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心肌三合一快速診斷試劑盒在手足口病患兒中的臨床應(yīng)用

2013-02-19 08:48孔東輝田瑾瑾李肖宇汪園琪冀文娟安徽省亳州市人民醫(yī)院檢驗科236800
檢驗醫(yī)學(xué)與臨床 2013年1期
關(guān)鍵詞:肌紅蛋白口病心肌細(xì)胞

孔東輝,田瑾瑾,李肖宇,汪園琪,冀文娟,李 萍(安徽省亳州市人民醫(yī)院檢驗科 236800)

手足口病(HFMD)是一種由腸道病毒引起的,臨床以手、足、口腔皰疹為特征的病毒感染性疾病。引發(fā)手足口病的腸道病毒有20多種(型),以柯薩奇病毒A16型(CoxA16)和腸道病毒71型(EV71)最常見。多發(fā)生于嬰幼兒,該病多數(shù)預(yù)后良好。個別患者可引起心肌炎、肺水腫、無菌性腦膜腦炎等并發(fā)癥而導(dǎo)致死亡。有文獻(xiàn)報道該病還可引起心臟損害[1-2]。本文選擇手足口病流行期間本院住院的60例HFMD患兒為研究對象,分析血漿肌鈣蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)檢測在手足口病患兒心肌損傷中的臨床價值。HFMD的及時診斷對HFMD治療和預(yù)后有重大意義。但心肌酶譜的定量檢測受實驗條件限制在某些醫(yī)院無法開展,而有條件開展檢測的醫(yī)院又很難做到全天開啟生化分析儀,且檢測時間相對較長,需靜脈采血,HFMD患兒多為3歲以下,靜脈采血患兒及家長不易接受且醫(yī)療風(fēng)險較大。因此尋求一種簡便、快速、敏感性和特異性都高的檢測試劑和方法迫在眉睫。作者對cTnI、肌紅蛋白、CK-MB聯(lián)合檢測試劑盒進(jìn)行了實驗觀察,報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2011年4~6月來本院就診的確診HFMD患兒60例,所有病例均伴發(fā)熱,手、足、口均有斑丘疹、皰疹,符合《手足口病預(yù)防控制指南(2008年版)》診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]。對照組為60例同期本院健康體檢兒童,年齡1~24月。

1.2 試劑 cTnI、肌紅蛋白、CK-MB聯(lián)合檢測試劑盒由杭州艾康生物技術(shù)有限公司提供。

1.3 方法 (1)采集所有檢測對象血漿或末梢血標(biāo)本進(jìn)行檢測。(2)cTnI、肌紅蛋白、CK-MB聯(lián)合檢測試劑盒測定應(yīng)用免疫層析法。測試時,將標(biāo)本滴入試劑盒加樣孔,標(biāo)本中如含有肌紅蛋白或cTnI或CK-MB,則標(biāo)本中的心肌3項指標(biāo)分別與預(yù)先包被在聚酯膜上的金標(biāo)記的3項指標(biāo)相應(yīng)抗體結(jié)合,結(jié)合物在毛細(xì)效應(yīng)下向上層析,隨后會被固定在膜上相應(yīng)測試區(qū)內(nèi)的3項相應(yīng)抗體結(jié)合捕獲,從而在相應(yīng)測試區(qū)出現(xiàn)紫紅色條帶。如果是陰性標(biāo)本,則相應(yīng)測試區(qū)內(nèi)沒有紫紅色條帶出現(xiàn)。(3)cTnI、肌紅蛋白、CK-MB聯(lián)合檢測試劑盒測定按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。(4)數(shù)據(jù)處理分別計算出心肌3項指標(biāo)的敏感性、特異性和正確診斷率[4]。

2 結(jié) 果

2.1 60例HFMD患兒cTnI陰性2例,肌紅蛋白陰性1例,CK-MB陰性1例;60例非HFMD患者cTnI陽性0例,肌紅蛋白陽性0例,肌酶激酶同工酶陽性1例。該例CK-MB陽性是由于嚴(yán)重溶血或黃疸對檢測造成負(fù)干擾。因此,應(yīng)避免標(biāo)本溶血。

2.2 血漿cTnI檢測的敏感性、特異性、診斷正確率分別為96%、95%、94%;肌紅蛋白分別為100%、91%、96%;CK-MB分別為98%、95%、97%。由于心肌3項指標(biāo)均有很高的敏感性,cTnI、肌紅蛋白、CK-MB聯(lián)合檢測試劑盒檢測,能為臨床篩查HFMD心肌損傷提供重要的實驗依據(jù)。

3 討 論

1957年新西蘭首次報道HFMD。我國于1981年上海首次報道本病。此后,各省均有本病報道。HFMD是由腸道病毒CoxA16、EV71引起的急性傳染病,多發(fā)生于學(xué)齡前兒童,尤以3歲以下齡組發(fā)病率最高。患者和隱性感染者均為傳染源,主要通過消化道、呼吸道和密切接觸等途徑傳播。主要癥狀表現(xiàn)為手、足、口腔等部位的斑丘疹、皰疹,以每年5~7月為發(fā)病高峰,四季均可見散發(fā)病例。HFMD傳染性強(qiáng),可在短期內(nèi)造成大流行,一般病程短而輕,多在1周內(nèi)痊愈。多數(shù)預(yù)后良好,少數(shù)病例可出現(xiàn)腦膜炎、腦炎、腦脊髓炎、肺水腫、循環(huán)障礙等,多由EV71感染引起。2008年5月2日衛(wèi)生部正式將HFMD納入丙級傳染病管理,加強(qiáng)了對本病的認(rèn)識、研究和管理。該病不僅可引起心肌損害,亦可并發(fā)暴發(fā)性心肌炎導(dǎo)致死亡。王曉華[5]報道HFMD 1 698例,3例死于暴發(fā)性心肌炎。研究表明,HFMD嚴(yán)重期心肌酶譜明顯升高,其升高的程度與疾病嚴(yán)重程度呈正比,與預(yù)后密切相關(guān)[6]。當(dāng)心肌損傷后,肌紅蛋白于起病后2h在血液中濃度升高,12h達(dá)高峰,24~48 h恢復(fù)正常,具有很高的陰性排除價值;心肌cTnI在起病后3~4h后升高,11~24h達(dá)高峰,7~10d降至正常;CK-MB在起病后4h內(nèi)升高,16~24h達(dá)高峰,3~4d恢復(fù)正常。因為心肌損害首先表現(xiàn)為心肌酶譜的改變,當(dāng)達(dá)到一定程度時才出現(xiàn)電生理紊亂,才表現(xiàn)為心電圖異常。當(dāng)心肌細(xì)胞損傷時,細(xì)胞質(zhì)天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、乳酸脫氫酶(LDH)、激酸激酶(CK)、CK-MB釋放入血,這時檢驗血清心肌酶譜會升高。AST廣泛分布于人體各組織、器官中,主要在心、肝、骨骼肌、腎、胰、脾、肺、紅細(xì)胞中,其中以心肌細(xì)胞含量最豐富。LDH廣泛存在于以心、腎、骨骼肌為主的人體組織內(nèi),二者特異性不高;CK、CK-MB在心肌損傷2~6h開始升高,比其他酶出現(xiàn)早,并迅速升至高峰,2周左右即可恢復(fù)正常[7],其中CK在骨骼肌中最多,其次是心肌、腦和平滑肌等組織中也有分布;而CK-MB是特異性同工酶,在心肌細(xì)胞中含量高,具有較高的特異性和敏感性,故它的升高可作為心肌損傷早期診斷指標(biāo)。HFMD引起心肌酶譜升高可能與下列因素有關(guān):(1)病毒感染直接作用導(dǎo)致心肌細(xì)胞壞死和炎癥細(xì)胞反應(yīng);(2)機(jī)體免疫反應(yīng)可加劇心肌細(xì)胞的損傷;二者使得心肌細(xì)胞內(nèi)酶的釋放。LDH、CK、CK-MB是目前常用的與心肌損害有關(guān)的酶學(xué)檢查指標(biāo),其中CK-MB是心肌特異性同工酶,在心肌細(xì)胞中含量最高,正常血清中含量極微,當(dāng)心肌細(xì)胞受損時釋放入血,對判斷心肌損害有高度特異性[8]。

一旦發(fā)現(xiàn)感染HFMD,則應(yīng)將患兒隔離,以免傳染他人引起流行蔓延,應(yīng)適當(dāng)休息,清淡飲食,做好口腔和皮膚護(hù)理。如出現(xiàn)心肌酶升高,要提高警惕,盡早行胸片、心電圖等檢查以免延誤最佳治療時機(jī)[9]。

測定肌紅蛋白的方法很多,如分光光度法、電泳法。這些方法不能測定低于微克水平的肌紅蛋白;免疫化學(xué)法比較靈敏,但抗血清必須是對肌紅蛋白特異的;對流免疫電泳是一種定性方法,靈敏度只有2mg/mL,不適宜檢測心肌梗死;放射免疫試驗檢測肌紅蛋白、CK-MB靈敏度高,特異性強(qiáng),但使用放射性同位素,會造成對環(huán)境的污染;膠乳增強(qiáng)透射比濁法測定肌紅蛋白、cTnl靈敏度高,特異性好,測定速度快,但需要自動生化分析儀,成本較高[10-11]。肌鈣蛋白測定多用免疫學(xué)方法,ELISA法適宜大批量檢測,CK-MB測定采用全自動電泳儀,成本較高;免疫抑制法敏感性高于電泳法,能用于急診,但需要生化分析儀。cTnI、肌紅蛋白、CK-MB聯(lián)合檢測試劑盒采用高度特異性的抗體-抗原反應(yīng)及免疫層析分析技術(shù)。心肌3項指標(biāo)在同一反應(yīng)板上同時進(jìn)行檢測,10~20min便可讀取結(jié)果。適合單個標(biāo)本檢測且不需特殊設(shè)備。由于心肌3項指標(biāo)在血液中升高、降至正常的時間不同,cTnI、肌紅蛋白、CKMB聯(lián)合檢測試劑盒則結(jié)合了肌紅蛋白高敏感性和cTnI和CK-MB的較高特異性,有利于提高診斷正確率。作者認(rèn)為cTnI、肌紅蛋白、CK-MB聯(lián)合檢測試劑盒在篩查HFMD時,陰性結(jié)果在很大程度上排除了HFMD患兒心肌損傷的可能,而陽性結(jié)果則需結(jié)合臨床表現(xiàn)和心電圖檢查等進(jìn)行綜合判斷。由于cTnI、肌紅蛋白、CK-MB聯(lián)合檢測試劑盒具有很高的敏感性、較高特異性和診斷正確率,且方法簡便、快速,標(biāo)本容易采集,故可用于HFMD患兒心肌損傷的急診篩查,且能減少治療前的時間延誤,對HFMD患兒嚴(yán)密觀察心臟體征,對合并心肌損害早期發(fā)現(xiàn),并予保護(hù)心肌、促進(jìn)損傷心肌細(xì)胞迅速恢復(fù)正常功能,對預(yù)后起重要作用[12]。同時可給予營養(yǎng)心肌藥物以防止心肌損傷進(jìn)一步加重或并發(fā)心肌炎 。HFMD患兒可檢測血漿或末梢血,適用于住院及門診患兒篩查,兩種采血方法供選擇,減少了患兒及家長不愿采靜脈血的痛苦,降低了醫(yī)療安全風(fēng)險,有利于社會醫(yī)院和諧發(fā)展。

[1] 吳梅青.手足口病患兒心肌酶及心電圖特點及臨床意義[J].實用醫(yī)學(xué)雜志,2010,26(13):2404-2405.

[2] 姜太一,范麗娟,朱志強(qiáng).手足口病患兒心肌酶學(xué)特點及其臨床意義[J].中國誤診學(xué)雜志,2008,8(33):8159.

[3] 中華人民共和國衛(wèi)生部.手足口病預(yù)防控制指南[J].中華實驗和臨床感染病雜志,2008,2(3):210-213.

[4] 中華醫(yī)學(xué)會傳染病與寄生蟲病學(xué)分會、肝病學(xué)分會.病毒性肝炎防治方案[J].中華傳染病雜志,2001,19(1):56-62.

[5] 王曉華.小兒手足口病1 698例分析[J].中華傳染病雜志,2002,20(4):242.

[6] 李蘭娟.手足口?。跰].杭州:浙江科學(xué)技術(shù)出版社,2008:62.

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