張 姣，戴雪伶，姜招峰*

(北京聯(lián)合大學(xué) 生物活性物質(zhì)與功能食品北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，功能食品科學(xué)技術(shù)研究院，北京 100191)

殼聚糖(chitosan)是由甲殼素(chitin)經(jīng)脫乙?；幚砻撊ゴ蟛糠忠阴；蟮玫降膭?dòng)物多糖。以殼聚糖為原料經(jīng)水解后得到的低聚糖稱為殼寡糖(chitooligosaccharide，COS)，又稱甲殼低聚糖。殼寡糖是自然界唯一帶正電的堿性多糖，具有抗氧化、抑菌、抗糖尿病、抗腫瘤等多種生物活性作用[1-4]，其水溶性、人體吸收率、吸濕保濕性以及抗菌能力均優(yōu)于殼聚糖，在保健食品開發(fā)方面具有較大的潛力和廣闊的前景。

阿爾茨海默病(Alzheimer’s disease，AD)是一種與年齡相關(guān)的進(jìn)行發(fā)展的中樞神經(jīng)退行性疾病，又稱老年性癡呆。臨床表現(xiàn)為記憶能力不斷減退、認(rèn)知能力不斷惡化，日常生活能力進(jìn)行性衰退，同時(shí)伴有各種精神疾病癥狀和行為障礙。AD有3個(gè)典型的病理學(xué)特征：神經(jīng)細(xì)胞大量凋亡，神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)神經(jīng)纖維纏結(jié)(neurofibrillar tangles，NFTs)以及神經(jīng)細(xì)胞外老年斑(senile plaque，SP)的形成。AD研究發(fā)現(xiàn)，殼寡糖對(duì)神經(jīng)細(xì)胞、Tau蛋白、β-分泌酶(β-secretase)、活性氧、二價(jià)銅離子、乙酰膽堿酯酶、血管緊張肽轉(zhuǎn)化酶以及腎素等均有一定的影響，對(duì)阿爾茨海默病的防治有著重要意義。本文結(jié)合阿爾海默茨病發(fā)病機(jī)制及殼寡糖特性，綜述殼寡糖對(duì)阿爾海默茨病的防治機(jī)制，旨在為殼寡糖在保健食品中的開發(fā)與利用提供一定的參考。

1 AD的發(fā)病機(jī)制

1.1 β-淀粉樣蛋白級(jí)聯(lián)假說

β-淀粉樣蛋白(β-amyloid，Aβ)是一種由39～43個(gè)氨基酸殘基組成的多肽，由淀粉樣前體蛋白(amyloid precursor protein，APP)經(jīng)β-分泌酶和γ-分泌酶裂解后形成。正常人體內(nèi)的APP主要由α-分泌酶和γ-分泌酶通過非淀粉樣途徑降解為可溶性的sAPPα和不具有致病性的p83片段及羧基端片段；而AD患者腦中的APP主要由β-分泌酶和γ-分泌酶通過淀粉途徑降解為可溶的sAPPβ、Aβ和羧基端片段[5]。Aβ片段具有較強(qiáng)的自聚性，可通過寡聚化形成二聚體、三聚體、甚至更大的聚合體，最終轉(zhuǎn)化成不可溶的纖維狀聚合物，在細(xì)胞間沉積形成老年斑[6]。β-淀粉樣蛋白級(jí)聯(lián)假說由Hardy等[7]在1992年首次提出。該學(xué)說認(rèn)為，當(dāng)APP的代謝平衡被打破，引起Aβ的異常聚集，進(jìn)而引起神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)級(jí)聯(lián)病理反應(yīng)，如突觸損傷、Tau蛋白的超級(jí)磷酸化、神經(jīng)元死亡、神經(jīng)元纖維纏繞等，導(dǎo)致記憶和認(rèn)知功能障礙，產(chǎn)生AD癥狀。

1.2 自由基學(xué)說

與衰老有關(guān)的自由基主要是人體代謝過程中產(chǎn)生的，對(duì)于包括阿爾茨海默病在內(nèi)的神經(jīng)疾病有著重要影響。自由基攻擊生命大分子，如脂類、核糖核酸等，損傷細(xì)胞膜及細(xì)胞器，嚴(yán)重破壞神經(jīng)元功能，最終造成其調(diào)亡。兩種脂質(zhì)過氧化的產(chǎn)物4-羥基壬烯(4-hydroxynonenal，HNE)和2-丙烯醛(2-propenal)通過邁克爾加成反應(yīng)與突觸蛋白的半胱氨酸、組氨酸和賴氨酸殘基共價(jià)結(jié)合，向蛋白質(zhì)中引入羰基，使蛋白質(zhì)發(fā)生氧化性修飾，造成蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能的改變[8]。另外，有研究發(fā)現(xiàn)[9]，NT2神經(jīng)元中氧化應(yīng)激的增加可以使Aβ的表達(dá)增多。研究人員發(fā)現(xiàn)兩種經(jīng)典的助氧化劑H2O2和FeSO4將導(dǎo)致NT2神經(jīng)元細(xì)胞產(chǎn)生大量的HNE，進(jìn)而使得Aβ在短時(shí)間內(nèi)大量增加，對(duì)神經(jīng)細(xì)胞產(chǎn)生毒性。

1.3 鈣離子穩(wěn)態(tài)失調(diào)學(xué)說

鈣離子穩(wěn)態(tài)失調(diào)學(xué)說認(rèn)為，細(xì)胞內(nèi)鈣離子水平持續(xù)紊亂是導(dǎo)致AD發(fā)生的一個(gè)關(guān)鍵因素，細(xì)胞外環(huán)境內(nèi)流的鈣以及細(xì)胞內(nèi)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)儲(chǔ)存的鈣的調(diào)節(jié)控制著鈣信號(hào)，而神經(jīng)元的許多功能依賴于鈣信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)，鈣穩(wěn)態(tài)失調(diào)對(duì)神經(jīng)元長(zhǎng)時(shí)程突觸增強(qiáng)效應(yīng)有著較大影響，進(jìn)而使得神經(jīng)元突觸可塑性降低[10-11]。此外，鈣離子濃度與Aβ之間的正反饋機(jī)制，也促進(jìn)著AD的發(fā)生與發(fā)展。鈣離子濃度的升高使得Aβ的產(chǎn)生增加，而Aβ又反過來影響鈣離子穩(wěn)態(tài)，并形成惡性循環(huán)[11]。

1.4 炎癥反應(yīng)學(xué)說

在AD患者大腦中，持續(xù)發(fā)現(xiàn)多種炎癥標(biāo)記物，如包括α1-抗胰凝乳蛋白酶(alpha 1-antichymotrypsin)和C反應(yīng)蛋白(C-reactive)在內(nèi)的急性期蛋白、補(bǔ)體、激活的小膠質(zhì)細(xì)胞和星型膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞等[12]。其中，激活的小膠質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生大量的炎癥因子，如白介素-6(interleukin-6，IL-6)、白介素-1(interleukin-1，IL-1)等；激活的星型膠質(zhì)細(xì)胞包裹在SP周圍，在妨礙小膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)Aβ吞噬的同時(shí)，產(chǎn)生炎性物質(zhì)，如前列腺素、IL-1等。炎癥反應(yīng)學(xué)說認(rèn)為，這些炎癥因子與炎癥相關(guān)的蛋白誘發(fā)神經(jīng)炎癥反應(yīng)并導(dǎo)致神經(jīng)元的損傷與凋亡[13]。

1.5 其他學(xué)說

AD的發(fā)病機(jī)制遠(yuǎn)不止上訴4種學(xué)說。基因?qū)W說認(rèn)為，目前發(fā)現(xiàn)的19號(hào)染色體上的載脂蛋白E基因(APOE基因)、14號(hào)染色體上的早老素1基因(PSEN1基因)，1號(hào)染色體上的早老素2基因(PSEN 2基因)、12號(hào)染色體上的α2巨球蛋白基因(A2M基因)等基因，對(duì)于AD的誘發(fā)起著直接或間接的作用，但機(jī)制目前尚不完全清除，有待進(jìn)一步研究探索[14]。Tau蛋白異常磷酸化學(xué)說認(rèn)為，AD腦中Tau蛋白發(fā)生過度磷酸化，聚集形成纏結(jié)，破壞組成神經(jīng)細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)的微管系統(tǒng)，各種營(yíng)養(yǎng)運(yùn)輸幾乎中斷，嚴(yán)重影響神經(jīng)細(xì)胞的正常功能。鋁中毒學(xué)說認(rèn)為，鋁介導(dǎo)Tau蛋白磷酸化，通過取代三磷酸鳥苷(GTP)結(jié)合位點(diǎn)上的鎂而影響微管聚合，促進(jìn)NFT和SP的形成并聚集在NFT中[15]。膽堿能損傷學(xué)說認(rèn)為，AD患者基底前腦區(qū)膽堿能神經(jīng)元減少，重要神經(jīng)遞質(zhì)——乙酰膽堿(Ach)的合成、釋放和儲(chǔ)存減少，同時(shí)一些相關(guān)酶類如膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(ChAT)、乙酰膽堿酯酶(AChE)的功能也發(fā)生不同程度的改變，進(jìn)而引起一系列AD的臨床表現(xiàn)[16]。興奮性氨基酸學(xué)說認(rèn)為，一些興奮性氨基酸尤其是谷氨酸(Glu)的快速興奮作用引起的去極化，使得Cl―、Na+及水內(nèi)流，膜電位依賴式谷氨酸R(GluR)激活，進(jìn)而引起細(xì)胞滲透性溶解和Ca2+大量?jī)?nèi)流，最終導(dǎo)致神經(jīng)元受損[17]；另外，Glu的失調(diào)將使得Glu持續(xù)刺激N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)，引起大量鈣內(nèi)流，導(dǎo)致興奮性毒性[18]。總之，AD的發(fā)生不是一個(gè)單一因素影響的結(jié)果，而是一個(gè)多因素相互作用的復(fù)雜過程，其確切的發(fā)病機(jī)制還有待進(jìn)一步的研究和探索。

2 殼寡糖對(duì)阿爾茨海默病的防治作用

2.1 對(duì)神經(jīng)元細(xì)胞的保護(hù)及促進(jìn)再生作用

神經(jīng)元細(xì)胞大量凋亡是阿爾茨海默病的三大病理特征之一，其發(fā)生可能與神經(jīng)突觸的大量丟失、Aβ的過度表達(dá)[19]、谷氨酸受體及鈣離子平衡失調(diào)[20]等諸多因素有關(guān)。Gong等[21]研究發(fā)現(xiàn)，將周圍神經(jīng)受損的兔子分別靜脈注射殼寡糖1.5、3mg/kg后，周圍神經(jīng)細(xì)胞的再生能力明顯較好，分別是空白對(duì)照組的1.6倍和2.4倍。Jiang等[22]用大鼠代替兔子進(jìn)行上述實(shí)驗(yàn)，得到了類似的結(jié)果，這說明殼寡糖對(duì)周圍神經(jīng)細(xì)胞具有保護(hù)及促進(jìn)再生的作用，且這種作用與劑量有量效關(guān)系。Yang等[23]研究了殼寡糖在體外對(duì)PC-12細(xì)胞神經(jīng)元分化的影響，發(fā)現(xiàn)用殼寡糖處理后的PC-12細(xì)胞，其突觸生長(zhǎng)和細(xì)胞活力均得到了增強(qiáng)，PC-12細(xì)胞神經(jīng)絲H的mRNA(或蛋白)和鈣黏著蛋白的表達(dá)也被上調(diào)。谷氨酸鹽受體是興奮性毒損傷的主要參與者，可使細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度升高，進(jìn)而引發(fā)一系列不利于神經(jīng)元的反應(yīng)。Zhou Songlin等[24]研究發(fā)現(xiàn)，殼寡糖(分子質(zhì)量800D)能保護(hù)海馬神經(jīng)元免受谷氨酸鹽誘導(dǎo)的神經(jīng)毒性的傷害。經(jīng)一定濃度殼寡糖預(yù)先處理后，由谷氨酸鹽導(dǎo)致的海馬神經(jīng)元凋亡有了一定程度的緩解；同時(shí)，因谷氨酸鹽引起的鈣離子濃度升高和半胱天蛋白酶-3(caspase-3)活性增強(qiáng)也受到了抑制，從而緩解了以上兩種原因?qū)е碌暮ｑR神經(jīng)元凋亡。

2.2 抑制β-分泌酶活性

β-分泌酶在阿爾茨海默病的發(fā)生和發(fā)展中起著重要作用，殼寡糖對(duì)β-分泌酶的抑制作用是治療AD的一個(gè)新靶點(diǎn)，對(duì)AD的防治有著重要意義。Byun等[25]發(fā)現(xiàn)幾種脫乙酰度和分子質(zhì)量不同的殼寡糖，對(duì)β-分泌酶的活性均有一定的抑制作用，抑制強(qiáng)度與殼寡糖的脫乙酰度和分子質(zhì)量有關(guān)。相同脫乙酰度的殼寡糖，中等分子質(zhì)量的抑制效果最好；相同分子質(zhì)量的殼寡糖，脫乙酰度越高的抑制效果越好，最后發(fā)現(xiàn)分子質(zhì)量在3～5kD之間的90%脫乙酰度的殼寡糖(90-MMWCOS)顯示出了最高的β-分泌酶抑制活性，抑制劑的抑制模式為非競(jìng)爭(zhēng)性抑制。

2.3 抑制Tau蛋白異常磷酸化

NFT是阿爾茨海默病的三大病理特征之一，其主要成分是Tau蛋白。正常情況下，Tau蛋白可以結(jié)合一定數(shù)量的磷酸分子；而在AD腦中，Tau蛋白則發(fā)生過度磷酸化，最終導(dǎo)致神經(jīng)細(xì)胞的死亡。施美君等[26]研究了殼寡糖對(duì)岡田酸(OA)誘導(dǎo)的SD大鼠海馬神經(jīng)元Tau蛋白過度磷酸化的抑制作用。將不同濃度殼寡糖預(yù)處理組與OA損傷組相比較，發(fā)現(xiàn)不同濃度殼寡糖預(yù)處理組神經(jīng)元細(xì)胞形態(tài)均有所改善，部分細(xì)胞突起較OA損傷組明顯，細(xì)胞存活率均有所上升，細(xì)胞上清液中LDH含量均有所下降。同時(shí)還發(fā)現(xiàn)，殼寡糖預(yù)處理組各組的海馬神經(jīng)元細(xì)胞Tau-pSer396陽性表達(dá)較OA損傷組均有所下降，并且以上各種改善均以殼寡糖質(zhì)量濃度20μg/mL和40μg/mL效果最為明顯。說明殼寡糖能夠保護(hù)OA引起的SD大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞的損傷并抑制Tau蛋白的異常磷酸化。而這種抑制作用可能與殼寡糖的抗氧化作用有關(guān)，活性氧(ROS)引起的鈣穩(wěn)態(tài)失調(diào)使得依賴性蛋白激酶和鈣調(diào)蛋白激酶激活，進(jìn)而導(dǎo)致蛋白激酶和蛋白磷酸酯酶比例失調(diào)，從而使得Tau蛋白傾向于異常磷酸化；此外，ROS亦能通過抑制能量代謝使得Tau蛋白激酶(TPK)的異構(gòu)體——糖元合成激酶-3(GSK-3)代償性激活，進(jìn)而也促進(jìn)了Tau蛋白的異常磷酸化。殼寡糖清除ROS的作用，使得Tau蛋白異常磷酸化受到了抑制。

2.4 抗氧化作用

近年來研究發(fā)現(xiàn)，殼寡糖具有較好的抗氧化作用，可減少自由基的氧化損傷，從而對(duì)細(xì)胞起到保護(hù)作用。多項(xiàng)對(duì)殼寡糖在體外的抗氧化作用的研究表明，殼寡糖對(duì)羥自由基、超氧陰離子、H2O2、DPPH自由基等都有較好的清除能力，其原因可能是殼寡糖上的—NH2基團(tuán)與自由基相結(jié)合，使自由基轉(zhuǎn)變?yōu)楦€(wěn)定的物質(zhì)，中止了鏈反應(yīng)，而這種能力與多種因素相關(guān)。

Je等[27]發(fā)現(xiàn)殼寡糖的脫乙酰度和分子質(zhì)量的大小對(duì)其清除自由基的能力強(qiáng)弱起到?jīng)Q定性作用，具有最強(qiáng)自由基清除能力的是最大脫乙酰度的中等分子質(zhì)量的殼聚糖。李曉晶[28]發(fā)現(xiàn)殼寡糖清除DPPH自由基的能力隨著殼寡糖溶液質(zhì)量濃度的增加而增強(qiáng)。張敬晗等[29]研究了殼聚糖及其衍生物、殼寡糖以及羧甲基殼聚糖清除羥自由基的能力，發(fā)現(xiàn)這些物質(zhì)的抗氧化能力在一定質(zhì)量濃度范圍內(nèi)均隨質(zhì)量濃度增加而增大，其中殼寡糖在質(zhì)量濃度為0.32mg/mL時(shí)能達(dá)到97.81%的羥自由基清除率。Huang Ronghua等[30]發(fā)現(xiàn)低質(zhì)量濃度的殼寡糖衍生物的自由基清除能力隨著其取代度的增加而降低，但高質(zhì)量濃度的殼寡糖衍生物沒有發(fā)現(xiàn)取代度與抗氧化能力之間的關(guān)系。除取代度外，取代基團(tuán)的性質(zhì)對(duì)自由基清除能力也有一定影響。有研究發(fā)現(xiàn)[31]，殼寡糖清除ROS的能力與殼寡糖分子質(zhì)量大小有關(guān)系，相比小分子質(zhì)量的殼寡糖而言，中等分子質(zhì)量的殼寡糖清除自由基的能力較強(qiáng)，其原因可能與溶解度有關(guān)。

而多項(xiàng)殼寡糖在體內(nèi)的抗氧化作用研究也發(fā)現(xiàn)，殼寡糖對(duì)體內(nèi)自由基代謝紊亂有改善作用，能使超氧化物歧化酶活力增加，丙二醛濃度減少[32-33]。張光等[34]發(fā)現(xiàn)，適當(dāng)質(zhì)量濃度的殼寡糖對(duì)兩種AD模型細(xì)胞——swe型和Δ9/swe型N2a細(xì)胞中活性氧的水平有明顯的抑制作用，分別在殼寡糖處理后48h和24h出現(xiàn)明顯抑制效果，達(dá)到較好抑制效果的殼寡糖濃度為0.1～1mg/mL。張吉等[35]研究了殼寡糖在細(xì)胞外對(duì)DPPH自由基、H2O2和羥自由基的清除作用以及對(duì)脂多糖誘導(dǎo)的N9小膠質(zhì)細(xì)胞的保護(hù)作用，發(fā)現(xiàn)殼寡糖能有效清除DPPH自由基和羥自由基，但不能清除H2O2；同時(shí)發(fā)現(xiàn)其能降低脂多糖誘導(dǎo)的N9細(xì)胞培養(yǎng)液中NO水平，降低細(xì)胞內(nèi)ROS水平，減少細(xì)胞凋亡，進(jìn)而對(duì)N9小膠質(zhì)細(xì)胞起到保護(hù)作用。

2.5 螯合銅離子

銅離子易與不同聚集形式的淀粉樣蛋白絡(luò)合形成復(fù)合物，并在老年斑內(nèi)沉積。一方面，這種Aβ-Cu復(fù)合物具有一定的神經(jīng)毒性，會(huì)在氧化應(yīng)激過程中產(chǎn)生過氧化氫，促進(jìn)Aβ沉積；另一方面，Aβ在催化反應(yīng)循環(huán)中，也能使Cu(Ⅱ)還原為Cu(Ⅰ)，同時(shí)利用O2和生物還原劑作為底物催化產(chǎn)生過氧化氫，損害神經(jīng)細(xì)胞。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，殼寡糖對(duì)銅離子有較好的吸附作用，并且這種吸附作用與殼寡糖的取代度、溶液pH值、溶液濃度和溫度等因素有關(guān)[36]。其機(jī)理可能是殼寡糖分子鏈中的羥基、氨基及其他活性基團(tuán)可以形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的籠形分子，對(duì)銅離子有較好的配位作用，能形成穩(wěn)定的螯合物[37]。另外，Xu Wei等[38]前期研究發(fā)現(xiàn)，殼寡糖(分子質(zhì)量1500D，脫乙酰度 90%)能有效地對(duì)抗大鼠皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞中由二價(jià)銅離子引起的神經(jīng)毒性，并且通過2’,7’-二氯熒光黃雙乙酸鹽(DCFH-DA)檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)殼寡糖能抑制二價(jià)銅離子引起的皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)活性氧水平的升高。

2.6 抑制乙酰膽堿酯酶、血管緊張肽轉(zhuǎn)化酶及腎素

殼寡糖具有抑制乙酰膽堿酯酶、血管緊張肽轉(zhuǎn)化酶及腎素的作用。乙酰膽堿酯酶是將腦內(nèi)重要神經(jīng)遞質(zhì)——乙酰膽堿水解為膽堿和乙酸的水解酶，能抑制堿能神經(jīng)元的活性，使腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)出現(xiàn)紊亂。并且，乙酰膽堿酯酶與Aβ之間有相互促進(jìn)表達(dá)的作用[39-40]。因而乙酰膽堿酯酶活性的抑制對(duì)AD的防治有重要意義。有研究發(fā)現(xiàn)[41]，幾種殼寡糖的衍生物——氨基殼寡糖、二甲基殼寡糖和二乙基殼寡糖對(duì)乙酰膽堿酯酶的活性均有抑制作用，且疏水性最強(qiáng)的二乙基殼寡糖抑制能力越大，可能與疏水相互作用有關(guān)。另有研究發(fā)現(xiàn)[42]，殼寡糖的脫乙酰度和分子質(zhì)量與殼寡糖對(duì)乙酰膽堿酯酶的抑制能力也有關(guān)系，脫乙酰度較高、分子質(zhì)量居中的殼寡糖效果較好。

血管緊張肽轉(zhuǎn)化酶(angiotensin converting enzyme，ACE)是催化血管緊張肽Ⅰ轉(zhuǎn)化為血管緊張肽Ⅱ的一種酶，而腎素(renin)則可把緊張肽原轉(zhuǎn)變成血管緊張肽Ⅰ，這兩種物質(zhì)的增加，不利于腦血管的擴(kuò)張，會(huì)導(dǎo)致腦內(nèi)流血量的減少，從而影響腦內(nèi)新陳代謝，促進(jìn)AD的發(fā)生與發(fā)展。研究發(fā)現(xiàn)[43-44]改性的N-乙?；鶜す烟?N-acetyl chitooligosaccharide，NA-COS)、氨基殼寡糖(aminoethyl chitooligosaccharide，AE-COS)對(duì)上述兩物質(zhì)的活性有抑制作用，并且以脫乙酰程度達(dá)到90%，中等分子質(zhì)量的殼寡糖效果為最佳。

3 結(jié) 語

阿爾海默茨病自1906年首次提出以來，已有一百多年的歷史，其致病機(jī)理及防治措施的研究一直受到各國(guó)學(xué)者的廣泛關(guān)注，隨著人口老齡化程度的加劇，患者家庭及社會(huì)的負(fù)擔(dān)越來越重，使得阿爾茨海默病更加受到重視。殼寡糖是唯一的帶正電荷的天然堿性寡糖，在自然界中來源廣泛，含量豐富，具有多種活性成分。隨著殼寡糖提取純化技術(shù)的不斷發(fā)展，殼寡糖活性作用研究日益成為熱點(diǎn)話題。我國(guó)保健食品正向著功效成分明確、作用機(jī)理清楚的第三代保健食品的方向發(fā)展，本文綜述殼寡糖在阿爾茨海默病的防治過程中所發(fā)揮的作用并簡(jiǎn)要闡述其作用機(jī)制，旨在探索阿爾茨海默病的防治措施，同時(shí)為生物活性物質(zhì)殼寡糖在保健食品中的深入利用提供一定的理論基礎(chǔ)。

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