黃其偉 王國民 王毅

（1.南華大學(xué)附屬第二醫(yī)院泌尿外科，湖南衡陽 421001；2.復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院泌尿外科，上海 200032）

前列腺癌與其他惡性腫瘤一樣，應(yīng)爭取早防、早診、早治。尋求腫瘤標(biāo)志物是目前腫瘤早期診斷常用的方法。本文就前列腺特異性抗原（prostate specific antigen，PSA）和新發(fā)現(xiàn)的幾種相關(guān)腫瘤標(biāo)志物綜述如下。

1 PSA

PSA是目前臨床上廣泛應(yīng)用的檢測指標(biāo)，它是20世紀(jì)60年代末在研究免疫避孕過程中發(fā)現(xiàn)的。PSA是前列腺腺泡和導(dǎo)管上皮細(xì)胞分泌的一種分子量約34 000的單鏈糖蛋白，是精液的主要成分之一。其具有糜蛋白活性，能水解精液凝固蛋白，使精液液化。PSA蛋白只在前列腺組織中存在，在前列腺癌患者血清中也有不同程度升高。1986年美國食品及藥品管理局推薦將血清PSA檢測用于前列腺癌的診斷。

PSA在正常男性血清中的濃度為0～4ng／mL，在精液中含量較高，約為血清濃度的100萬倍。目前研究［1］認(rèn)為，當(dāng)血清PSA＜4ng／mL時，約有15%的被檢測者證實患有前列腺癌；4ng／mL＜PSA＜10ng／mL時，前列腺癌的檢出率約為25%；PSA＞10ng／mL時，患前列腺癌的風(fēng)險約為60%。PSA是前列腺組織特異性抗原，而非前列腺癌特異性抗原。所以，PSA不是真正意義上的腫瘤標(biāo)志物。多種因素均可導(dǎo)致血清PSA升高，包括臨床上穿刺活檢時出現(xiàn)較多的“假陽性”和“假陰性”，從而導(dǎo)致PSA可信度降低。為此，研究人員一方面繼續(xù)研究PSA速率、PSA密度、游離PSA百分比等，以提高PSA敏感性；另一方面也在尋求更為敏感和特異的腫瘤標(biāo)志物。

2 前列腺癌相關(guān)標(biāo)志物

2.1 前列腺癌抗原3（prostate cancer antigen 3，PCA3） PCA3是一種非編碼 mRNA。1999年Bussemakers 等［2］通 過 Northern Blot 法 發(fā) 現(xiàn)PCA3，PCA3在正常前列腺組織中低表達(dá)，在其他多種組織器官中幾乎不表達(dá)，在前列腺癌及其轉(zhuǎn)移灶中高表達(dá)。Wright等［3］研究發(fā)現(xiàn)，PCA3在前列腺癌中的表達(dá)量是其在正常前列腺組織的66倍，PCA3在膀胱癌、乳腺癌、腎癌等腫瘤組織中均無表達(dá)。因此，PCA3基因具有前列腺癌組織特異性，是用作前列腺癌檢測的良好標(biāo)志物，其可以在前列腺癌患者的血液、尿液、精液中檢測到，但主要表達(dá)于前列腺癌細(xì)胞內(nèi)。血清中PCA3診斷前列腺癌的敏感性不及PSA。逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)方法檢測前列腺按摩后尿液中PCA3的表達(dá)量，敏感性為58%～82%，特異性為56%～76%［4］。Fradet等［5］對443例患者的研究顯示，PSA＜4.0ng／mL的患者中，PCA3對前列腺癌檢測的敏感性和特異性分別為74%和91%；4.0ng／mL＜PSA＜10.0ng／mL時，其敏感性和特異性分別為58%和91%；當(dāng)PSA＞10.0ng／mL時，其敏感性和特異性分別為79%和80%。因此，PCA3可作為前列腺癌早期診斷和監(jiān)測預(yù)后的腫瘤標(biāo)志物。

2.2 NY－ESO－1（New York－esophageal squamous cell carcinoma－1） NY－ESO－1是一種近年新發(fā)現(xiàn)的癌－睪丸抗原（cancer testis antigen，CTA）。CTA只在正常睪丸組織和腫瘤組織中表達(dá)，在其他正常組織中幾乎不表達(dá)。1997年Chen等［6］采用重組cDNA文庫血清學(xué)分析技術(shù)首次鑒定NY－ESO－1，其基因轉(zhuǎn)錄的mRNA最長為747堿基，表達(dá)的蛋白質(zhì)可能是一個跨膜蛋白。NY－ESO－1是近年被發(fā)現(xiàn)的免疫原性最強(qiáng)大的腫瘤特異性抗原之一。作為腫瘤診斷指標(biāo)，NY－ESO－1在前列腺癌、黑色素瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤等多種組織類型腫瘤中有不同程度的表達(dá)［7］。在前列腺癌，尤其是晚期前列腺癌中，NYESO－1呈高表達(dá)，而在良性前列腺增生中無表達(dá)。Gati等［8］在23例前列腺癌患者中檢測到9例NYESO－1陽性，陽性率為39.1%；而在23例前列腺增生患者中NY－ESO－1幾乎不表達(dá)。由此可見，NYESO－1可以作為前列腺癌的篩查指標(biāo)，但其單獨應(yīng)用時特異性和敏感性仍不如PSA，仍有待進(jìn)行臨床大樣本研究。

2.3 XAGE－1b（X antigen family，member1b）XAGE是通過生物信息學(xué)方法發(fā)現(xiàn)的一類新的CTA基因，與多種腫瘤細(xì)胞的生長有關(guān)［9］。XAGE－1 有 4 種 轉(zhuǎn) 錄 異 構(gòu) 體：XAGE－1a、XAGE－1b、XAGE－1c、XAGE－1d。XAGE－1b表達(dá)譜廣、表達(dá)率高、免疫原性強(qiáng)。XAGE－1b基因編碼一個含81個氨基酸的蛋白產(chǎn)物，在正常組織表達(dá)僅局限在睪丸，在胚胎和腦組織中低表達(dá)，而在腫瘤組織中如黑色素瘤、前列腺癌、肺癌、乳腺癌、肝癌等中表達(dá)水平較高。Koizumi等［10］研究顯示，54例前列腺癌組織樣本中，14例（25.9%）可檢測到 XAGE－1bmRNA表達(dá)，而 XAGE－1a、XAGE－1c、XAGE－1d分別只有1例、1例、3例表達(dá)，8例前列腺增生樣本中均表達(dá)陰性。陳陽生等［11］對38例前列腺癌及40例良性前列腺增生病理組織標(biāo)本進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，XAGE－1b在前列腺癌組織中的表達(dá)值為8.299±0.971，在良性前列腺增生組織中的表達(dá)值為3.007±0.916，差異有統(tǒng)計學(xué)意義，且XAGE－1b表達(dá)值隨Gleason評分、臨床分期和腫瘤惡性程度的升高而增加。XAGE－1b不僅在前列腺癌的早期診斷中有重要價值，在靶基因治療方面也有潛力，其詳盡機(jī)制尚不清楚。

2.4 SSX－2（synovial sarcoma，X breakpoint2）SSX－2基因也被稱為 HD21、HOM－MEL－40基因，它屬于SSX多基因家族成員，也屬于CTA家族成員。SSX－2位于 Xp11.23－p11.22，DNA 片段長約11 042bp，編碼一個含188個氨基酸的蛋白質(zhì)。SSX－2在正常睪丸組織中表達(dá)，在甲狀腺組織中微量表達(dá)。研究［12］發(fā)現(xiàn)，SSX－2基因在多種惡性腫瘤中均有表達(dá)，在黑色素瘤中的表達(dá)率為50%、胰腺癌為48.8%、肝細(xì)胞癌為30%、結(jié)腸癌為25%、乳腺癌為20%。Tureei等［13］在前列腺癌細(xì)胞株及組織中發(fā)現(xiàn)SSX－2表達(dá)，并認(rèn)為其可作為免疫治療的新靶點。Dubousky等［14］研究表明，SSX－2基因表達(dá)與腫瘤的分期、分級無關(guān)，說明其表達(dá)與腫瘤的惡性程度及病情進(jìn)展無關(guān)。SSX－2的表達(dá)在肝癌和肺癌中的研究較多，在前列腺癌方面的研究少見。隨著研究的深入，SSX－2有望成為前列腺癌早期診斷標(biāo)志物，且其在前列腺癌抗原肽疫苗方面也有應(yīng)用價值。

2.5 α－甲?；o酶 A 消旋酶（alpha－methylacyl－CoA racemase，AMACR） AMACR 是 一 種 由P504S基因編碼的含382個氨基酸的胞質(zhì)蛋白，能夠消旋不同α－甲酰基輔酶A衍生物的甲基，在支鏈脂肪酸和其衍生物以及膽汁酸中間產(chǎn)物的β－氧化中發(fā)揮重要作用，這種作用可能與前列腺癌的發(fā)生有關(guān)。2001年，Jiang等［15］采用免疫組織化學(xué)方法檢測AMACR，結(jié)果發(fā)現(xiàn)137例前列腺癌組織中均有AMACR表達(dá)，而在194例良性前列腺組織中未見表達(dá)或僅微量表達(dá)，提示AMACR可能是一種敏感性和特異性均較高的前列腺癌標(biāo)志物。Sreekumar等［16］應(yīng)用蛋白芯片、免疫印跡分析及酶鏈免疫吸附試驗方法檢測前列腺癌組和前列腺增生組患者血清中的AMACR水平，發(fā)現(xiàn)前列腺癌組患者明顯高于前列腺增生組，PSA 4～10ng／mL時診斷前列腺癌的敏感度和特異性達(dá)77.8%和80.6%。溫希平等［17］也證實，AMACR可作為前列腺癌的早期診斷標(biāo)志物，且發(fā)現(xiàn)AMACR水平與Gleason評分、PSA水平無明確相關(guān)性。因此AMACR具有較高的敏感性和特異性，可輔助PSA應(yīng)用于前列腺癌的篩查，提高前列腺癌的早期診斷率。

2.6 其他標(biāo)志物 P90是一種蛋白磷酸酶PP2A癌抑制蛋白抗體，能抑制腫瘤抗體PP2A?？筆90抗體可在多種腫瘤中表達(dá)［18］。Shi等［19］研究發(fā)現(xiàn)，在133例前列腺癌患者中，30.8%有P90抗體表達(dá)，而在68例良性前列腺增生患者中僅1.5%有表達(dá)。晶狀體上皮源性生長因子又稱P75，是存在于細(xì)胞核內(nèi)的蛋白，能上調(diào)熱休克蛋白27基因的表達(dá)，加強(qiáng)抗凋亡的作用，其在前列腺癌、結(jié)腸癌、甲狀腺癌、乳腺癌等多種腫瘤中均有表達(dá)［20］。

3 多種腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合檢測

腫瘤標(biāo)志物是惡性腫瘤在發(fā)生、生長及轉(zhuǎn)移過程中產(chǎn)生的物質(zhì)。理想的腫瘤標(biāo)志物應(yīng)具有敏感性高、特異性好、能反應(yīng)臨床分期等特點。但其實沒有任何標(biāo)志物能100%達(dá)到要求，一種標(biāo)志物可能出現(xiàn)在多種腫瘤中，或者一種腫瘤可能產(chǎn)生多種腫瘤標(biāo)志物。因此，有學(xué)者［21］提出，腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測在惡性腫瘤的早期診斷中能顯著提高其敏感性與特異性。

前列腺癌的復(fù)雜的生物學(xué)特性使得單靠PSA檢測難以達(dá)到令人滿意的診斷效果。宋衛(wèi)華等［22］對血清總PSA為0.2～20ng／mL的前列腺疾病患者，聯(lián)合檢測血清腫瘤特異性生長因子（tumor special growth factor，TSGF）和tPSA，發(fā)現(xiàn)PSA具有器官特異性而不具有腫瘤特異性，TSGF具有腫瘤特異性而不具有器官特異性，兩者結(jié)合能提高前列腺癌的早期診斷率。Rigau等［23］對154例PSA＞4 ng／mL或直腸指檢異常患者的尿液標(biāo)本行前列腺特異性膜抗原（prostate specific membrane antigen，PSMA），前列腺特異性G蛋白偶聯(lián)受體（prostate specific G－protein coupled receptor，PSGR）和PCA3聯(lián)合檢測，結(jié)果顯示在PSA“灰區(qū)”（4～10 ng／mL）時的受試者工作特征曲線下面積為0.82，修復(fù)敏感性為96%，特異性為50%。Cao等［24］對143例PSA＞4ng／mL或直腸指檢異?；颊叩哪蛞簶?biāo)本進(jìn)行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)PSA、PCA3等多種標(biāo)志物聯(lián)合檢測能顯著提高前列腺癌的診斷準(zhǔn)確性。以上研究表明，多種標(biāo)志物聯(lián)合檢測可以大大提高前列腺癌早期檢測的敏感性和特異性。

多種腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測是今后前列腺癌及其他惡性腫瘤早期診斷的一個必然發(fā)展方向，但還需解決以下幾個問題：第一，進(jìn)行大樣本量的臨床研究以驗證腫瘤標(biāo)志物；第二，找出更簡單的檢測方法，使檢測成本更低廉；第三，多種標(biāo)志物合理搭配，聯(lián)合檢測。目前血清PSA檢測仍然是臨床上篩查和監(jiān)測前列腺癌的主要方法。隨著研究的進(jìn)一步深入以及更簡單、更廉價檢測方法的出現(xiàn)，多種標(biāo)志物聯(lián)合檢測將在前列腺癌的早期診斷、監(jiān)測治療及預(yù)測復(fù)發(fā)中起到關(guān)鍵作用。

［1］Thompson IM，Pauler DK，Goodman PJ，et al.Prevalence of prostate cancer among men with a prostate－specific antigen level＜o(jì)r＝4.0ng per milliliter［J］.N Engl J Med，2004，350（22）：2239－2246.

［2］Bussemakers MJ，van Bokhoven A，Verhaegh GW，et al.DD3：a new prostate－specific gene，highly overexpressed in prostate cancer［J］.Cancer Res，1999，59（23）：5975－5979.

［3］Wright JL，Lange PH.Newer potential biomarkers in prostate cancer［J］.Rev Urol，2007，9（5）：207－213.

［4］Hessels D，Schalken JA.The use of PCA3in the diagnosis of prostate cancer［J］.Nature Rev Urol，2009，6（5）：255－261.

［5］Fradet Y，Saad F，Aprikian A，et al.uPM3，a new molecular urine test for the detection of prostate cancer［J］.Urology，2004，64（2）：311－316.

［6］Chen YT，Scanlan MJ，Sahin U，et al.A testicular antigen aberrantly expressed in human cancers detected by antologous antibody screening［J］.Proc Natl Acad Sci USA，1997，94（5）：1914－1918.

［7］彭吉潤，冷希圣.NY－ESO－1抗原與腫瘤免疫治療進(jìn)展［J］.中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報，2008，30（4）：1914－1918.

［8］Gati A，Lajmi N，Derouiche A，et al.NY－ESO－1expression and immunogenicity in prostate cancer patients［J］.Tunis Med，2011，89（10）：779－783.

［9］Sato S，Noguchi Y，Char N，et al.Identification of XAGE－1 isoforms：predominant expression of XAGE－1bin testis and tumors［J］.Cancer Immun，2007，7：5.

［10］Koizumi F，Noguchi Y，Saila T，et al.XAGE－1mRNA expression in prostate cancer and antibody response in patients［J］.Microbiol Immunol，2005，49（5）：471－476.

［11］陳陽生，江文生，許錫榮，等.XAGE－1b基因在良性前列腺增生與前列腺癌中的表達(dá)及其意義［J］.中華實驗外科雜志，2011，28（3）：457－458.

［12］dos Santos NR，de Bruijn DR.Molecular mechanisms underlying human synovial sarcoma development［J］.Gen Chromos Cancer，2001，30（1）：1－14.

［13］Tureei O，Sahin U，Schobert I，et al.The SSX－2gene，which is involved in the translocation of synovial sarcomas，codes for the human tumor antigen HOM－MEL－40［J］.Cancer Res，1996，56（20）：4766－4772.

［14］Dubousky JA，McNeel DG.Indncible expression of a prostate cancer－testis antigen，SSX－2，following treatment with a DNA methylation inhibitor［J］.Prostate，2007，67（16）：1781－1790.

［15］Jiang Z，Woda BA，Rock KL，et al.P504s：a new molecular marker for the detection of prostate carcinoma［J］.Am J Surg Pachol，2001，25（11）：1397－1404.

［16］Sreekumar A，Laxman B，Rhodes DR，et al.Humoral immune response to alpha－methylacyl －CoA racemase and prostate cancer［J］.J Natl Cancer Inst，2004，96（11）：834－843.

［17］溫希平，趙慧麗.前列腺特異性抗原及相關(guān)指標(biāo)檢測在前列腺癌篩查中的作用［J］.中國現(xiàn)代醫(yī)生，2007，45（14）：35－36.

［18］Liu W，Peng B，Lu Y，et al.Autoantibodies to tumor－associated antigens as biomarkers in cancer immunodiagnosis［J］.Auto immun Rev，2011，10（6）：331－335.

［19］Shi FD，Zhang JY，Liu DR，et al.Preferential humoral immune response in prostate cancer to cellular proteins p90and p62in a panel of tumor－associated autigens［J］.Prostate，2005，63（3）：252－258.

［20］Basu A，Rojas H，Banerjee H，et al.Expression of the stress response oncoprotein LEDGF／p75in human cancer：a study of 21tumor types［J］.PLoS One，2012，7（1）：e30132.

［21］郭釗林.前列腺癌中相關(guān)性診斷指標(biāo)的臨床研究［J］.中國醫(yī)藥科學(xué)，2012，2（1）：133－134.

［22］宋衛(wèi)華，沈玉琴，郁超.TSGF和tPSA聯(lián)合檢測在前列腺癌早期診斷中的應(yīng)用［J］.標(biāo)記免疫分析與臨床，2006，13（3）：186－187.

［23］Rigau M，Ortega I，Mir MC，et al.A three－gene panl on urine increases PSA specificity in the detection of prostate cancer［J］.Prostate，2011，71（16）：1736－1745.

［24］Cao DL，Ye DW，Zhang HL，et al.A multiplex model of combining gene－based，protein－based，and metabolite－based with positive and negative markers in urine for the early diagnosis of prostate cancer［J］.Prostate，2011，71（7）：700－710.