孫泉云,夏爐明,盧 軍
(上海市動物疫病預(yù)防控制中心,上海201103)
布魯菌?。˙rucellosis)簡稱布病,是由布魯菌 (Brucella)引起的一種人獸共患的慢性傳染病,在許多國家和地區(qū)均有不同程度的發(fā)生和流行。本病原菌主要侵害動物生殖系統(tǒng),以母畜發(fā)生流產(chǎn)和公畜發(fā)生睪丸炎為特征,臨床癥狀包括流產(chǎn)、早產(chǎn)、不孕、不育、胎盤滯留、睪丸炎、關(guān)節(jié)炎、神經(jīng)損傷和各種組織的局部病灶。
動物布魯菌根據(jù)其對宿主的偏好性和菌株致病性的區(qū)別,目前已經(jīng)鑒定9個(gè)種,其中6個(gè)為經(jīng)典種,這6個(gè)種根據(jù)它們的培養(yǎng)和一些生物學(xué)特性又可以劃分為18個(gè)亞型,包括羊種布魯菌(B.melitensis,也稱馬耳他布魯菌,主要感染綿羊和山羊種,包括1、2、3亞型),牛種布魯菌(B.abortus,也稱流產(chǎn)布魯菌,包括1、2、3、4、5、6、9亞型),豬種布魯菌(B.suis,包括1、2、3、4、5亞型,主要感染豬,馴鹿和野兔),犬種布魯菌(B.canis),綿羊種布魯菌(B.ovis)和沙林鼠布魯菌(B.neotomae)。其中致病譜最廣的是B.abortus、B.melitensis和B.suis,4個(gè)種對人具有致病性,即B.melitensis,B.abortus,B.suis和B.canis。后來又鑒定到3個(gè)新的種,田鼠種布魯菌(B.microti)、鯨種布魯菌 (B.cetacease)和鰭種布魯菌(B.pinnipediae),后2種又可合稱為海洋種(B.maris)。
野生動物的某些習(xí)性也決定了其布魯菌感染模式,如狼通過捕食羊和馴鹿而感染,狐貍?cè)∈沉鳟a(chǎn)胎兒感染。有些布魯菌種可在野生動物群中貯存,其宿主包括野豬、野牛、麋鹿、野兔等。B.abortus的貯存宿主包括野牛、野水牛、麋鹿、駱駝和野豬,B.ovis的宿主包括野羊和赤鹿,B.suis的宿主包括野豬、野兔和馴鹿,B.neotomae的宿主涵蓋嚙齒類動物。野兔感染B.suis后內(nèi)臟器官出現(xiàn)結(jié)節(jié),尤其是生殖器官、皮下組織和肌肉。母馴鹿感染B.suis后可發(fā)生流產(chǎn)、胎盤滯留、子宮炎和乳房炎,公鹿則發(fā)生睪丸炎、關(guān)節(jié)炎和皮下膿腫。
野生動物的布魯菌病不但能影響其繁殖性能,而且可作為疫源傳播給家畜和人類。因此,了解和弄清野生動物布魯菌的感染狀況,有助于家畜布魯菌病的控制和凈化,從而保障人類的身心健康。
野豬對B.suis的易感性要高于家豬,但許多病例均觀察不到明顯病變。Gennero M S等[1]在2000年-2004年間采用補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(CFT)對意大利4 456頭野豬血樣進(jìn)行了抗體檢測,結(jié)果在不同年份分別檢出抗體陽性率為6%、2%、8%、10%和10%;對1 423頭野豬組織樣品(子宮、脾臟和睪丸)進(jìn)行了細(xì)菌分離和鑒定,結(jié)果共分離到134株布魯菌,其中70株歸屬B.suis生物1型,36株為生物2型,21株為B.melitensis生物3型,7株為未知型。Watarai M等[2]采用ELISA和試管凝集試驗(yàn)(TAT),對捕獲的115頭日本野豬的血清樣品進(jìn)行了布魯菌抗體檢測,結(jié)果檢出9頭陽性,陽性率為7.8%。鑒于戶外家豬群暴發(fā)了布魯菌病,懷疑野豬是其傳染源,Melzer F等[3]采用ELISA和補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(CFT)對德國5個(gè)聯(lián)邦州的野豬群進(jìn)行了布魯菌血清學(xué)監(jiān)測。共采集不同地區(qū)野豬血樣885頭份,結(jié)果不同地區(qū)間ELISA試驗(yàn)檢出的陽性率為0~28.5%,而CFT試驗(yàn)對應(yīng)檢出的陽性率為0~12.1%。Cvetnic Z等[4]在2003年-2004年間從克羅地亞捕獲的野豬群中隨機(jī)采集了424頭野豬血樣,檢測布魯菌感染情況,結(jié)果血清抗體陽性率達(dá)27.6%,從抗體呈陽性的93頭野豬中分離到7株布魯菌,分離率達(dá)7.5%,經(jīng)培養(yǎng)鑒定為B.suis生物2型和生物3型。Munos P M等[5]在1999年-2009年間,采用ELISA方法對來自西班牙伊比利亞地區(qū)的野豬群進(jìn)行了布魯菌感染狀況調(diào)查,共采集了4 454頭野豬血清樣品,結(jié)果不同地區(qū)間抗體陽性率達(dá)25%~46%。對分離到的104株布魯菌進(jìn)行了遺傳發(fā)生樹分析,均歸屬于B.suis生物2型,與家豬中分離到的布魯菌高度吻合。
Muma J B等[6]在2003年、2004年和2008年捕獵季節(jié)在贊比亞捕獲到121頭驢羚,采用RBT、cELISA和FPA試驗(yàn)檢測布魯菌血清抗體,結(jié)果總陽性率為21.6%,波動范圍為14.2%~29.1%。公母驢羚的陽性率無顯著差異,分別為21.7%和21.6%,三種不同方法間的檢測結(jié)果也基本一致。Kreeger T J等[7]發(fā)現(xiàn)9頭成年巖羊(5公,4母)因接觸麋鹿流產(chǎn)胎兒而感染了布魯菌,公羊表現(xiàn)的臨床癥狀為睪丸炎和附睪炎,母羊表現(xiàn)為流產(chǎn)、淋巴腺炎和胎盤炎。所有羊血清學(xué)檢測均為抗體陽性,經(jīng)對組織器官的細(xì)菌學(xué)檢查,分離菌株鑒定為B.abortus生物4型。
Etter R P等[8]在1998年-2002年間,連續(xù)4年對美國愛達(dá)荷州的麋鹿群進(jìn)行了布魯菌血清學(xué)監(jiān)測。結(jié)果在自由散放的麋鹿間檢出布魯菌抗體陽性率為2%~3%,而人工飼養(yǎng)的麋鹿抗體陽性率為12%~80%。選取部分血清抗體陽性的麋鹿實(shí)施安樂死,采集組織器官進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)和分子生物學(xué)鑒定,分離菌株為B.abortus生物1型和4型,但以4型居多。經(jīng)流行病學(xué)調(diào)查,發(fā)現(xiàn)血清抗體陽性的麋鹿群出現(xiàn)過臨床癥狀,包括流產(chǎn)(16%)、死產(chǎn)(8%)、產(chǎn)弱仔(4%)。Elisei C等[9]在巴西潘塔奈爾保護(hù)區(qū)采集了44頭野鹿的血樣,采用PCR進(jìn)行布魯菌病原學(xué)檢測。結(jié)果檢出9頭陽性,陽性率為20.4%。經(jīng)基因測序,證實(shí)與B.suis高度同源。
感染野牛的布魯菌主要是B.abortus,其分布與該種菌在家牛中的分布近似,野牛感染后表現(xiàn)消瘦、跛行、關(guān)節(jié)炎等臨床癥狀。B.abortus可在家牛和野牛中雙向傳播,野牛被認(rèn)為是B.abortus的維持宿主。Rhyan J C等[10]在1995年-1999年間,對來自美國黃石國家公園的野牛血樣和流產(chǎn)胎兒等組織樣品進(jìn)行了血清學(xué)、細(xì)菌學(xué)和組織病理學(xué)檢查,結(jié)果35頭野牛血樣中26頭呈抗體陽性,從流產(chǎn)胎兒和胎盤中分離到的菌株經(jīng)鑒定為B.abortus生物1型和2型。Scurlock B M等[11]在1992年-2008年間,對美國懷俄明州西部的野牛群中捕獲321頭野牛進(jìn)行了布魯菌抗體跟蹤監(jiān)測,結(jié)果抗體陽性率達(dá)63.9%。Fyumagwa R D等[12]采用玫瑰紅平板凝集試驗(yàn)和ELISA試驗(yàn)對坦桑尼亞Serengeti生態(tài)保護(hù)區(qū)內(nèi)的水牛和黑尾牛羚進(jìn)行了布魯菌血清學(xué)監(jiān)測,共采集了205頭份血清樣品,結(jié)果水牛和黑尾牛羚的陽性率分別為24%和17%。
Abbas B等[13]調(diào)查發(fā)現(xiàn),駱駝的布魯菌感染表現(xiàn)兩種模式,游牧散養(yǎng)的駱駝呈現(xiàn)低流行率(2%~5%),而集約化或半集約化飼養(yǎng)的駱駝則呈現(xiàn)高流行率(8%~15%),主要由不同生物型的B.abortus和B.melitensis引發(fā)感染。Musa M T等[14]對蘇丹的駱駝布魯菌病暴發(fā)病例進(jìn)行了流行病學(xué)調(diào)查,5頭發(fā)病駱駝經(jīng)血清學(xué)檢測均為陽性,其中3頭表現(xiàn)臨床病癥。隨后將其他貌似健康的駱駝送至屠宰場,又檢出6頭血清抗體陽性,其中5頭駱駝的頜下淋巴結(jié)出現(xiàn)特征病變。經(jīng)病原學(xué)檢測,感染的布魯菌為B.melitensis生物3型和B.abortus生物6型。
自1996年英國Foster G等[15]發(fā)現(xiàn)了海洋種布魯菌(B.maris)以來,不同國家從世界上不同海域(南極、北歐、南北美海域等)的10余種鰭類和鯨類海洋哺乳動物(海豹、海豚、鯨魚等)分離到該種菌[16]。一般用B.maris可代表所有分離菌株,而鰭種布魯菌(B.pinnipediase)特指從鰭類(海豹、海獅和海象)分離到的菌株,鯨種布魯菌(B.cetaceae)專指鯨類(海豚、海鯨)中分離到的菌株。某些海洋動物感染后可出現(xiàn)相關(guān)病變,包括腦膜腦炎、皮下膿腫、胎盤炎、副睪炎、慢性膿性肉芽性睪丸炎、淋巴腺炎、乳房炎、腹膜炎、脊椎炎、矽化肺肉芽腫、肝膿腫、肝脾壞死等。Prenger-Berninghoff E等[16]對426頭普通海豹、298頭海豚、34頭灰海豹和10頭其它海洋哺乳動物的內(nèi)臟組織樣品進(jìn)行了布魯菌原學(xué)檢測,結(jié)果47頭普通海豹、2頭海豚和1頭灰海豹為陽性,并從中分離到91株布魯菌,肺臟中菌株的分離率最高。經(jīng)基因測序,證實(shí)絕大多數(shù)分離菌株為B.pinnipediae,2株為B.ovis。Jauniaux T P等[17]2008年發(fā)現(xiàn)1頭雌港灣鼠海豚死于比利時(shí)海灘,體形消瘦,經(jīng)解剖檢查生殖道和鰭表皮潰瘍,采集內(nèi)臟組織進(jìn)行免疫組化試驗(yàn)、透射電鏡觀察和細(xì)菌學(xué)檢查,證實(shí)分離菌株為B.ceti。
Hubalek Z等[18]在1999年-2003年發(fā)現(xiàn)在捷克南部的野鼠中流行一種疫病,急性感染的臨床表現(xiàn)為高度水腫,有時(shí)伴發(fā)膿腫、關(guān)節(jié)炎、淋巴腺炎、睪丸炎和腹膜肉芽腫。經(jīng)對臨床組織樣品的分離鑒定,證實(shí)為布魯菌。Schiabritz-Loutsevitch N E等[19]發(fā)現(xiàn)1頭13歲的經(jīng)產(chǎn)狒狒和1頭8歲的初產(chǎn)狒狒于懷孕后3個(gè)月產(chǎn)下死胎,經(jīng)生化分析、PCR檢測和基因測序,證實(shí)分離菌株為布魯菌,但與現(xiàn)有的布魯菌表型特征不符,說明是一種新的亞種。Scholz H C等[20]從奧地利Gmund地區(qū)捕獲的赤狐頜下淋巴結(jié)中分離到2株革蘭陰性的短桿菌,經(jīng)分離培養(yǎng)和基因測序,鑒定為田鼠種布魯菌(B.microti)。赤狐感染可能是捕食了感染布魯菌的野鼠而致。O’Hara T M等[21]在2003年-2006年間,采用標(biāo)準(zhǔn)平板試驗(yàn)(SPT)和抗原卡試驗(yàn)(BBA)對美國北阿拉斯加的北極熊進(jìn)行了布魯菌特異性抗體的檢測,總陽性率為10.2%,平均年陽性率為6.8%~18.5%。
布魯菌病是一種分布廣泛的全球性重要人獸共患傳染病,人間布魯菌病的發(fā)生主要取決于動物(包括家畜和野生動物)布魯菌疫源地的存在。而實(shí)施家畜布魯菌病的防控和凈化,必須依賴于野生動物布魯菌病的有效控制。由于目前對野生動物布魯菌病的流行狀況、感染機(jī)制等方面知之甚少,可能影響到對布魯菌病的整體防控和撲滅策略,因此必須關(guān)注和重視野生動物布魯菌病的流行病學(xué)調(diào)查和防控研究。
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