張 云 吳 偉
湖北理工學(xué)院醫(yī)學(xué)院,湖北 黃石 435003
黃酮類化合物在自然界廣泛分布,尤其是一些藥用植物中含量極為豐富[1]。黃酮類化合物除了賦予植物本身鮮艷的顏色外,還具有清除自由基、抗氧化、消炎等多種保健和醫(yī)藥功能[2]。近年來(lái),現(xiàn)代分離純化技術(shù)的飛速發(fā)展,使得黃酮類化合物種類越來(lái)越多,分類越來(lái)越細(xì)。因此,要想篩選到更多具有較好藥理活性的黃酮類化合物,就必須對(duì)植物中黃酮類化合物的有效提取工藝進(jìn)行更深入的研究和探索[3]。
2.1 醇提取法 有機(jī)溶劑提取法是黃酮類化合物提取最常用一種方法,常用的有機(jī)溶劑主要有乙醇、乙醚、甲醇和乙酸乙酯等,其中乙醇是最常用的。甘秀海等利用醇提法得到火棘果中黃酮類化合物的最佳提取工藝為乙醇濃度70%,料液比1∶20(g/ml),提取溫度70℃,提取時(shí)間4 h,提取率為1.316%[4]。此外,我們還發(fā)現(xiàn),在提高黃酮類化合物的純度時(shí),可以在乙醇或乙醇水溶液提取之前,增加石油醚或己烷進(jìn)行脫脂或脫色素環(huán)節(jié),效果更佳。
2.2 超聲波提取法 超聲波提取法具有操作方便,提取時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn),是目前提取藥用植物中黃酮類化合物廣泛采用的一種方法。卞杰松利用超聲波法測(cè)定馬鞍草中黃酮類化合物總量時(shí)所得結(jié)果為8.36mg/g,回收率為99.56%[5]。此外,醇提法與超聲波提取法聯(lián)合使用,效果也較理想。黃運(yùn)紅利用超聲波與醇提法相結(jié)合的手段,得到臍橙皮中黃酮類化合物的最佳提取工藝為超聲波功率125 W,乙醇濃度60%,料液比1∶35(g/ml),超聲時(shí)間60min,其提取率為 49.3mg/g[6]。
2.3 微波提取法 微波提取技術(shù)又稱微波萃取技術(shù),其最大的優(yōu)點(diǎn)是耗能耗材少、無(wú)污染,尤其對(duì)特定的藥材提取具有高選擇性。閆蕊采用微波法從蘆薈中提取黃酮類化合物,其最終工藝為微波功率560W,乙醇濃度80%,料液比1∶5,提取時(shí)間30s,提取率為0.052%,比較超聲波提取法的提取率提高了0.15倍[7]。董良云等利用微波輔助提取楊梅果肉中黃酮類化合物,在微波檔為低檔,料液比為1∶40,乙醇濃度60.0%,提取4.0min條件下,最大提取率為 3.45%[8]。
2.4 超臨界萃取技術(shù) 超臨界萃取是一種較廣泛使用的藥物提取、分離手段,其最大的優(yōu)點(diǎn)是無(wú)有機(jī)溶劑殘留,保證了提取成分的100%純天然。王敏通過(guò)實(shí)驗(yàn)探索出超臨界萃取技術(shù)提取銀杏葉黃酮的最佳工藝為:CO2流速為20L/h,乙醇濃度為80%,乙醇夾帶劑用量為100ml/100g銀杏葉,萃取壓力為30MPa,溫度為45℃,萃取時(shí)間為2h[9]。在乙醇濃度75%、CO2流速0.4m3/h、萃取壓力8MPa、溫度40℃條件下,黃酮的提取率為溶劑提取率的1.245倍[10]。
2.5 酶解法 酶解法是一種較好的輔助提取方法。酶具有高度的選擇性,因此對(duì)不同提取材料,選擇合適的酶對(duì)提取率影響較大。林宣賢在提取金櫻子黃酮過(guò)程中,分別用單一酶處理和復(fù)合酶處理進(jìn)行對(duì)比實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),復(fù)合酶的處理效果要明顯好于單一酶,且復(fù)合酶輔助處理后,金櫻子總黃酮產(chǎn)率提高了26.2%[11]。
2.6 膜分離提取法 膜分離技術(shù)也是一種常用的輔助提取技術(shù),其中超濾法作為唯一能用于分子級(jí)別的分離方法廣泛的應(yīng)用于黃酮類化合物的提取分離。利用超濾技術(shù)分離純化黃酮化合物最大的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便、無(wú)需加熱、不破壞活性成分的結(jié)構(gòu),純化和濃縮一步完成,超濾裝置還可反復(fù)使用。于濤等利用膜分離方法在對(duì)影響超濾效果的工藝條件研究中,成功使銀杏葉中的黃酮類化合物的提取得到優(yōu)化,產(chǎn)品中黃酮的含量達(dá)到33.99%[12]。
自然界含有黃酮類化合物的藥用植物種類數(shù)量繁多。作為植物次生代謝產(chǎn)物一大類家族,黃酮化合物由于修飾基團(tuán)的多變而呈現(xiàn)出結(jié)構(gòu)多樣化的特點(diǎn),從而使藥理活性也表現(xiàn)出多樣性。探索黃酮化合物的分離純化手段,對(duì)富含黃酮類結(jié)構(gòu)的植物進(jìn)一步研究,必將為充分利用自然資源產(chǎn)生積極影響。
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[4]甘秀海.火棘果中黃酮類化合物的提取工藝研究[J].廣州化工,2012,40(8):78-92.
[5]卞杰松.超聲波提取馬鞭草中黃酮類化合物的工藝研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2009,20(6):1420-1421.
[6]黃運(yùn)紅.超聲波提取臍橙皮黃酮類化合物的工藝研究[J].食品科學(xué),2009,30(16):102-105.
[7]閆蕊.微波法提取蘆薈中黃酮類化合物[J].東北師大學(xué)報(bào) (自然科學(xué)版),2008,40(1):85-89.
[8]董良云.微波輔助提取楊梅果肉中的黃酮類化合物[J].生物質(zhì)化學(xué)工程,2006,40(4):31-34.
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[12]于濤,錢和.膜分離技術(shù)在提取銀杏葉黃酮類化合物中的應(yīng)用[J].無(wú)錫輕工大學(xué)學(xué)報(bào),2004,23(6):55-58.