劉俊英，張虎成，危晴，王芳

（1.北京電子科技職業(yè)學院生物工程學院，北京 100029；2.中國農(nóng)業(yè)科學院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標準與檢測技術(shù)研究所，北京 100081）

歐李是我國特有的一種薔薇科櫻桃屬灌木樹種，耐旱、耐寒、耐鹽堿，適應(yīng)性強。歐李根冠比大，植株矮小，可以有效防止水土流失，在生態(tài)治理中發(fā)揮重要作用[1]；歐李果風味獨特，香氣宜人。歐李果實中維生素、礦物質(zhì)、蛋白質(zhì)、氨基酸等含量高，營養(yǎng)豐富，礦物質(zhì)元素Ca含量在果肉中高達428.1 mg/kg，是其它水果Ca含量的2倍～10倍，鈣含量是所有經(jīng)濟型水果中最高的，被譽為“鈣果”[2-4]。脂肪酸在水果的芳香物質(zhì)合成中起主要作用，脂肪酸是萜類、醛、醇和酯芳香物質(zhì)的前體[5]；不飽和脂肪酸是人體必需脂肪酸[6-7]。鮮見歐李果脂肪酸的研究報道，本文采用超聲波萃取法對歐李果進行分離提取，通過GC-MS對其化學成分進行鑒定，研究歐李果脂肪酸的組成，為促進歐李的營養(yǎng)價值的開發(fā)和歐李的種植和推廣奠定基礎(chǔ)。

1 實驗儀器與方法

1.1 實驗儀器與材料

Agnent 5975型氣相色譜一質(zhì)譜儀：美國安捷倫公司；超聲波萃取裝置：AUTO SCIENCE INSTUMENT CO.,LTD.；AR2140分析天平：美國奧索斯；RE-210D旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：上?？婆d儀器有限公司；HH-2恒溫水溶鍋：常州國華電器有限公司；TG18K-Ⅱ臺式高進離心機：濟南福的機械有限公司。分析純：石油醚、硫酸、甲醇、正己烷、無水硫酸鈉。成熟“京歐Ⅱ號”歐李果，產(chǎn)至河北尚義縣。

1.2 方法

1.2.1 超聲波萃取

稱取5.0000 g經(jīng)-70℃冷凍干燥、粉碎至粒徑0.3 mm～0.5 mm的歐李果粉，投入超聲波提取器中，加入50 mL石油醚，超聲波提取40 min，離心分離，得橙黃色透明提取液，再旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去石油醚，重復3次，取平均值。

1.2.2 甲酯化[8]

在歐李果提取物中加入2.5 mol/L硫酸-甲醇溶液1.0 mL，于70℃水浴中加熱30 min，加入2 mL正己烷提取甲酯化產(chǎn)物，取出上清液，再用1 mL正己烷二次提取，與上清液合并，加少量無水硫酸鈉，離心，取1.5mL上清液于樣品瓶中。

1.2.3 GC-MS條件

色譜條件：色譜柱為DB-FFAP柱（60 m×0.25 mm×0.25μm）；升溫程序：起始溫度 100 ℃保持 2 min，以5℃/min速率升到230℃，保持20 min；進樣口溫度為260℃；載氣為氦氣（純度≥99.999%），流速 1.0mL/min，溶劑延遲 5.00 min；分流比為 5∶1，進樣量 0.2μL。

質(zhì)譜條件：電子方式為轟擊離子源（EI），電離能量為70 eV；燈絲發(fā)射電流為200μA，離子源溫度為210℃，GC-MS接口溫度為240℃。

1.2.4 數(shù)據(jù)處理

定性：實驗譜圖數(shù)據(jù)處理由Xcalibur軟件系統(tǒng)完成，未知化合物經(jīng)數(shù)據(jù)處理和NIST譜庫檢索，結(jié)合人工譜圖索引，同時與NIST和Wiley譜庫相匹配，得出相應(yīng)的化學成分。

定量：通過峰面積歸一化法計算各化學成分的相對百分含量。

2 結(jié)果與討論

2.1 歐李果超聲波萃取物化學成分組成

將1.2.2制備樣品經(jīng)氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)儀（GC-MS）分析，歐李果萃取物總離子流圖見圖1，將歐李果質(zhì)譜檢測的物質(zhì)去除甲酯，其化學成分及求得的各化學組成及其相對百分含量見表1。

圖1 歐李果超聲波提取物總離子流圖Fig.1 The gas chromatogram of the lipids of ultrasonic extraction from Chinese Dwarf Cherry fruit

表1 歐李果超聲波提取物的化學組成及相對含量Table 1 Chemical composition and relative content in the lipids of Chinese Dwarf Cherry fruit

續(xù)表1 歐李果超聲波提取物的化學組成及相對含量Continue table 1 Chemical composition and relative content in the lipids of Chinese Dwarf Cherry fruit

歐李果超聲波提取物得率為1.06%。由表1中鑒定出歐李果提取物的化學成分及其相對百分含量可知，歐李果石油醚提取物中共檢測并能確定化合物名稱的物質(zhì)有37種（去除烷烴），占檢出總量的93.14%，檢測到31種脂肪酸、5種醇和酚、1種酯。脂肪酸占檢出總量的88.50%。飽和脂肪酸20種，占檢出總量37.90%，主要為棕櫚酸（9.46%）、木焦油酸（8.02%），硬脂酸（5.97%）；不飽和脂肪酸11種，占檢出總量51.74%，其中1種二元不飽和脂肪酸富馬酸（0.02%）；8種單不飽和脂肪酸，主要為油酸（20.32%），羥基不飽和脂肪酸蓖麻油酸（4.64%），首次在歐李果中檢測到順15-二十四烯酸即神經(jīng)酸1.83%；2種多不飽和脂肪酸為亞油酸（15.65%）和亞麻酸（5.22%）；1種反式脂肪酸，反-13-十八碳烯酸（0.37%）。

2.2 歐李果脂肪酸營養(yǎng)價值分析

歐李果不飽和脂肪酸含量高，占檢出總量51.74%，膳食中不飽和脂肪酸能降低膽固醇，調(diào)節(jié)血脂，對脂肪的生化合成和氧化、癌誘變和膽固醇具有獨特的調(diào)控作用[9]，不飽和脂肪酸可以提高細胞活性，增強智力、記憶力和思維能力[6-7]，不飽和脂肪酸對人類成長和健康發(fā)揮著重要作用。

2.2.1 歐李果主要不飽和脂肪酸營養(yǎng)分析

歐李果中油酸（20.32%）、亞油酸（15.65%）、亞麻酸（5.22%）3種主要不飽和脂肪酸含量高，占檢出總量的41.19%。亞油酸在人體衍生為花生四烯酸后合成前列腺素，具有抗炎、擴張血管防止血栓形成、防止動脈硬化和軟化血管的作用，能抑制淋巴肉瘤，具有抗癌作用[10-11]。亞麻酸是一種含三個雙鍵的不飽和脂肪酸，正常人從食物中攝入亞麻酸后，經(jīng)Δ-6脫氫酶碳鏈延長酶作用，在體內(nèi)可轉(zhuǎn)化為EPA和DHA,EPA是體內(nèi)三烯前列腺素前體，DHA使大腦、視網(wǎng)膜等神經(jīng)系統(tǒng)磷脂的主要成分[12]。亞麻酸具有改善血管疾病，降壓、降血脂、降膽固醇的作用；亞麻酸能提高神經(jīng)功能，預防過敏性疾病的作用[13-14]；歐李果中油酸百分含量高達20.32%，研究發(fā)現(xiàn)，順式單不飽和脂肪酸在降低膽固醇方面能力與多不飽和脂肪酸相同[15]。

不飽和脂肪酸可以改善果實的風味成分。成熟果實中亞麻酸和亞油酸含量高，果實呼吸高峰過后香氣大量產(chǎn)生，亞麻酸和亞油酸含量也隨之下降，果實中的脂肪酸經(jīng)氧化產(chǎn)生的酮酸和?；?CoA可被進一步還原成醛、醇和合成酯類[16]，增加果實香氣成分，歐李果不飽和脂肪酸含量高，果實香氣濃郁。

2.2.2 歐李果神經(jīng)酸營養(yǎng)分析

首次在歐李果中檢測到順15-二十四烯酸即神經(jīng)酸，占檢出總量的1.83%。神經(jīng)酸是大腦神經(jīng)纖維和神經(jīng)細胞的核心天然成分，是神經(jīng)細胞特別是大腦細胞、視神經(jīng)細胞、周圍神經(jīng)細胞生長、再發(fā)育和維持的必需“高級營養(yǎng)素”，對提高腦神經(jīng)的活躍程度，防止腦神經(jīng)衰老有很大作用，神經(jīng)酸對帕金森、老年癡呆有顯著治療作用[17]?？茖W研究證明，神經(jīng)酸抑制HIV-l逆轉(zhuǎn)錄酶的活性，對艾滋病逆轉(zhuǎn)錄酶有很強的抑制作用，可以增強人體免疫功能和防治艾滋病[18]。神經(jīng)酸主要來源于鯊魚腦及鯊魚油，目前僅在蒜頭果、盾葉木和槭屬植物中發(fā)現(xiàn)神經(jīng)酸，蒜頭果是含神經(jīng)酸植物之冠，但適生區(qū)范圍較小[17]。本研究在歐李果中檢測到神經(jīng)酸，為歐李果營養(yǎng)價值開發(fā)、品種的選育和種植奠定基礎(chǔ)。

2.2.3 歐李果其他脂肪酸的作用分析

歐李果中蓖麻油酸占檢出總量的4.64%。蓖麻油酸可以作為增塑劑，歐李果中蓖麻油酸含量高，可以使水果表皮致密、彈性較好，使歐李果更加耐貯藏。

歐李果中檢測到反式-13-十八碳烯酸，占檢出總量0.37%。含反式脂肪酸約8%的飲食與亞油酸相比顯著地降低了成人高密度脂蛋白含量膽固醇，從而顯著增加心血管疾病風險[19]。反式脂肪酸引起了全球科學界的高度重視。雖然歐李果中反式脂肪酸含量低，在品種的選育和種植應(yīng)盡量考慮反式脂肪酸對人類健康的影響。

3 結(jié)論

歐李果石油醚超聲波提取物得率為1.06%。歐李果中檢測到37種化合物，其中31種脂肪酸、5種醇和酚、1種酯。飽和脂肪酸20種，占檢出總量37.90%，主要為棕櫚酸（9.46%）、木焦油酸（8.02%），硬脂酸（5.97%）；不飽和脂肪酸11種，占檢出總量51.74%，主要不飽和脂肪酸為油酸（20.32%）、亞油酸（15.65%）和亞麻酸（5.22%）、蓖麻油酸（4.64%）和神經(jīng)酸（1.83%）；1種反式脂肪酸，反-13-十八碳烯酸（0.37%）

歐李果不飽和脂肪酸含量高，油酸、亞油酸和亞麻酸3種主要不飽和脂肪酸占檢出總量41.19%，歐李果具有降壓、降膽固醇、抗炎癥和抗癌作用；成熟果實中醛、醇和酯含量高，歐李果果實香氣濃郁。

首次在歐李果中檢測神經(jīng)酸（1.83%），歐李果中含有神經(jīng)酸，具有防止腦神經(jīng)衰老，預防帕金森、老年癡呆的作用，可以增強人體免疫功能和防治艾滋病。歐李果中蓖麻油酸含量高，果表皮致密、彈性較好，耐貯藏。在歐李果中檢測到反式-13-十八碳烯酸，雖然含量低，在品種的選育和種植應(yīng)考慮反式脂肪酸對人類健康的影響。

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