余 蓉，邱少紅，李傳恒，管紅霞，潘 虹 (石首市人民醫(yī)院檢驗科，湖北 石首 434400)

血液分析儀計數(shù)低值血小板的誤差分析

余 蓉，邱少紅，李傳恒，管紅霞，潘 虹 (石首市人民醫(yī)院檢驗科，湖北 石首 434400)

目的：探討血液分析儀對低值血小板的計數(shù)誤差。方法：2011年11月至2012年2月間用CD-1800血液分析儀檢測的1670例新鮮血液常規(guī)標本中，檢測出血小板數(shù)<100×109/L的血標本91例，以及同期用Sysmex XE-2100D型血液分析儀測定的5980例新鮮血液常規(guī)標本中，檢測出血小板數(shù)<100×109/L的血標本397例，分別與手工血小板計數(shù)法比較檢測的一致性；用同時在兩機上進行復查檢測的69例血小板數(shù)<100×109/L血標本,采用Kappa統(tǒng)計學方法分析血液分析儀對低值血小板檢測的準確性。結果：全自動血液分析儀在血小板計數(shù)(0～99)×109/L時，總符合率>90%,Kappa值均>0.80。但在BPC(51～99)×109/L時XE-2100D與手工法計數(shù)血小板的符合率僅達84.6% ；CD-1800型血液分析儀在血小板計數(shù)<15×109/L時，與實際值符合率僅50%，Kappa值95%的可行限下限均<0.8。結論：全自動血液分析儀對低值血小板計數(shù)的準確性較好，但隨著血小板數(shù)值的降低，其準確性有所下降。當血小板計數(shù)<15×109/L時，血液分析儀對血小板的計數(shù)有一定誤差，應重視血涂片復審。有條件時建議用流式細胞術(FCM)復核。

低值血小板； 血液分析儀； 手工血小板計數(shù)法

準確計數(shù)低值血小板已成為檢驗醫(yī)學領域一個亟待解決的問題。國際血液標準委員會(ICSH)推薦的血小板計數(shù)國際參考方法[1-2](流式細胞計數(shù)法)未在基層醫(yī)院普及，所以對低值血小板的復核多為手工計數(shù)法復核。目前國際上尚未可供溯源性計量的血小板標準品，對低值血小板的復核標準也各不相同。血小板減少有真性與假性減少之分，近年來對EDTA依賴性假性血小板減少屢見報道。本研究旨在探討本科室的復核標準，以期杜絕假性血小板減少對臨床的誤導，減少病人的痛苦。

1 材料與方法

1.1新鮮全血標本

收集我院2011年11月20日至2012年2月1日病房和門診血常規(guī)檢測中血小板數(shù)<100×109/L的血標本，其中CD-1800檢測出91例，XE-2100D檢測出397例。對血小板計數(shù)偏低的標本除用兩儀器進行相互比對外，均采取手工計數(shù)法復核。復核前，須涂片瑞氏染色鏡檢，觀察全片血小板分布情況，若有血小板聚集現(xiàn)象者，換用肝素抗凝管重新采集靜脈血標本，用儀器和手工計數(shù)法[3]復核?；颊吣挲g0～90歲，中位年齡46歲。男性 31例，女性 38例。采血后5h內(nèi)完成檢測。

1.2儀器和試劑

美國雅培CD-1800型血液分析儀，日本Sysmex XE-2100D型血液分析儀。儀器使用質(zhì)控品為天津美德太平洋全血質(zhì)控物，試劑為山東蘭橋稀釋液，溶血劑、鞘液為日本原裝進口。使用前各儀器分別用原裝校準品校準，并需先檢測質(zhì)控品，在控后，再檢測新鮮全血標本。

1.3方法

新鮮全血標本經(jīng)充分顛倒混勻后再經(jīng)校準的CD-1800和XE-2100D型血液分析儀上分別計數(shù)血小板，并觀察有無血小板報警信號出現(xiàn)及出現(xiàn)的類型。

1.4根據(jù)手工法計數(shù)的BPC計數(shù)結果進行分組

第1組：血小板計數(shù)(51～99)×109/L；第2組：血小板計數(shù)(16～50)×109/L；第3組：血小板計數(shù)(0～15)×109/L。

1.5統(tǒng)計學分析

應用Kappa統(tǒng)計學方法[4]進行數(shù)據(jù)分析。

2 結 果

各組用血液分析儀與手工計數(shù)血小板結果符合率和Kappa檢驗結果見表1、表2、表3。

表1 CD-1800與手工計數(shù)血小板結果比較

注：Kappa=0.894 , s=0.184 ,95%可信限下限=0.584。

表2 XE-2100D與手工計數(shù)血小板結果比較 (單位：×109/L)

注：Kappa=0.969, s=0.267 ,95%可信限下限=0.446。

表3 CD-1800與XE-2100D血小板結果比較(單位：×109/L)

注：Kappa=0.901 , s=0.218 ,95%可信限下限=0.473。

表1～3顯示，無論CD-1800或XE-2100D，在BPC<100×109/L時，全自動血液分析儀與手工法計數(shù)血小板結果總符合率>90%,Kappa值均>0.80。但在BPC<15×109/L時，CD-1800與手工法計數(shù)血小板的符合率僅達50%，95%Kappa可信限下限均<0.8；在BPC<(51～99)×109/L時XE-2100D與手工法計數(shù)血小板的符合率僅達84.6%。原因可能是CD-1800本身對低值血小板的計數(shù)準確性偏低，所以科室員工對此儀器檢測出的低值血小板的復核警覺性偏高；而XE-2100D符合率偏低，可能原因是對EDTA導致的假性血小板所致的血小板減少的篩查率偏低，偶然誤差使其準確率偏低有關。

3 討 論

由以上研究可以初步制定我科低值血小板的復核標準：凡發(fā)現(xiàn)全自動血液分析儀檢測BPC<100×109/L時，均須涂片瑞氏染色鏡檢，觀察全片血小板分布情況，若有血小板聚集現(xiàn)象者，均換用肝素抗凝管重新采集靜脈血標本，用儀器和手工計數(shù)法復核。以排除因EDTA導致的血小板假性減少的誤報率，正確指導臨床診斷，避免誤診誤治釀成醫(yī)療糾紛。低值血小板是正確指導臨床，判斷患者是否需要輸注血小板的一個重要指標，所以準確的計數(shù)血小板已成為一個迫切需要解決的問題。因手工復核尚存在很多技術上的問題[5-6]，2001年ICSH推薦了間接法血小板計數(shù)的新的國際參考方法(FCM)，以彌補手工法復核的不足。我們的研究與國內(nèi)許蕾等的文獻報道[7]在BPC<50×109/L時，血液分析儀與FCM法的總符合率>90%,Kappa值>0.8基本相符。本研究在BPC<15×109/L時，血液分析儀與手工法計數(shù)血小板的一致性有些不足，如要求更為準確的結果而條件又具備時，則此類標本可用FCM復核。

[1]ICSH.Cytometry panel platelet counting by RBC /platelet ratio method[J].AJCP,2001，115(3):460-464.

[2]Harrison P,Ault K A,Chapman S ,et al .AN interlaboratory study of a candidate reference method for platelet counting[J].AJCP，2001，115(3):448-449.

[3]葉應嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].3版.南京：東南大學出版社，2006：136-137.

[4]顏虹，徐勇勇.醫(yī)學統(tǒng)計學[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2005：214.

[5]朱忠勇.準確計數(shù)血小板方法學研究進展[J].國外醫(yī)學:臨床生化和檢驗分冊，2002，23(30)：131-132.

[6]從玉隆，樂家新.現(xiàn)代血細胞分析技術與臨床[M].北京：人民軍醫(yī)出版社，2005：10-15.

[7]許蕾，宋穎，沈薇，等.血液分析儀計數(shù)低值血小板的誤差[J].臨床檢驗雜志，2010，28(2)：151-152.

10.3969/j.issn.1673-1409(R).2012.08.024

R446.11

A

1673-1409(2012)08-R049-03

2012-05-23

余蓉(1969-)，女，湖北石首人，副主任檢驗技師，碩士，主要從事臨床免疫學及質(zhì)量控制工作。

[編輯] 何 勇