武彩霞，劉 睿，杜冠華

(1.中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所國家藥物篩選中心北京 100050;2.沈陽藥科大學(xué)生命科學(xué)與生物制藥學(xué)院 沈陽 110016;3.山東醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校臨沂 276002)

腦缺血/再灌注損傷是在腦缺血基礎(chǔ)上再灌注導(dǎo)致的腦組織進(jìn)一步損傷，最終會導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞壞死或凋亡。凋亡的細(xì)胞主要為神經(jīng)元，部分為神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞，其發(fā)生機(jī)制尚未完全清楚。關(guān)于細(xì)胞凋亡，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激啟動的凋亡途徑，是除了死亡受體途徑、線粒體途徑外，目前較受關(guān)注的一種新的誘發(fā)凋亡途徑［1］。有資料顯示，缺血預(yù)適應(yīng)(ischemic preconditioning，IPC)可以減輕缺血/再灌注造成的組織損傷，其機(jī)制與缺血預(yù)適應(yīng)能減弱內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激密切相關(guān)［2，3］。另外，還有人認(rèn)為，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在腦缺血/再灌注損傷的過程中，處于中心地位［4］。可見內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激是導(dǎo)致腦缺血/再灌注損傷的重要原因。本文對近年來內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與腦缺血/再灌注損傷的關(guān)系進(jìn)行綜述，以期為腦卒中的理論及臨床研究提供依據(jù)，并為治療腦卒中的藥物發(fā)現(xiàn)提供新思路。

1 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)功能及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的機(jī)制

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體是真核細(xì)胞內(nèi)多數(shù)蛋白質(zhì)合成、加工和轉(zhuǎn)運的場所。蛋白質(zhì)在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)完成轉(zhuǎn)錄、翻譯過程，并經(jīng)糖基化、折疊或裝配成多亞基的聚合物，最終形成具有天然構(gòu)象的蛋白質(zhì)。然后由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)運輸?shù)礁郀柣w，被進(jìn)一步修飾，經(jīng)高爾基體小泡運輸?shù)侥康牡?。?nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(endoplasmic reticulum stress，ERS)是指缺血缺氧、葡萄糖或營養(yǎng)物質(zhì)缺乏、脂質(zhì)過度負(fù)荷、病毒感染、藥物、毒素等有害因素破壞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的穩(wěn)態(tài)，出現(xiàn)錯誤折疊與未折疊蛋白在腔內(nèi)聚集以及Ca2+平衡紊亂的狀態(tài)?？煞譃?種類型［5］:(1)未折疊蛋白質(zhì)反應(yīng)(unfolded protein response，UPR);(2)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)過度負(fù)荷反應(yīng)(ER over-load response，EOR);(3)固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白質(zhì)(sterol regulatory element binding protein，SREBP)通路調(diào)節(jié)反應(yīng)。目前對UPR的研究比較深入，機(jī)制較為清楚，如果沒有特殊說明，通常所說的ERS是指UPR［5］。

UPR是指內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激發(fā)生時，細(xì)胞自身通過減少蛋白質(zhì)的合成，或增強(qiáng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的蛋白折疊功能及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)性蛋白降解途徑(ER associated degradation，ERAD)的過程。UPR激活利于恢復(fù)細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，提高細(xì)胞在有害因素下的生存能力。但是當(dāng)ERS非常劇烈或者持久時，細(xì)胞損傷過于嚴(yán)重，UPR不能使細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)及時恢復(fù)到正常，最終凋亡機(jī)制就會被觸發(fā)，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。

2 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的UPR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與腦缺血/再灌注損傷

2.1 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的UPR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)的UPR細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路主要包括3條:即PERK(protein kinase R—like ER kinase)通路、ATF6(activating transcription factor 6)通路、IRE1(inositol—requiring enzyme 1)通路。無應(yīng)激狀態(tài)下，PERK、ATF6、IRE1三種跨膜蛋白分別與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分子伴侶葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78/免疫球蛋白結(jié)合蛋白(glucoseregulated protein 78/binding immunoglobulinprotein，GRP78/BiP)結(jié)合而處于失活狀態(tài)。當(dāng) ERS發(fā)生時，GRP78與PERK、ATF6、IRE1解離，各跨膜蛋白自身結(jié)構(gòu)域感應(yīng)應(yīng)激，拉響應(yīng)激信號的警報，并將此信號傳遞給下游信號通道，對細(xì)胞進(jìn)行保護(hù)。

2.1.1 IRE1/X盒蛋白l通路 IRE1是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)I型跨膜蛋白，具有絲/蘇蛋白激酶和位點特異的核酸內(nèi)切酶活性。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中錯誤折疊蛋白的出現(xiàn)，使IRE1與GRP78分離，并形成同源二聚體，發(fā)生自身磷酸化被激活。IRE1激活后，能剪切XBP1mRNA中一個26bp長度的內(nèi)含子，形成具有轉(zhuǎn)錄因子活性的 XBP1s蛋白［9］。XBP1s與已知的啟動子元件結(jié)合，上調(diào)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的相關(guān)基因表達(dá)［6－7］

2.1.2 ATF6通路 ATF6是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)Ⅱ型跨膜蛋白，有高爾基體定位信號能夠感知應(yīng)激［12］。ERS發(fā)生時，錯誤折疊蛋白或未折疊蛋白堆積促使GRP78和ATF6分離，ATF6轉(zhuǎn)移至高爾基體。在高爾基體內(nèi)，ATF6被特異蛋白酶位點l和特異蛋白酶位點2裂解，形成同源二聚體或與其他轉(zhuǎn)錄因子形成異源二聚體，激活XBP1和其他UPR靶向基因［8］

2.1.3 PERK信號通路 PERK是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的I型跨膜絲/蘇蛋白激酶，屬于真核細(xì)胞翻譯起始復(fù)合物2α(eIF2α)激酶家族成員。ERS時，PERK與GRP78解離后形成同源二聚體，發(fā)生自身磷酸化被激活。PERK激活后，主要特異性磷酸化eIF2α，下調(diào)eIF2α活性水平，降低新生蛋白的翻譯速率，下調(diào)細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)合成的整體水平，保護(hù)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的功能［9］。此外，PERK介導(dǎo)的eIF2α磷酸化還導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄因子ATF4上調(diào)。ATF4進(jìn)入胞核后激活C/EBP同源蛋白(C/EBP homology protein，CHOP)、生長抑制DNA損害誘導(dǎo)基因34、ATF3及關(guān)于氨基酸轉(zhuǎn)運基因編碼蛋白的表達(dá)，而且還抑制氧化應(yīng)激。

2.2 腦缺血/再灌注損傷與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)性死亡 腦缺血/再灌注時，細(xì)胞凋亡增加是腦組織損傷的重要原因。而缺血/再灌注及缺血缺氧性損傷是ERS發(fā)生的重要條件，細(xì)胞通過ERS自身產(chǎn)生應(yīng)激性保護(hù)措施。但是劇烈或持久的ERS會誘導(dǎo)caspase-12、CHOP等表達(dá)，激活凋亡信號通路，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，加重腦缺血/再灌注損傷。

2.2.1 腦缺血/再灌注損傷Ca2+濃度變化與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激腦缺血是造成腦組織細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)損傷的重要因素，尤其是在再灌注時。在缺血區(qū)，由于神經(jīng)元缺少氧氣和能量，導(dǎo)致細(xì)胞膜損傷及其功能障礙，引起跨膜離子濃度失衡，導(dǎo)致細(xì)胞外Ca2+內(nèi)流增加;缺氧還會致使NO產(chǎn)生，這也促使內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中Ca2+釋放［10］;這些因素最終導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)Ca2+超載。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)的Ca2+主要發(fā)揮兩種作用:一是釋入胞質(zhì)作為第二信使;二是在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)調(diào)節(jié)蛋白酶活性。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)大量Ca2+釋入胞質(zhì)會對細(xì)胞功能和狀態(tài)產(chǎn)生嚴(yán)重而廣泛的影響，如會破壞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高爾基體之間以及胞核與胞質(zhì)之間的膜轉(zhuǎn)運等。另一方面，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)依靠多種Ca2+依賴性蛋白酶的調(diào)節(jié)生成和加工分泌性蛋白質(zhì)，因此Ca2+從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔大量釋出后，這些蛋白酶失去活性，導(dǎo)致蛋白質(zhì)前體未經(jīng)折疊、加工或錯誤折疊而在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)積聚，最終導(dǎo)致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激發(fā)生。

2.2.2 腦缺血/再灌注損傷活性氧(ROS)和一氧化氮(NO)產(chǎn)生與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激 在能導(dǎo)致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的各種刺激中，活性氧是造成該細(xì)胞器嚴(yán)重?fù)p害的重要分子之一。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)豐富，含有大量脂質(zhì)，當(dāng)產(chǎn)生ROS時很容易發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，導(dǎo)致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)功能嚴(yán)重障礙。腦缺血/再灌注過程中產(chǎn)生大量ROS，影響內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的鈣離子泵功能，從而逐步耗竭內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的Ca2+，引起細(xì)胞內(nèi)游離Ca2+增加，誘發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和細(xì)胞凋亡［11］。此外，在腦缺血/再灌注過程中，缺血組織生成NO增多，導(dǎo)致過氧化亞硝酸鹽也很容易在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)產(chǎn)生。過氧化亞硝酸鹽是一個毒性很高的分子，可能通過酪氨酸殘基硝基化使各種蛋白功能受損。也有人認(rèn)為，過多的NO可直接干擾內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的功能，激活ERS。但是，NO激活ERS反應(yīng)的機(jī)制還有待進(jìn)一步的研究［10］。大量的研究表明內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在缺血性神經(jīng)細(xì)胞死亡中發(fā)揮積極作用。在A Young Cho研究中［12］，用thapsigargin和brefeldin A導(dǎo)致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)HT22鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞凋亡，發(fā)現(xiàn)thapsigargin和brefeldin A可使活性氧的產(chǎn)生和積聚是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的主要誘因。

2.2.3 腦缺血/再灌注損傷炎癥發(fā)生與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激 近來研究表明，腦缺血/再灌注后局部過度的炎癥反應(yīng)是引起再灌注損傷的主要原因之一。炎癥反應(yīng)可抑制神經(jīng)元再生及其它與腦卒中后功能恢復(fù)相關(guān)的變化［13］。腦缺血/再灌注早期，血腦屏障破壞，通透性增加，引起白蛋白和其他大分子蛋白滲出，導(dǎo)致了水腫。此外，釋放的超氧陰離子等和NO反應(yīng)生成氧亞硝酸鹽，觸發(fā)炎癥反應(yīng)和細(xì)胞凋亡，引起進(jìn)一步的組織損傷。缺血/再灌注后期，炎癥基因激活，產(chǎn)生白介素-1β (interleukin-1β，IL-1β)、白介素-6(interleukin-6，IL-6)、腫瘤壞死因子 α(tumor necrosis factor，TNFα)、干擾素調(diào)節(jié)因子(interferon regulatory factor，IRF)、NF-κB 等炎癥介質(zhì)，促進(jìn)中性粒細(xì)胞貼壁和跨膜遷移，促進(jìn)白細(xì)胞浸潤，釋放細(xì)胞因子和趨化因子，引起更廣泛的腦組織固有細(xì)胞激活和血源性白細(xì)胞浸潤，最終導(dǎo)致血腦屏障進(jìn)一步受損，加重腦水腫，出現(xiàn)神經(jīng)元遲發(fā)性死亡?？梢娔X缺血/再灌注可致炎癥級聯(lián)反應(yīng)發(fā)生，進(jìn)一步加重了腦組織損傷［14］。

研究表明，炎癥和 ERS之間存在著廣泛的聯(lián)系［15－17］。有資料表明，LPS(Lipopolysaccharide)、IL-1β、IL-6、TNFα 等炎癥因子均可引起ERS，但其機(jī)制目前還不清楚［18，19］。另外，ERS也會促進(jìn)炎癥發(fā)生?，F(xiàn)已明確，NF-κB是重要的轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，在炎癥反應(yīng)發(fā)生過程中發(fā)揮主導(dǎo)作用。越來越多的資料表明［20－22］，某些藥物對腦缺血/再灌注損傷的保護(hù)作用就是通過抗炎抗凋亡作用實現(xiàn)的，而這作用與抑制NF-κB的活化相關(guān)。ERS發(fā)生時，PERK-eIF2α介導(dǎo)的翻譯減緩直接促進(jìn)NF-κB激活［23］，由于 IκB的半衰期明顯短于 NF-κB，PERK-eIF2α 介導(dǎo)的翻譯抑制作用增加了 NF-κB/IκB 的比值，因此，游離的NF-κB轉(zhuǎn)位到細(xì)胞核增多，促進(jìn)炎癥反應(yīng)發(fā)生。此外，ERS發(fā)生時，IRE1α通路激活，IRE1α發(fā)生磷酸化，構(gòu)象發(fā)生改變，與接頭蛋白分子TNFα受體相關(guān)因子2(tumor necrosis factor-2，TRAF2)結(jié)合，形成 IRE1α-TRAF2 復(fù)合物。此復(fù)合物能夠募集IκB激酶，使IκB磷酸化并降解，致NF-κB核轉(zhuǎn)位增加，激活促炎癥反應(yīng)基因的轉(zhuǎn)錄。IRE1-TRAF2復(fù)合物還能夠募集并活化蛋白激酶JNK，進(jìn)而磷酸化和活化轉(zhuǎn)錄因子AP1，增加促炎癥基因的表達(dá)。除了這兩條通路外，ERS時ATF6通路也會促進(jìn)NF-κB激活［19］。

另外，也有人認(rèn)為［24－25］，在炎癥早期階段，ERS 促進(jìn)NF-κB活化，產(chǎn)生炎癥;在炎癥后期，ERS可通過誘導(dǎo)NF-κB抑制因子A20的表達(dá)，抑制NF-κB的活性，抑制促炎因子的表達(dá)。根據(jù)這些研究結(jié)果，如何用藥物干預(yù)腦缺血/再灌注過程炎癥的早期階段，減弱內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，減少炎癥損傷，發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用，值得深入研究。

2.3 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)性死亡途徑 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激是應(yīng)激條件下發(fā)生在細(xì)胞中的最初反應(yīng)，蛋白質(zhì)合成的暫停減輕了新生蛋白肽鏈對ER的負(fù)荷與壓力，是細(xì)胞本身的一種自我保護(hù)性機(jī)制。但是，長時間的ERS會使未折疊蛋白持續(xù)增加，引起細(xì)胞功能失調(diào)，ERS由促細(xì)胞生存的保護(hù)效應(yīng)向促細(xì)胞凋亡效應(yīng)轉(zhuǎn)化［26］。ERS引起的細(xì)胞凋亡有一套自身的信號傳遞通路，稱為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)性死亡(ERAD)途徑。

2.3.1 Caspase-12的激活 Caspase-12定位于ER外膜，是ERS誘導(dǎo)凋亡的特異性蛋白酶，也是介導(dǎo)ERS凋亡的關(guān)鍵分子，能夠單獨通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)途徑而不通過其他凋亡途徑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。非ERS時，caspase-12與蛋白分子伴侶BiP和caspase-7形成復(fù)合體，細(xì)胞不會表現(xiàn)凋亡;但是ERS時BiP減少，無法與 caspase-7、caspase-12充分結(jié)合，caspase-12激活［27］，從而進(jìn)一步激活 caspase-9，caspase-9 把信息傳遞給caspase-3引起細(xì)胞最終凋亡。還有資料證實［28］，caspase-12－/－大鼠對ERS誘導(dǎo)的凋亡具有抵抗作用，而對于其他途徑誘導(dǎo)的凋亡敏感性不變，進(jìn)一步說明了ERS介導(dǎo)caspase-12凋亡途徑。而M.SHIBATA等也在他們的實驗研究中指出［29］，局灶性腦缺血/再灌注損傷引起內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，激活caspase-12，誘導(dǎo)神經(jīng)元凋亡。最近的研究也表明，對原代培養(yǎng)的大鼠神經(jīng)元，進(jìn)行缺氧復(fù)氧損傷或谷氨酸損傷，能引發(fā)ERS，上調(diào)caspas-12表達(dá)，而?；撬嵬ㄟ^抑制ATF6和IREα通路減弱ERS，發(fā)揮細(xì)胞保護(hù)作用［30］。但是，目前，caspase-12只在大鼠和小鼠體內(nèi)被克?。?1］。研究發(fā)現(xiàn)，人類的caspase-4與鼠caspase-12具有高度同源性，在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)介導(dǎo)的凋亡途徑起到重要作用［32，33］，可能是腦卒中潛在的治療靶點。

2.3.2 CHOP轉(zhuǎn)錄激活 CHOP是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激特異的轉(zhuǎn)錄因子，屬C/EBP轉(zhuǎn)錄因子家族成員，也稱GADD153。正常情況下，胞內(nèi)CHOP表達(dá)十分低。當(dāng)ERS時，其表達(dá)明顯增加。ERS使跨膜蛋白IRE1和ATF6活化，其胞質(zhì)部分進(jìn)入胞核，與ERSE保守序列相連，而啟動CHOP的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)。此外，PERK通路激活，磷酸化 eIF2α增加，誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄因子ATF4表達(dá)，ATF4可與CHOP啟動子的氨基酸反應(yīng)元件位點結(jié)合，激活CHOP。PERK信號激活在ERS早期通過抑制蛋白質(zhì)合成對細(xì)胞起保護(hù)作用，但 ERS時間過長，持續(xù)的PERK信號誘導(dǎo)CHOP表達(dá)而促進(jìn)細(xì)胞凋亡［34］。

很多資料證實，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)劑thapsigargin和tunicamycin均可使CHOP表達(dá)上調(diào)，促進(jìn)凋亡;對原代培養(yǎng)的大鼠心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞，進(jìn)行缺氧/復(fù)氧損傷，CHOP表達(dá)升高，細(xì)胞凋亡增加;而缺氧預(yù)適應(yīng)則通過下調(diào)其表達(dá)，減少缺氧/復(fù)氧引起的細(xì)胞凋亡［35］。研究證實［36］，小鼠腦缺血損傷后在相同時間點當(dāng)CHOP表達(dá)升高時，GRP78的表達(dá)會降低，表明CHOP的表達(dá)可破壞GRP78保護(hù)機(jī)制而誘導(dǎo)神經(jīng)元凋亡。另有資料證實，大鼠短暫局灶性腦缺血海馬CHOPmRNA水平升高。而且，在雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎的小鼠缺血模型，CHOP－/－小鼠梗死面積要小于野生型小鼠。越來越多的資料證明，CHOP表達(dá)增加是ERS引起細(xì)胞凋亡的重要原因。關(guān)于CHOP凋亡通路，可能有以下幾種:(1)CHOP下調(diào)Bcl-2水平，上調(diào)Bcl-2家族成員BH3的預(yù)凋亡基因Bim，使細(xì)胞對ERS的敏感性增加［37］;(2)CHOP的目靶基因可能是TRB3，研究發(fā)現(xiàn)，剔除TRB3基因的表達(dá)可以降低ERS誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的能力［38］;(3)CHOP可能通過上調(diào)巰基氧化酶Ero-1的水平，使Ero-1作為活性氧簇的副產(chǎn)物而激活凋亡程序［39］。綜上所述，CHOP表達(dá)可能與細(xì)胞凋亡密切相關(guān)。CHOP可能是治療繼發(fā)性腦損傷中一個重要靶點。

2.3.3 c-jun氨基末端激酶(JNK)誘導(dǎo)的凋亡途徑 ERS時，IRE1激活c-jun氨基末端激酶(JNK)，誘導(dǎo)凋亡。一種方式是:c-jun氨基末端激酶磷酸化TRAF2，再與caspase-12作用，促進(jìn)其聚合和活化;另一種方式是:IRE1/TRAF2/凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1(ASK1)形成復(fù)合物，激活c-jun氨基末端激酶，依賴線粒體/Apaf-1途徑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡［40］。有資料顯示，在ASK1－/－細(xì)胞中，ERS則不能誘導(dǎo)JNK的激活以及細(xì)胞凋亡，表明ASK1是ERS誘導(dǎo)JNK的激活以及細(xì)胞凋亡所必需的。最近的研究也表明，腦缺血/再灌注損傷的病理過程中，NO生成可以激活A(yù)SK1，從而進(jìn)一步激活其下游的的JNK 通路［27，41］;此外，有人認(rèn)為再灌注早期 CHOP 轉(zhuǎn)錄激活是導(dǎo)致再灌注損傷的主要原因，它和caspase-12的激活導(dǎo)致ERS級聯(lián)反應(yīng)發(fā)生，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡［27］。而c-jun氨基末端激酶對caspase-12誘導(dǎo)的凋亡途徑影響更為顯著。該研究提示，腦缺血/再灌注早期應(yīng)用c-jun氨基末端激酶的抑制劑，可減弱ERS和細(xì)胞凋亡，減輕腦缺血/再灌注損傷。

3 小結(jié)與展望

腦缺血/再灌注損傷的病理生理過程中，細(xì)胞內(nèi)Ca2+平衡紊亂，ROS和NO產(chǎn)生增加及炎癥反應(yīng)等均能觸發(fā)ERS。GRP78作為ERS敏感標(biāo)志物，其表達(dá)的增加提示缺血/再灌注出現(xiàn)了ERS。在Yajing Yuan缺血后處理保護(hù)I/R損傷的研究中［42］，缺血后處理增加 GRP78的表達(dá)，降低腦組織CHOP表達(dá)，降低casepase-12活性，表明缺血后處理也可通過抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡發(fā)揮腦保護(hù)作用;已有資料證實，依達(dá)拉奉不論對腦缺血/再灌注的動物模型還是對腦卒中病人均能減少腦梗塞面積和腦水腫［43－44］，其神經(jīng)保護(hù)作用實驗證實也與其減少CHOP和capase-12的表達(dá)有關(guān)［45］。Nakka 等研究表明［4］，大鼠腦缺血/再灌 注 后，GRP78、caspase-12、CHOP/ATF4 及 XBP1 表達(dá)上調(diào)，對 eIF2α去磷酸化的抑制能增加eIF2α磷酸化的表達(dá)，對抗ERS，減輕腦缺血/再灌注損傷。

綜上所述，ERS凋亡途徑是腦缺血/再灌注過程中神經(jīng)元死亡的重要方式之一。研究腦缺血/再灌注損傷和ERS的關(guān)系能為腦卒中的研究提供重要理論基礎(chǔ)，抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激有望阻止腦缺血后的病理過程，這將為腦卒中的治療和藥物發(fā)現(xiàn)提供新思路。

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