周 濃，郭冬琴，沈 力，吳應(yīng)梅，干昌波

（1.重慶三峽學(xué)院，生命科學(xué)與工程學(xué)院，重慶404000；2.重慶三峽醫(yī)藥高等?？茖W(xué)校，重慶404120）

川貝母為百合科植物太白貝母（Fritillaria taipaiensis P.Y.Li）和暗紫貝母（FritiLlaria unibracteata Hsiao et K.C.Hsia）等貝母屬植物的干燥鱗莖[1]，具有清熱潤肺、止咳化痰、散結(jié)消癰之功效[2]，是在中藥（含保健食品）組方中應(yīng)用范圍最大、使用頻率最高的中藥材之一[3]。川貝母在民間常用于制作具有保健功能的藥膳食用，如川貝母粥、川貝杏仁鴨、川貝冰糖湯、川貝雪梨豬肺湯等[4]。因此，川貝母在日常食補(bǔ)或疾病康復(fù)中扮演著日益重要的角色，與百姓健康密切相關(guān)。隨著對(duì)中藥材的認(rèn)識(shí)不斷發(fā)展，重金屬是目前公認(rèn)的對(duì)人體有害的微量元素，重金屬殘留和污染嚴(yán)重影響了中藥材的內(nèi)在質(zhì)量，其問題已對(duì)中國的食品安全、百姓身體健康和農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展構(gòu)成了嚴(yán)重威脅，通過食物鏈進(jìn)入人體后不能被分解，將對(duì)人體健康造成潛在危害[5-8]。為此，本文采用原子熒光光譜法對(duì)不同商品名稱川貝母中重金屬含量進(jìn)行分析，從重金屬角度評(píng)估因服用或食用川貝母帶來的健康風(fēng)險(xiǎn)，從而指導(dǎo)民眾科學(xué)合理的使用川貝母。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

太白貝母樣品 2011年7月采自重慶市巫溪縣蘭英鄉(xiāng)園林太白貝母種植基地，經(jīng)作者本人鑒定為百合科植物太白貝母Fritillaria taipaiensis的干燥鱗莖，太白貝母栽培藥材因生長年限不同性狀差異較大，根據(jù)藥材形狀和大小不同分為6個(gè)樣品，分別稱作松尖、小尖、中尖、大尖、花生小貝和花生大貝；松貝、青貝樣品 2011年6月采自四川省松潘縣，經(jīng)作者本人鑒定為百合科植物暗紫貝母Fritillaria unibracteata的干燥鱗莖；砷、汞、鎘、鉛標(biāo)準(zhǔn)貯備液 1.000mg/L購自國家環(huán)境保護(hù)總局標(biāo)準(zhǔn)樣品研究所，批號(hào)分別為：103005、102905、102105、100804；水為超純水；其他試劑 均為優(yōu)級(jí)純。

AE240型分析天平 梅特勒-托利多儀器上海有限公司；EH 20A型電熱板 北京萊伯泰科儀器設(shè)備有限公司；AFS-3100型雙道原子熒光分光光度計(jì) 北京科創(chuàng)海光儀器公司；鉛、鎘、汞、砷空心陰極燈 北京有色金屬研究總院；AKWL-IV-24型超純水機(jī) 成都唐氏康寧科技發(fā)展有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 測定條件 燈電流：砷45mA，汞20mA，鎘45mA，鉛40mA；光電倍增管負(fù)高壓：砷230V，汞220V，鎘280V，鉛240V；原子化器高度：砷、汞、鎘、鉛均為8mm；載氣（Ar）流量：砷、汞400m L/m in，鎘450m L/min，鉛500m L/min；屏蔽氣（Ar）流量：砷、汞、鎘均為800m L/m in，鉛1000m L/m in；讀數(shù)時(shí)間：15s；延遲時(shí)間：0s；還原劑：砷、鎘、鉛均為2%KBH4+KOH，汞3%KBH4+KOH；載液：砷、汞、鎘均為5%HCl，鉛2%HCl；讀數(shù)方式：峰面積；定量方法：標(biāo)準(zhǔn)曲線法。

1.2.2 供試品溶液的制備 樣品的前處理和轉(zhuǎn)移參照周濃等[9]人的方法，分別精密稱取樣品1.0g，置500m L燒杯中，加入高氯酸-硝酸（1∶4）15m L，砷、汞、鎘、鉛分別進(jìn)行消解，直至燒杯中黃煙冒盡，溶液清亮，加入少量高純水直至白煙冒盡。砷元素：在比色管中加入10m L 5%抗壞血酸-5%硫脲混合液，用4mol/L HCl溶液定容至25m L，搖勻。汞元素：在比色管中加入2.5m L 50%硝酸溶液，用超純水定容至25m L，搖勻。鎘元素：在比色管中用0.25mol/L HCl溶液轉(zhuǎn)移并定容至25m L，搖勻。鉛元素：在比色管中加入2.5m L 20%HCl溶液與5m L 10%K3Fe（CN）6-2%草酸混合液，用超純水定容至25m L，搖勻。同法隨行制備空白對(duì)照溶液。

1.2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 分別精密量取砷標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量，置于50m L量瓶中，加10m L 5%抗壞血酸-5%硫脲混合液，以4mol/L的HCl溶液定容至刻度，搖勻，即得0、10、20、50、100μg/L的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別精密量取汞標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量，置于50m L量瓶中，加5m L 50%硝酸溶液，用超純水定容至刻度，搖勻，即得0、10、20、50、100μg/L的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別精密量取鎘標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量，置于50m L量瓶中，以0.25mol/L的HCl溶液定容至刻度，搖勻，即得0、10、20、50、100μg/L的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。分別精密量取鉛標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量，置于50m L量瓶中，加入5m L 20%HCl溶液與10m L 10%K3Fe（CN）6-2%草酸混合液，用超純水定容至刻度，搖勻，即得0、50、100、200、400μg/L的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。按“1.2.1”項(xiàng)下測定條件進(jìn)行測定，得熒光強(qiáng)度（IF）與質(zhì)量濃度（C）的線性回歸方程。

1.2.4 方法學(xué)考察

1.2.4.1 精密度實(shí)驗(yàn) 取上述砷、汞、鎘、鉛同一對(duì)照品溶液（濃度均為100μg/L），按“1.2.1”項(xiàng)下測定條件進(jìn)行連續(xù)測定6次，測得各元素的熒光強(qiáng)度。

1.2.4.2 重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 取同一太白貝母樣品6份（花生大貝），按“1.2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液及“1.2.1”項(xiàng)下測定條件進(jìn)行測定，測得各元素的熒光強(qiáng)度。

1.2.4.3 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 取同一太白貝母樣品6份（花生大貝），室溫密閉放置，按“1.2.1”項(xiàng)下測定條件進(jìn)行測定，在0～3h內(nèi)每隔30min測定1次，測得各元素的熒光強(qiáng)度。

1.2.5 檢出限與定量限實(shí)驗(yàn) 在“1.2.1”項(xiàng)下測定條件對(duì)空白溶液進(jìn)行連續(xù)測定11次，其檢測結(jié)果的3倍標(biāo)準(zhǔn)偏差除以標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率作為本方法各元素的檢出限，10倍標(biāo)準(zhǔn)偏差作為元素的定量限。

1.2.6 加樣回收率實(shí)驗(yàn) 精密稱取同一太白貝母樣品0.5g（花生大貝），共6份，分別精密加入50μg/L的砷、汞、鎘、鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液0.25、0.25、2.5、0.25m L，按“1.2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液及“1.2.1”項(xiàng)下測定條件進(jìn)行測定，測定各元素的熒光強(qiáng)度，計(jì)算回收率。

1.2.7 樣品含量測定 分別精密稱取各樣品各1.0g，按“1.2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，平行3份，按“1.2.1”項(xiàng)下測定條件進(jìn)行測定，測定各元素的熒光強(qiáng)度，計(jì)算其結(jié)果。

2 結(jié)果與分析

2.1 回歸方程的確定

砷、汞、鎘、鉛的線性回歸方程分別為：IF= 15.168C+29.258（r=0.9998）；IF=79.159C-1.199（r= 0.9999）；A=12.229C+9.917（r=0.9994）；IF=2.198C+14.735（r=0.9997）。結(jié)果表明，砷、汞、鎘、鉛分別在0～100、0～100、0～100、0～400μg/L范圍內(nèi)具有良好的線性關(guān)系。

2.2 方法學(xué)考察結(jié)果

2.2.1 精密度實(shí)驗(yàn) 砷、汞、鎘、鉛熒光強(qiáng)度值的RSD分別為0.68%、0.42%、0.35%、0.81%。

2.2.2 重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 砷、汞、鎘熒光強(qiáng)度值的RSD分別為1.22%、2.22%、1.82%，鉛未檢出。

2.2.3 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 結(jié)果樣品溶液在3h內(nèi)基本穩(wěn)定，砷、汞、鎘熒光強(qiáng)度值的RSD分別為2.19%、1.89%、1.24%，鉛未檢出。

2.3 檢出限與定量限的確定

砷、汞、鎘、鉛的檢出限分別為0.0712、0.0136、0.0358、0.0018mg/kg；砷、汞、鎘、鉛的定量限分別為0.1921、0.0462、0.0825、0.0068mg/kg，結(jié)果符合痕量測定的要求。

2.4 加樣回收率實(shí)驗(yàn)

砷、汞、鎘、鉛平均回收率分別為98.92%、98.61%、95.80%、100.22%，RSD分別為2.89%、3.08%、 2.55%、1.62%，符合分析要求，見表1。

表1 加樣回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果（n=6）Table1 Results of the recovery（n=6）

2.5 樣品含量測定

將熒光強(qiáng)度值代入回歸方程中分別計(jì)算砷、汞、鉛、鎘的含量，結(jié)果見表2。

表2 暗紫貝母與太白貝母中重金屬含量的測定結(jié)果（mg/kg）Table2 Resultof heavymetalmeasurement in Fritillaria taipaiensis and Fritillaria unibracteata

根據(jù)《藥用植物及制劑進(jìn)出口行業(yè)綠色標(biāo)準(zhǔn)》對(duì)中藥材重金屬含量限值規(guī)定[10]：重金屬總量≤20.0mg/kg，砷≤2.0mg/kg，汞≤0.2mg/kg，鎘≤0.3mg/kg，鉛≤5.0mg/kg，國家1997年頒布的《保健（功能）食品通用標(biāo)準(zhǔn)（GB16740-1997）》中規(guī)定：砷≤1.0mg/kg、鉛≤2.0mg/kg、汞≤0.3mg/kg，不同商品名稱太白貝母和暗紫貝母樣品中，重金屬殘留程度不同，但均未超過上述標(biāo)準(zhǔn)的限量值。表明太白貝母和暗紫貝母生長環(huán)境良好，應(yīng)加強(qiáng)其生長地理環(huán)境的保護(hù)，以保持其優(yōu)良品質(zhì)。

由表2可知，不同商品名稱太白貝母和暗紫貝母中重金屬元素含量存在一定的差異，可能與其生長的土壤、空氣等環(huán)境中重金屬污染有關(guān)及品種的富集能力有關(guān)[11]。同時(shí)，太白貝母中砷、汞、鎘的含量表現(xiàn)出隨著生長年限（花生大貝、花生小貝＞大尖、中尖、小尖＞松尖）增加而增加的趨勢，表明太白貝母中重金屬污染是一個(gè)逐漸積累的過程，是否具有一定的富集能力，有待采集更多樣本進(jìn)一步研究。

3 結(jié)論

采用原子熒光光譜法控制不同商品名稱太白貝母和暗紫貝母中砷、汞、鎘、鉛等重金屬的含量，有利于提高其使用的安全性。結(jié)果表明，不同品種及同一品種不同商品名稱的川貝母中重金屬殘留量有差異，但均遠(yuǎn)低于國家及行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中重金屬的允許量。從重金屬污染這個(gè)角度來說，太白貝母、暗紫貝母及其衍生產(chǎn)品是安全的，為進(jìn)一步研究開發(fā)川貝母提供理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

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