孫銘濤 劉甲辰 劉曉華

（中國醫(yī)科大學(xué)遼陽中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧 遼陽 111000）

酶免法檢測乙型肝炎病毒標(biāo)志物室間質(zhì)評水平與臨床檢驗(yàn)學(xué)研究

孫銘濤 劉甲辰 劉曉華

（中國醫(yī)科大學(xué)遼陽中心醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧 遼陽 111000）

為了使乙型肝炎病毒標(biāo)志物 (HBV-M)檢驗(yàn)結(jié)果更準(zhǔn)確，保證室間質(zhì)評結(jié)果的可比性，近年來用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) (ELISA)的方法，參加了衛(wèi)生部、遼寧省臨床檢驗(yàn)中心的室間質(zhì)評 (EQA)活動(dòng)。從回報(bào)的成績可以看到 SI值均＞ 0，證明我院對 HBV-M 的檢測水平高于全國和全省，但參加衛(wèi)生部檢驗(yàn)中心的成績還存在差異，符合率高低順序?yàn)?HBsAg＞ 抗 -HBs＞ 抗 HBe＞ HBeAg＞ 抗 -HBc，從結(jié)果分析，成績差異主要決定于標(biāo)本的發(fā)放，試劑的質(zhì)量等問題，應(yīng)引起重視。

酶聯(lián)免疫法；乙型肝炎病毒標(biāo)志物（HBV-M）；室間質(zhì)評（EQA）

質(zhì)量控制已成為保證檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的重要手段。為了使乙型肝炎病毒標(biāo)志物（HBV-M）檢驗(yàn)結(jié)果更準(zhǔn)確，保證室間質(zhì)評結(jié)果的可比性，更好的發(fā)揮其在臨床診斷和治療中的重要作用[1-4]，我院在2000年以來先后分別參加了省臨床檢驗(yàn)中心和衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心開展的HBV標(biāo)志物免疫學(xué)檢驗(yàn)室間質(zhì)評活動(dòng)。本文對我院自2009至2010年參加質(zhì)評的回報(bào)結(jié)果做一回顧性分析，以便總結(jié)室間質(zhì)評成績，更快的提高室間質(zhì)評水平。

1 資料與方法

1.1 質(zhì)評血清

均由衛(wèi)生部和遼寧省臨床檢驗(yàn)中心提供。

1.2 試劑

由沈陽惠民科技發(fā)展有限公司和廈門新創(chuàng)有限公司提供。

1.3 儀器

美國伯樂450酶標(biāo)儀和1250洗板機(jī)。

1.4 方法

酶聯(lián)免疫法（ELISA）。所有試驗(yàn)嚴(yán)格按照說明書操作，其中抗-HBc檢測按衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心要求用原倍樣本測抗-HBc（E），用稀釋的樣本檢測抗-HBc（C），而省臨床檢驗(yàn)中心要求用原倍樣本測抗-HBc（E）。

2 結(jié) 果

2.1 2009～2010年參加衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心

HBV-M室間質(zhì)評成績（SI）平均為0.28，符合率平均為97%。

2.2 2009～2010年參加遼寧省臨床檢驗(yàn)中心HBV-M室間質(zhì)評成績（SI）平均為0.46，符合率平均為100%。

2.3 2009至2010年HBV-M室間質(zhì)評活動(dòng)中，我院檢測結(jié)果與預(yù)期結(jié)果不符的主要有：抗-HBc（C）有八次不符，假陽性和假陰性各占一半。HBeAg三次不符全是假陰性，抗-HBe一次假陽性。

3 討 論

從結(jié)果可以看出，我院在參加衛(wèi)生部和遼寧省臨床檢驗(yàn)中心HBV -M室間質(zhì)評活動(dòng)中SI值均大于零，說明我院成績均高于全國和全省水平，特別是參加全省質(zhì)評成績最為突出，連續(xù)3年符合率為100%，說明我院對省質(zhì)控血清有較高的檢測水平，但參加衛(wèi)生部的HBV-M室間質(zhì)評的成績較省的差，可能有以下原因。

近年來，我院除參加遼寧省臨床檢驗(yàn)中心HBV-M室間質(zhì)評成績滿分及符合率達(dá)100%外，在參加衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心HBv-M室間質(zhì)評的成績存在差異，符合率高低順序?yàn)椋篐BsAg＞抗-HBs＞抗-HBe＞HbeAg＞抗-HBc。其中最理想的是HBsAg、抗-HBs符合率為100%，說明我院對這兩項(xiàng)的檢測水平較高；其次是抗-HBe，只有一次結(jié)果不符。另外，HBeAg結(jié)果有三次不符。分析這三次結(jié)果，都是預(yù)期結(jié)果陽性，而我院報(bào)告為陰性，筆者認(rèn)為除了工作人員操作有誤差外，還與國產(chǎn)試劑盒的靈敏度不夠和質(zhì)量不穩(wěn)定有關(guān)。符合率最差的是抗-HBc（C），有八次不符，咎其原因，筆者認(rèn)為也是試劑盒質(zhì)量不穩(wěn)定及廠商規(guī)定的稀釋度不統(tǒng)一有關(guān)。在全國學(xué)術(shù)會議上，曾經(jīng)有多位專家圍繞檢測抗-HBc 標(biāo)本是否要稀釋的問題爭論不休，最后認(rèn)為作為報(bào)告臨床意義的抗-HBc一定要稀釋標(biāo)本[5-6]。但從我們參加質(zhì)評活動(dòng)的成績來看，至少我們在抗-HBc稀釋的質(zhì)量上還未達(dá)到很高的準(zhǔn)確度，從而影響了我們的質(zhì)評成績，今后還要認(rèn)真總結(jié)經(jīng)驗(yàn)。

從我院參加衛(wèi)生部和省臨床檢驗(yàn)中心HBV-M室間質(zhì)評成績可以看到，參加省質(zhì)評的成績優(yōu)于參加部質(zhì)評的成績。這可能與部臨床檢驗(yàn)中心發(fā)放的質(zhì)評血清難度要大于省臨床檢驗(yàn)中心的緣故，而且還于質(zhì)評血清發(fā)放過程中的運(yùn)輸?shù)纫蛩赜嘘P(guān)。由于客觀原因，部質(zhì)評血清采用一次郵寄，而且標(biāo)本都是液體（容易變質(zhì)），而省質(zhì)評血清是凍干的，發(fā)放時(shí)各市統(tǒng)一領(lǐng)取，保證了運(yùn)輸?shù)馁|(zhì)量。故在質(zhì)評血清發(fā)放質(zhì)量保證方面省優(yōu)于部臨床檢驗(yàn)中心[7-8]。這也可能是參加部臨床檢驗(yàn)中心室間質(zhì)評成績不如參加省臨床檢驗(yàn)中心室間質(zhì)評成績的原因之一。

通過分析質(zhì)評結(jié)果可見，我院近年來在參加衛(wèi)生部和省臨床檢驗(yàn)中心HBV-M室間質(zhì)評的活動(dòng)中，雖然取得了較好的成績，但仍然存在一些差距。由于酶方法學(xué)影響因素多，標(biāo)準(zhǔn)化問題沒解決，質(zhì)控工作有難度。我們認(rèn)為要做好 HBV標(biāo)志物的檢測，提高室間質(zhì)評成績，首先要搞好室內(nèi)質(zhì)控。設(shè)法避免不同品牌試劑造成的陰陽性錯(cuò)誤，第一次用靈敏度高的試劑，第二次用特異性好的試劑。優(yōu)質(zhì)試劑盒一旦選用，不要經(jīng)常更換。提高每一位檢驗(yàn)技術(shù)人員的質(zhì)控意識和操作水平。同時(shí)盡可能用洗板機(jī)洗板，除去個(gè)體洗板差異。必須用酶標(biāo)儀讀數(shù)，消除主觀因素的影響，保持結(jié)果的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。每次質(zhì)評結(jié)果回報(bào)時(shí)，要認(rèn)真總結(jié)經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)，及時(shí)發(fā)現(xiàn)問題，分析問題，并努力解決問題，從而更快更好的提高質(zhì)評水平。

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