龔大春 (長(zhǎng)江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，湖北 荊州 434025)

齊海濤 (湖北省荊州市畜牧獸醫(yī)局，湖北 荊州 434000)

犬沙門氏菌的分離鑒定及藥敏試驗(yàn)

龔大春 (長(zhǎng)江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，湖北 荊州 434025)

齊海濤 (湖北省荊州市畜牧獸醫(yī)局，湖北 荊州 434000)

為探討犬沙門氏菌病的流行現(xiàn)狀，篩選治療犬沙門氏菌病的敏感藥物，從寵物醫(yī)院采集疑似犬沙門氏菌病的病料36份，進(jìn)行了沙門氏菌的分離與鑒定，并用K-B法對(duì)所鑒定的沙門氏菌進(jìn)行了體外藥敏試驗(yàn)。結(jié)果表明，36份病料中犬沙門氏菌的感染率達(dá)到27.8%；該菌對(duì)丁胺卡那霉素、氯霉素、氟派酸和慶大霉素敏感。由此提示，在寵物臨床治療以腹瀉為主要癥狀的病例時(shí)，注意沙門氏菌病的感染或繼發(fā)感染；在臨床治療犬沙門氏菌病時(shí)用一般的抗革蘭氏陰性菌的抗生素即可達(dá)到治療效果，不必盲目追求新藥，但不宜用磺胺類藥物治療犬沙門氏菌病。

犬；沙門氏菌；藥敏試驗(yàn)

犬沙門氏菌病是犬的一種重要傳染病之一，在寵物臨床上時(shí)有發(fā)生，有時(shí)甚至繼發(fā)于犬瘟熱、犬細(xì)小病毒病，增加了寵物疾病的診療難度，而且犬沙門氏菌病還是一種重要的人獸共患傳染病，對(duì)人類健康也存在著較大的威脅。為此，本研究對(duì)臨床上疑似犬沙門氏菌病的病例進(jìn)行了病原菌的分離鑒定和藥敏試驗(yàn)，以篩選治療犬沙門氏菌最敏感的藥物，為臨床治療提供指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 病料

病料36份，分別編號(hào)為1～36，采自于荊農(nóng)寵物醫(yī)院和長(zhǎng)江大學(xué)動(dòng)物醫(yī)院，患犬嚴(yán)重水樣腹瀉；用滅菌棉簽在患犬直腸內(nèi)擦拭采取，然后放在盛有少許生理鹽水的滅菌小瓶中攪拌混勻，4℃保存待用。

1.1.2 藥敏紙片

青霉素藥敏紙片(10μg/片)、先鋒霉素藥敏紙片(30μg/片)、丁胺卡那霉素藥敏紙片(30μg/片)、氟派酸藥敏紙片(10μg/片)、慶大霉素藥敏紙片 (10μg/片)、磺胺嘧啶藥敏紙片(300μg/片)、氯霉素藥敏紙片 (30μg/片)均為杭州微生物試劑有限公司產(chǎn)品。

1.2 方法

1.2.1 培養(yǎng)基的制備

麥康凱、S.S、營(yíng)養(yǎng)瓊脂、肉湯、糖發(fā)酵試驗(yàn)、吲哚試驗(yàn)、甲基紅試驗(yàn)、VP試驗(yàn)、枸椽酸鹽試驗(yàn)、尿酶試驗(yàn)、三糖鐵試驗(yàn)、M.R試驗(yàn)等培養(yǎng)基的制備按常規(guī)方法[1]和產(chǎn)品使用說(shuō)明進(jìn)行。

1.2.2 沙門氏菌的分離和生化鑒定

按文獻(xiàn)[2]的方法進(jìn)行。主要進(jìn)行葡萄糖發(fā)酵試驗(yàn)、乳糖發(fā)酵試驗(yàn)、吲哚試驗(yàn)、甲基紅試驗(yàn)、V.P試驗(yàn)、M.R試驗(yàn)、枸櫞酸鈉試驗(yàn)、尿素試驗(yàn)、三糖鐵試驗(yàn)等。

1.2.3 藥敏試驗(yàn)方法

取分離鑒定的沙門氏菌菌株接種于普通營(yíng)養(yǎng)肉湯管，置于37℃培養(yǎng)24h，與氯化鋇標(biāo)準(zhǔn)比濁管4號(hào)進(jìn)行比較矯正，所得細(xì)菌濃度為12×108/ml，再用滅菌吸管取0.1ml菌液滴于平板上，用“L”型玻棒涂抹均勻，蓋上平板于室溫放置數(shù)分鐘，分別用無(wú)菌眼科鑷夾取藥敏紙片平貼于瓊脂表面，翻轉(zhuǎn)置于37℃培養(yǎng)24h后取出，用游標(biāo)卡尺測(cè)量抑菌圈的直徑。

表1 藥物敏感性判定標(biāo)準(zhǔn)

1.2.4 藥敏試驗(yàn)判定標(biāo)準(zhǔn)

[3]，按表1的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行藥物敏感性的判定。

2 結(jié)果與分析

2.1 細(xì)菌的分離與鑒定

36份病料經(jīng)分離培養(yǎng)、革蘭氏染色鏡檢、生化鑒定，最后確定2、3、5、6、7、9、10、17、19、26號(hào)為沙門氏菌。

2.2 藥敏試驗(yàn)

從表2結(jié)果可以看出，犬沙門氏菌對(duì)丁胺卡那霉素、氯霉素、氟派酸和慶大霉素敏感，而對(duì)于磺胺類藥物不敏感。

表2 藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果

3 小結(jié)與討論

(1) 病菌的分離與鑒定結(jié)果表明，在寵物臨床犬以腹瀉為主要癥狀的病例中，原發(fā)或繼發(fā)沙門氏菌感染的比率還是比較高的，可以達(dá)到27.8%。因此在臨床診治時(shí)要注意犬沙門氏菌病的預(yù)防和治療，不要顧此失彼。

(2) 藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明，在臨床治療犬沙門氏菌病時(shí)用一般的抗革蘭氏陰性菌的抗生素如氯霉素、氟派酸、慶大霉素、丁胺卡那霉素等都可以達(dá)到治療目的，不必盲目追求新藥。但犬沙門氏菌對(duì)磺胺類藥物則不敏感，建議不必采用磺胺類藥物治療犬沙門氏菌病。

(3) 犬沙門氏菌病是一種重要的人獸共患傳染病，一旦發(fā)病，應(yīng)注意隔離治療，確保人、犬的健康安全。首先，畜主應(yīng)搞好個(gè)人防護(hù)，注意衛(wèi)生，勤洗手并消毒；其次，限制病犬的活動(dòng)范圍，注意適時(shí)消毒；再次，病犬的糞便要用消毒液無(wú)害化處理，不要到處亂扔；再次，不要讓犬食生肉，特別是有問(wèn)題的肉，最好煮熟后飼喂；最后，犬發(fā)生腹瀉后要及時(shí)到寵物醫(yī)院全面檢查，徹底治療。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 姚火春.獸醫(yī)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2002：2.

[2] 陸承平.獸醫(yī)微生物學(xué)[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2002：9.

[3] 賈俊元，毋艷萍，何虎成．豬源性大腸埃希氏菌對(duì)抗菌藥物的敏感性測(cè)定[J]．中國(guó)獸醫(yī)科技，1999，29(12)：32-33.

10.3969/j.issn.1673-1409(S).2012.08.008

S852.1

A

1673-1409(2012)08-S023-02

2012-07-10

龔大春 (1963-)，男，湖北鐘祥人，碩士，教授，主要從事動(dòng)物醫(yī)學(xué)研究。