肥大細(xì)胞，可能藏羚羊回腸在小腸黏膜免疫中占據(jù)主導(dǎo)位置。小腸黏膜除含有大量的肥大細(xì)胞外還含有較多的神經(jīng)末梢和神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞，所以小腸黏膜被認(rèn)為是一個研究神經(jīng)內(nèi)分泌免疫調(diào)節(jié)的理想器官，研究還發(fā)現(xiàn)腸道黏膜及黏膜下層的部分肥大細(xì)胞與神經(jīng)有著密切關(guān)系，這為免疫系統(tǒng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)之間的相互作用提供了部分形態(tài)學(xué)依據(jù)[13]，至于藏羚羊小腸肥大細(xì)胞是否也與神經(jīng)有關(guān)系將有待于進(jìn)一步研究。

我們認(rèn)為，藏羚羊的小腸消化、吸收功能和黏膜免疫屏障功能比藏綿羊強，說明藏羚羊?qū)Ω咴h(huán)境的適應(yīng)能力強于藏綿羊。

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Comparisonofsmallintestinalmucosalstructureandmucosalimmunity-associatedcellsbetweenTibetanantelopesandTibetansheep

CHANG Lan1, ZHANG Peng-fei1, CHEN Fu-ju1, GE Ri-li2

(1CollegeofAgricultureandAnimalHusbandry,QinghaiUniversity,Xining810016,China;2ResearchCenterforHighAltitudeMedicalScience,MedicalSchool,QinghaiUniversity,Xining810001,China.E-mail:gerili@hotmail.com)

AIM: To compare the characteristics of small intestinal mucosal structure and mucosal immunity-associated cells between Tibetan antelopes and Tibetan sheep.METHODSThe morphological characteristics of small intestinal mucosal structure were observed under light microscope and electron microscope. The numbers of intraepithelial lymphocytes (IELs), goblet cells (GCs) and mast cells (MCs) in different parts of small intestine were also analyzed by the techniques of histological/histochemical methods and the Scion Image software between Tibetan antelopes (n=5) and Tibetan sheep (n=5).RESULTSThe length of small intestine villi and the ratio of villus length to crypt depth (V/C value) of the Tibetan antelopes were significantly higher than those of the Tibetan sheep (P<0.05). The length of the villi in duodenum, jejunum and ileum of the Tibetan antelopes was higher than that of the Tibetan sheep by 77.25% (P<0.05), 63.61% (P<0.05) and 35.38% (P<0.05), respectively, while V/C the ratio of villus length to crypt depth(V/Cvalue) of duodenum, jejunum and ileum in Tibetan antelopes was higher than that in the Tibetan sheep by 65.63% (P<0.05), 20.08% (P<0.05) and 35.68% (P<0.05), respectively. The thickness of intestinal mucosa in the Tibetan antelopes was significantly greater than that in the Tibetan sheep (P<0.05). No significant difference of intestinal muscle thickness between the Tibetan antelopes and the Tibetan sheep was observed (P>0.05). The numbers of GCs and MCs in different parts of small intestine in the Tibetan antelopes were obviously higher than those in the Tibetan sheep (P<0.05). The number of GCs in duodenum, jejunum and ileum in the Tibetan antelopes were higher than that in the Tibe-tan sheep by 12.84% (P<0.05), 49.88% (P<0.05) and 5.58% (P>0.05), respectively, while the number of MCs in duodenum, jejunum and ileum in the Tibetan antelopes was higher than that in the Tibetan sheep by 0.22% (P>0.05), 6.04% (P>0.05) and 160.80% (P<0.05), respectively. However, the number of IELs in different parts of small intestine in the Tibetan antelopes was significantly lower (P<0.05) than that in the Tibetan sheep. The number of IELs in duodenum, jejunum and ileum in the Tibetan antelopes was lower than that in the Tibetan sheep by 35.04% (P<0.05), 52.85% (P<0.05) and 52.82% (P<0.05)， respectively.CONCLUSIONThe functions of small intestinal digestion and absorption in Tibetan antelopes are stronger than those in Tibetan sheep. The small intestinal mucosal barrier function of Tibetan antelopes is greater than that of Tibetan sheep. The GCs and MCs in Tibetan antelopes play an important role in intestine mucosal immune defenses, while the IELs play the main role in intestine mucosal defensive barrier in Tibetan sheep.

Tibetan antelopes; Tibetan sheep; Small intestine; Mucosal structure; Mucosal immunity-associated cells

R363

A

10.3969/j.issn.1000-4718.2012.09.021