黃志堅 福建省三明市動物疫病預防控制中心 365000

禽隱孢子蟲病是由隱孢子蟲科隱孢子蟲屬的貝氏隱孢子蟲、火雞隱孢子蟲寄生于家禽的呼吸系統(tǒng)、消化道、法氏囊和泄殖腔內所引起的一種原蟲病。1907年，著名寄生蟲學家Tyzzer（1907）首次從實驗小鼠的胃腺乳膜上皮內發(fā)現隱孢子蟲，其具有廣泛的宿主類型，能感染大多數禽類，包括雞、鴨、鵝、火雞、鵪鶉等30多種禽類動物，引起動物嚴重的呼吸系統(tǒng)和消化系統(tǒng)障礙，導致其生產性能下降或死亡，造成重大經濟損失［1-3］。在我國北京、山東、廣東、寧夏、上海等地均已報道了畜禽隱孢子蟲感染。Goodwin等（1989）和 Tzipori等（1981）報道，雞在自然感染的情況下，其感染率為6.4%～88.0%。我國雞隱孢子蟲感染情況在北京為37.8%，新疆9.8%，廣東82.3%～100%；北京鴨隱孢子蟲感染率為29%～64%，鵪鶉為14.7%［4-5］。對三明市禽類隱孢子蟲感染情況的調查研究還沒有系統(tǒng)進行過，為全面了解掌握三明市禽隱孢子蟲感染狀況，科學推斷禽隱孢子蟲的感染來源和傳播機制以及公共衛(wèi)生重要性，為預防和控制禽隱孢子蟲病提供理論基礎，筆者對轄區(qū)內12個雞場、8個鴨場、2個鵝場、1個鴿場、1個鵪鶉場及36家散養(yǎng)戶的禽類進行隱孢子蟲感染情況調查。

1 材料與方法

1.1 樣品采集 隨機抽取12個雞場238羽雞，8個鴨場165羽鴨，2個鵝場40羽鵝，1個鴿場20羽鴿，1個鵪鶉場20羽鵪鶉，36家散養(yǎng)戶213羽家禽（其中雞152羽），逐一從其泄殖腔采集新鮮糞便5～10 g，共696份，分別裝入塑料袋中，密封編號，置于4℃冰箱保存待檢。

1.2 檢查方法 飽和蔗糖溶液漂浮法［6］：取糞便樣品，加10倍體積的蒸餾水，浸泡5 min充分攪勻，用銅網過濾，取濾液3000 r/min離心10 min，棄去上清液，加蔗糖漂浮液（蔗糖454 g，蒸餾水355 mL，石炭酸6.7 mL），充分混勻，3000 r/min離心10 min，用細鐵絲圈蘸取表層漂浮液涂片，在600倍光鏡下檢查。

改良抗酸染色法［7］：染液配制如下。石炭酸復紅染液（第1液）：堿性復紅4 g，95%的乙醇20 mL，石炭酸8 mL，蒸餾水100 mL；10%硫酸溶液（第2液）：純硫酸10 mL，蒸餾水90 mL（邊攪拌邊將硫酸徐徐傾入蒸餾水中）；孔雀綠液（第3液）：20 g/L孔雀綠原液1 mL，蒸餾水10 mL。操作步驟：將糞便樣品置于干凈載玻片上涂成糞膜，干后加甲醇固定5 min，吹干；滴加第 1 液染 5～10 min，水洗；滴加第2液染1～5 min后水洗；滴加第3液，1 min后水洗；干后置1000倍油鏡下觀察。

2 結果

2.1 不同區(qū)域感染情況 三明地處福建西北部，位于武夷山脈與戴云山脈之間。南北長180 km，東西寬230 km，區(qū)內山地丘陵廣布，山中及河谷盆地錯落其間，形成“八山一水一分田”的地理格局?？傮w地勢由西北部的武夷山麓自西南向東北傾斜，其中于沙溪中下游兩岸形成一塊閩中大谷地。全境屬中亞熱帶季風氣候區(qū)，溫度適宜，雨量充沛。森林覆蓋率達76.8%。各養(yǎng)殖場、戶散落于山地丘陵間，周圍復雜的地理環(huán)境提供了良好的防疫天然屏障。但由于現代交通事業(yè)的高速發(fā)展和人員間密切往來，加上各養(yǎng)殖場、戶防疫制度上的漏洞，使得天然隔離措施在防止疫病傳入上大打折扣。從表1中可以看出，三明地區(qū)禽隱孢子蟲感染具有普遍性，但在各區(qū)域間存在一定的差異（23.2%～32.2%），東部地區(qū)最高，達32.2%，北部地區(qū)最低，為23.2%；抽檢的60個規(guī)模養(yǎng)殖場和農村散養(yǎng)戶中，有17個陽性場（戶），平均感染率28.3%；抽檢696份糞便樣品，陽性數為192份，平均感染率27.6%。

表1 三明市各區(qū)域禽隱孢子蟲感染情況

2.2 不同養(yǎng)殖模式下各種家禽感染情況 規(guī)模養(yǎng)殖場感染率在25%～100%，抽檢483份樣品，陽性數為138份，平均感染率28.6%；農村散養(yǎng)戶感染率在14.3%～100%，抽檢213份樣品，陽性數為54份，平均感染率25.4%。規(guī)模養(yǎng)殖場感染率略高于農村散養(yǎng)戶，但二者間無明顯差異；雞、鴨的感染率較高，達25%～34%，鵝、鴿、鵪鶉的感染率較低，在0%～25%。見表2。

表2 不同養(yǎng)殖模式下禽隱孢子蟲感染情況

2.3 不同日齡家禽感染情況 10～30日齡平均感染率為33.9%，31～50日齡平均感染率為25.4%，51日齡以上平均感染率為22.1%；10～30日齡雞感染率最高（41.6%），明顯高于31日齡以上的雞群，鴨次之（30.5%）。見表3。

表3 不同日齡家禽隱孢子蟲感染情況

3 討 論

1）本次調查中，雞的總感染率為30.5%，鴨的總感染率為28.8%，鵝的總感染率為13.6%，鴿的總感染率為15%，鵪鶉的總感染率為0%，說明禽隱孢子蟲感染在三明市普遍存在，但在流行強度和損失程度上有所差別。通過試驗結果可以看出，規(guī)模養(yǎng)殖場和農村散養(yǎng)戶禽類的總感染率較高但差異不太，這可能與禽類養(yǎng)殖密度高，更易感染有關，其中雞的感染率較高于其他禽類動物，說明在類似的環(huán)境中雞比其他禽類更易感染隱孢子蟲?。淮舜握{查中，鵪鶉未檢出隱孢子蟲，但據國內外資料報道，鵪鶉也是隱孢子蟲宿主之一，孫銘飛等［8］報道鵪鶉隱孢子蟲陽性率達14.69%，而此次調查中鵪鶉未檢出隱孢子蟲可能與調查的范圍和數量偏少及樣品多為成年鵪鶉有關。

2）從此次調查結果看來，三明地區(qū)禽隱孢子蟲感染具有普遍性，但在各區(qū)域間存在一定的差異（23.2%～32.2%），表1中顯示北部地區(qū)明顯低于南部和東部地區(qū)，這是否與北部地區(qū)的地理環(huán)境或氣候有關還有待于調查；各種家禽隱孢子蟲病的感染率也存在一定差異，這種差異除了與調查范圍和樣品來源、數量有關外，還可能與不同的養(yǎng)殖模式和飼養(yǎng)環(huán)境有關。在調查中發(fā)現，對于一些感染率高的養(yǎng)殖場戶一般建場時間較長，飼養(yǎng)密度過大，禽舍通風不良，衛(wèi)生條件差等方面的問題，而感染率低的養(yǎng)殖房舍多數符合環(huán)境衛(wèi)生管理要求；農村散養(yǎng)戶比規(guī)模養(yǎng)殖場感染率低的原因，可能是由于農村多采取半放養(yǎng)的方式且養(yǎng)殖密度較低。

3）禽隱孢子蟲感染與日齡的關系。調查結果顯示，禽類動物隱孢子蟲感染率與日齡之間存在一定的關系。雛禽隱孢子蟲感染率明顯高于成年禽，這與周望平等［9］的報道相一致。從表3可見，雞隱孢子蟲感染受日齡的影響比較明顯，10～30日齡雞感染率為41.6%，31～50日齡雞感染率為28.9%，51日齡以上雞感染率為16.8%，前者明顯高于后者。

4）禽隱孢子蟲感染與季節(jié)的相關性。隱孢子蟲病一年四季均可發(fā)生，從此次調查發(fā)現，在三明地區(qū)以春夏季感染率最高，秋冬季較低，春夏秋冬季感染率呈下降趨勢，這可能與氣溫、濕度變化、禽類活動范圍影響隱孢子蟲病的傳播有一定關系。由于此次調查的時間、地區(qū)、范圍和環(huán)境都不相同，對隱孢子蟲感染受季節(jié)影響的規(guī)律性還有待于進一步證實。

5）隱孢子蟲卵囊形態(tài)結構與蟲種鑒定。由于隱孢子蟲感染多呈隱性經過，感染者可以只向外界排出卵囊，而不表現出任何臨床癥狀，對一些發(fā)病的禽類來說，即使有明顯的癥狀，也常常屬于非特異性的，另外，動物在發(fā)病時常伴有許多條件性病原體的感染，因此，確切的診斷只能依靠實驗室手段觀察隱孢子蟲的各期蟲體，或用免疫學技術檢測抗原或抗體的方法。應用飽和蔗糖溶液漂浮法和改良抗酸染色法對隱孢子蟲進行形態(tài)學鑒定，是當前最常用的檢測方法，其步驟簡便易行、結果明顯、不需復雜的儀器。此次檢測過程中，隱孢子蟲卵囊在糞便中已充分孢子化，卵囊呈長橢圓形，近似圓形等，大小為（5.5～7.7）μm×（4.2 ～5.5）μm，平均為 6.5 μm×4.7 μm，形狀指數為1.32。隱孢子蟲卵囊壁薄、光滑，無微孔和極粒，無色，卵囊內有4個子孢子和1個殘體，卵囊在飽和糖水中呈玫瑰紅色，周圍有亮綠色的折光帶。改良抗酸染色法可見卵囊呈玫瑰紅色，內部有桔子瓣狀結構，背景呈藍綠色，對比性很強。從形態(tài)學上初步鑒定為貝氏隱孢子蟲。本次調查的所有形態(tài)相似的陽性樣品中可能有多種基因型，這有待于進一步用分子生物學方法進行鑒定。

［1］ 孔繁瑤.家畜寄生蟲學［M］.2版.北京：中國農業(yè)大學出版社，1997：347-351.

［2］ 張龍現，蔣金書.隱孢子蟲和隱孢子蟲病研究進展［J］.寄生蟲與醫(yī)學昆蟲學報，2001，8（3）：184-192.

［3］ 孫銘飛，張龍現，寧長申，等.禽類隱孢子蟲研究進展［J］.中國人獸共患病雜志，2005，21（6）：522-525.

［4］ 孫彥平，張龍現，營復春，等.河南省規(guī)?；u隱孢子蟲感染情況調查［J］.中國家禽，2008，30（4）：49-52.

［5］ 史美清，林輝環(huán)，伊德里薩，等.廣州地區(qū)禽類隱孢子蟲病的初步調查［J］.華南農業(yè)大學學報，1996，17（1）：6-9.

［6］ 謝明權，李國清.現代寄生蟲學［M］.廣州：廣東科學技術出版社，2003.

［7］ 侯衛(wèi)東，菅復春，張龍現，等.抗酸染色法對隱孢子蟲卵囊的檢查［J］.河南畜牧獸醫(yī)，2006，27（11）：6-10.

［8］ 孫銘飛，閆文朝，張龍現，等.鵪鶉隱孢子蟲流行病學調查及動物感染試驗［J］.河南農業(yè)大學學報，2005，39（2）：210-214.

［9］ 周望平，肖兵南.湖南省部分地區(qū)禽隱孢子蟲感染情況調查［J］.中國獸醫(yī)科技，2000，30（10）：15-16.