王新曉 盧建峰 河南省葉縣中醫(yī)院（河南葉縣467200）

小兒清熱口服液是本院主任中醫(yī)師宋耀民近65年行醫(yī)之驗(yàn)方，為醫(yī)院制劑室生產(chǎn)的院內(nèi)制劑，由金銀花、青蒿、薄荷、連翹、冰片5味藥材組成。臨床上對(duì)小兒高熱效果明顯，為了控制其質(zhì)量，本文采用了高效液相色譜法對(duì)綠原酸進(jìn)行含量測(cè)定，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥 采用美國(guó)Waters510高效液相譜泵；Waters490E檢測(cè)儀；Waters745數(shù)據(jù)處理機(jī)。綠原酸對(duì)照品由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，批號(hào)110753－200608。各種藥材均經(jīng)漯河市藥檢所中藥鑒定專家呂斌教授鑒定。所用試劑均為分析純。

2 綠原酸的含量測(cè)定 2.1色譜條件 YWGC18柱（4.0mm×150mm，10μm）；流動(dòng)相甲醇－水－四氫呋喃－冰醋酸（2.5：97：5：1.5）；流速1.5mm·min－1；檢測(cè)波長(zhǎng)327nm；靈敏度0.05AUFS；紙速0.1mm·min－1。

2.2 綠原酸對(duì)照品溶液的配制 精密稱取綠原酸對(duì)照品10.1mg，置10mL容量瓶中，加入50%甲醇稀釋至刻度，搖勻即得Ⅰ號(hào)液。精密量取Ⅰ號(hào)液1mL置10mL容量瓶中，加入50%甲醇稀釋至刻度，搖勻即得Ⅱ號(hào)液。

2.3 供試樣品液的配制 精密量取樣品試液1mL，置50mL容量瓶中，加入50%甲醇稀釋至刻度，搖勻即得。

2.4 陰性液的配制 取除金銀花外的其余藥材，按制劑工藝制成陰性樣品，并按樣品供試液方法制成陰性藥液，再精密量取陰性藥液1mL，置50mL容量瓶中，加入50%甲醇稀釋至刻度，搖勻即得。

2.5 藥材液的配制 精密稱取藥材0.15g，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇50mL，稱定重量，超聲處理30min，放冷，再稱定重量，用50%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻即得。

2.6 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精密量取綠原酸對(duì)照品Ⅱ號(hào)溶液2、4、5、6、8μl進(jìn)樣測(cè)定，以綠原酸進(jìn)樣量（μg）為橫坐標(biāo)，峰面積積分值為縱坐標(biāo)繪圖。其回歸方程為：Y＝781483.90，X－15316.87，r＝0.9999，綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品在0.201～0.807μg與峰面積有良好的線性關(guān)系。

2.7 精密度試驗(yàn) 按照測(cè)定方法重復(fù)進(jìn)樣5次，綠原酸峰面積積分值相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD＝1.33%。

2.8 重現(xiàn)性試驗(yàn) 按照測(cè)定方法重復(fù)測(cè)定5份樣品，綠原酸含量的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD＝0.4%

表1 小兒清熱口服液中綠原酸的回收率測(cè)定結(jié)果

2.9 加樣回收率試驗(yàn) 精密量取5份樣品（批號(hào)：110618）各0.5mL，置50mL容量瓶中，精密吸取各樣品液，分別精密加入綠原酸對(duì)照品Ⅱ號(hào)溶液0.90、1.09、1.00、1.04、1.00mL，用50%甲醇定容至刻度，搖勻即得。按上述色譜條件測(cè)定，以下式計(jì)算回收率，結(jié)果如表1結(jié)果表明，本方法具有良好的回收率。

2.10 樣品測(cè)定 精密量取樣品液10μL進(jìn)樣，依照上述色譜條件進(jìn)行含量測(cè)定，結(jié)果見表2。

表2 綠原酸含量測(cè)定結(jié)果

3 結(jié) 論 3.1 綠原酸的HPLC的含量測(cè)定中曾用甲醇－水－乙腈－冰醋酸（3∶97∶12∶3）為流動(dòng)相

但在測(cè)定過程中發(fā)現(xiàn)樣品分離不好，綠原酸峰拖尾現(xiàn)象比較嚴(yán)重，故調(diào)整流動(dòng)相中各組分比例，把乙腈改為四氫呋喃，分離效果良好。

3.2 試驗(yàn)中綠原酸的含量測(cè)定方法結(jié)果較好，與其它成分均可基線分離。

［1］國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典一部［M］.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：205－206.

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［3］康庭國(guó).中成藥薄層色譜鑒別［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，1995：142.

［4］孫 瑩，呂 潔.藥物分析［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2010：81－85.