★ 曾曉會 杜鐵良 陳玉興 黃雪君 趙自明 (廣東省中醫(yī)研究所 廣州510095)

嬰幼兒濕疹是兒科常見的一種皮膚病，由一種或多種內(nèi)外因素引起的表皮及真皮淺層的炎癥性疾病，一般認(rèn)為屬于遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)［1］。中醫(yī)稱之為“奶癬”。該病好發(fā)于頭面部、臀部及四肢屈側(cè)，多見于兩頰及前額。臨床表現(xiàn)為自覺皮膚瘙癢，多形性損害，對稱性分布，漿液性滲出，易反復(fù)發(fā)作。除內(nèi)服藥物外，外治法也具有相當(dāng)重要的作用，尤其是急性濕疹，伴有瘙癢明顯，局部紅斑、丘疹、滲出等癥狀，使患兒痛苦不堪，嚴(yán)重者可影響嬰兒的生長發(fā)育。西醫(yī)的治療多使用糖皮質(zhì)激素類藥物、止癢劑和抗菌劑等，雖然效果顯著，但外用西藥的副作用與

其療效成正比，讓患兒家長很難接受。中藥的安全性和有效性已深入人心，本方在臨床上使用多年，有確切療效，現(xiàn)開展藥效學(xué)實驗研究，以進(jìn)一步證實其有效性，為將其開發(fā)為新藥提供更多實驗依據(jù)。

1 材料

1.1 供試品 小兒濕疹軟膏，由廣東省中醫(yī)研究所工藝研究室提供，4℃冰箱保存。

1.2 對照品 糠酸莫米松凝膠，江西三九藥業(yè)有限公司產(chǎn)品，批號:100201J。

1.3 試劑 2，4-二硝基氯苯(DNCB)，廣州合達(dá)生物科技有限公司產(chǎn)品，20071020。丙酮，天津市福晨化學(xué)試劑廠產(chǎn)品，批號20070824。

1.4 儀器 JJ3000動物電子秤，G＆G公司產(chǎn)品。10mm金屬打孔器，廣州正宏醫(yī)療器械設(shè)備有限公司定制。BS224S電子天平(1/萬)，德國SARTORIUS產(chǎn)品。

1.5 動物 NIH小鼠和Hartley豚鼠，雌雄各半，由廣東省醫(yī)學(xué)實驗動物中心提供，實驗設(shè)施合格證號和動物合格證號分別為SCXK(粵)2003-0002和粵監(jiān)證字2007A005。本實驗使用SPF級動物實驗室，設(shè)施使用許可證號為SYXK(粵)2005-0059。

2 方法

2.1 對小鼠接觸性濕疹模型的影響［2］取體重15 g左右的幼年小鼠72只，雌雄各半，隨機分為空白對照組、模型組、陽性組、小兒濕疹軟膏高、中、低劑量組，每組12只。實驗前1日，在小鼠背部去毛，面積約2 cm×2 cm。實驗第1 d各組(除正常對照組外)于去毛區(qū)涂以7%二硝基氯苯(DNCB)液100μl致敏1次，其中DNCB液用丙酮:花生油=4:1進(jìn)行配制。同時，各涂藥組按劑量在小鼠脫毛區(qū)涂抹給藥，正常對照組、模型對照組在脫毛區(qū)涂抹等量凝膠基質(zhì)(不含藥物)，每天1次，連續(xù)給藥11天。第6d后各組(除正常對照組外)涂1%DNCB丙酮液10 μl于小鼠右耳內(nèi)側(cè)激發(fā)，每隔2天激發(fā)1次。于第3次激發(fā)后24h處死小鼠，用耳廓打耳器取下直徑8 mm的左右耳片在分析天平上稱量，以兩耳重量差為腫脹度作為小鼠接觸性濕疹反應(yīng)值，抑制率=(模型組－藥物組)/模型組×100%。

2.2 對豚鼠變應(yīng)性接觸性濕疹的影響［3］將60只幼年豚鼠隨機分為空白對照組、模型組、陽性藥組、小兒濕疹軟膏高、中、低劑量組，每組10只，雌雄各半。每只豚鼠頸背部剪毛2 cm ×2 cm大小，5%DNCB溶液25 μl外涂致敏。第2天開始于豚鼠背部涂抹相應(yīng)藥物，正常對照組、模型對照組在脫毛區(qū)涂抹等量凝膠基質(zhì)(不含藥物)，一天一次。連續(xù)給藥2周后在豚鼠的右耳外側(cè)涂0.1%DNCB溶液100 μl作為激發(fā)，每周1次，連續(xù)3周。激發(fā)期間照常給藥，模型組豚鼠右耳皮膚明顯增厚，與人類慢性濕疹的臨床表現(xiàn)相近似。

檢測指標(biāo):①豚鼠耳腫脹度:于實驗結(jié)束后以直徑10 mm金屬打孔器在豚鼠右、左耳中部同一位置取下組織塊，用電子秤稱量右、左耳片重量，計算右、左耳片重量差值，以此耳腫脹度作為豚鼠變應(yīng)性接觸性皮炎指標(biāo)。②濕疹面積:采用直尺測量豚鼠背部皮膚的濕疹面積，多處的將其相加即得總面積。

3 結(jié)果

3.1 對小鼠接觸性濕疹模型的影響 表1結(jié)果表明，與正常對照組比較，模型對照組小鼠接觸性濕疹反應(yīng)值明顯增大，耳廓腫脹明顯(P＜0.01);與模型組相比較，陽性藥組有很好的改善耳廓腫脹度的作用(P＜0.01)，其抑制率達(dá)到53.9%;小兒濕疹軟膏的高中低三個劑量組也有顯著減小反應(yīng)值的作用(P＜0.01)，且呈劑量依賴性。其中高劑量的抑制率明顯超過陽性對照組。

表1 小兒濕疹軟膏對小鼠接觸性濕疹模型的影響(±s，n=12)

表1 小兒濕疹軟膏對小鼠接觸性濕疹模型的影響(±s，n=12)

注:①與正常對照組相比，*P＜0.05，＊＊P＜0.01;與模型組比較，#P ＜0.05，##P ＜0.01。

組別 劑量 耳廓腫脹度(mg) 抑制率(%0.0004 ±0.0016 －模型對照組 等重量 0.0254±0.0017＊＊ －糠酸莫米松凝膠組 8.7g膏·kg－1 0.0117 ±0.0112## 53.9濕疹軟膏高劑量組 7.2g生藥·kg－1 0.0088 ±0.0025## 65.4中劑量組 3.6g生藥·kg－1 0.0116 ±0.0026## 54.3低劑量組 1.3g生藥·kg－1 0.0137 ±0.0049##)46.1正常對照組 等重量

3.2 對豚鼠變應(yīng)性接觸性皮炎的影響 從表2的結(jié)果分析，模型組與空白組相比，其耳廓腫脹度和濕疹面積明顯增大(P＜0.01)，肉眼觀察到豚鼠的背部皮膚出現(xiàn)明顯的紅斑、水腫，抓痕明顯;與模型組相比，陽性組有一定減輕耳廓腫脹和濕疹面積的作用(P＜0.05);小兒濕疹軟膏高中低三個劑量有明顯減輕豚鼠濕疹面積的作用(P＜0.05－0.01)，但對耳廓腫脹無明顯減輕(P＞0.05)，給藥組動物的紅斑、水腫等皮損情況明顯改善，痊愈率達(dá)到65%以上。

表2 小兒濕疹軟膏對豚鼠變應(yīng)性接觸性皮炎的影響(n=10)

4 結(jié)論

傳統(tǒng)的中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，濕疹多因稟賦不足，或過食辛辣魚腥動風(fēng)之品，或脾失健運，濕與熱相搏困脾，復(fù)感風(fēng)濕熱之邪，內(nèi)外兩邪相搏于腠理而發(fā)病。治法宜清熱燥濕，祛風(fēng)止癢，效果顯著［4］。小兒濕疹軟膏由黃連、苦參、丹皮等成分組成，黃連有清熱燥濕，瀉火解毒的作用;苦參有燥濕止癢的功效;丹皮可清熱涼血。現(xiàn)代藥理研究表明，這些藥物具有抗炎、抗過敏、抗菌、降低毛蝦血管通透性、減少滲出、促進(jìn)創(chuàng)面愈合、調(diào)節(jié)免疫等作用。

本實驗因豚鼠對過敏性反應(yīng)敏感，且與人相似，加之使用對象為嬰幼兒，皮膚嬌嫩，故選用了年幼的豚鼠，此外也選用了小鼠，希望能通過多種模型考察藥物的有效性。經(jīng)小兒濕疹軟膏治療后，模型組動物的紅斑、水腫、抓痕等皮損形態(tài)明顯減輕，小鼠的腫脹度也有顯著改善，因此，認(rèn)為小兒濕疹軟膏對實驗性濕疹模型有明顯的改善作用，值得進(jìn)一步深入研究。此外，我們?nèi)庋塾^察到陽性藥物治療后的豚鼠局部皮膚很難再長出毛，動物其他部分亦出現(xiàn)脫毛現(xiàn)象，而小兒濕疹軟膏各劑量組并未出現(xiàn)這樣的現(xiàn)象，是否與西藥的副作用有關(guān)，尚待考察。

［1］胡亞美，江載芳.諸福棠實用兒科學(xué)［M］，第7版.北京:人民衛(wèi)生出版社，2002，643 －645.

［2］李永慧，朱曉芳，胡榮，等.中藥抗?jié)裾钪苿π∈笞儜?yīng)性接觸性皮炎的影響及其機制.中國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)雜志［J］，2011，10(3):152 －155.

［3］張芳，朱艷菊，劉文君，等.祛濕止癢顆粒藥效學(xué)實驗研究及機制探討［J］.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2009，11(11):211 －214.

［4］張金梅.中西醫(yī)結(jié)合治療嬰兒濕疹的體會［J］.現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2011，20(20):2552 －2553.